健脾祛湿散结消肿汤联合石氏伤科推拿疗法治疗痰湿阻络型膝关节骨性关节炎60例

目的:观察健脾祛湿散结消肿汤联合石氏伤科推拿疗法治疗痰湿阻络型膝关节骨性关节炎的临床疗效。方法:将120例膝关节骨性关节炎患者按照随机数字表法分为观察组和对照组,每组各60例。对照组给予关节腔内注射玻璃酸钠进行治疗,观察组在对照组基础上给予健脾祛湿散结消肿汤联合石氏伤科推拿治疗。比较两组患者的临床疗效及治疗前后临床症状积分、膝关节功能评分变化情况,检测两组患者治疗前后红细胞C3b受体花环率(erythrocyte C3b receptor rosette rate,E-C3bRR)及免疫复合物花环率(erythrocyte immune complex rosette rate,E-ICR)。结果:两组患者治疗后临床症状积分低于本组治疗前,且观察组治疗后低于对照组治疗后,差异具有统计学意义(P0.05)。观察组有效率为96.67%,对照组有效率为76.67%,两组患者有效率比较,差异具有统计学意义(P0.05)。两组患者治疗后膝关节功能疼痛、功能、活动度、屈曲畸形、肌力、稳定性及总分高于本组治疗前,且观察组治疗后高于对照组治疗后,差异具有统计学意义(P0.05)。两组患者治疗后E-C3bRR高于本组治疗前,E-ICR低于本组治疗前,且观察组E-C3bRR高于对照组,E-ICR低于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:健脾祛湿散结消肿汤联合石氏伤科推拿可改善痰湿阻络型膝关节骨性关节炎患者的临床症状,其作用机制可能与提高E-C3bRR水平、降低E-ICR水平,改善机体免疫反应有关。     

基于网络药理学和分子对接技术探讨生脉注射液抗新型冠状病毒肺炎的作用机制

目的采用网络药理学与分子对接技术探讨生脉注射液的活性成分和治疗新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的潜在作用机制。方法利用TCMSP及BATMAN-TCM数据库筛选生脉注射液的活性化合物,通过TCMSP及Targetnet在线数据库预测作用靶点,通过Cytoscape3.7.1构建活性成分-作用靶点网络图;在GeneCards及OMIM数据库中以"coronavirus pneumonia"为关键词搜索冠状病毒肺炎相关疾病靶点,与生脉注射液化合物靶点进行交集筛选出共同靶点作为研究靶点,将共同靶点导入STRING数据库获取数据后在Cytoscape 3.7.1软件中构建蛋白质-蛋白质相互作用网络图;利用R语言进行GO(gene ontology)功能、KEGG(Kyoto encyclopedia of genes and genomes)通路富集分析,预测其作用机制,并构建"成分-靶点-通路"网络图;通过DiscoveryStudio 2.5软件对关键靶点进行分子对接分析。结果生脉注射液筛选得到22个活性化合物,分别为邻苯二甲酸二辛酯、β-谷甾醇、当归酰基戈米辛O、戈米辛A、戈米辛R、五味子丙素、内南五味子酯乙、长南酸、南五味子内酯、香蒲木脂素B、新杜松烷酸A、新杜松烷酸B、新杜松烷酸C、新南五味子木脂宁、五味子内酯A、五味子内酯E、五味子酸、尿苷、薯蓣皂苷元、鸟嘌呤核苷、N-反式阿魏酰酪胺、豆甾醇。相应作用靶点224个,与COVID-19的共同靶点16个,分别为CASP3、CASP8、PTGS2、BCL2、BAX、PRKCA、PTGS1、PIK3CG、F10、NOS3、DPP4、NOS2、TLR9、ACE、ICAM1、PRKCE,关键靶点涉及CASP3、PTGS2、NOS2、NOS3、ICAM1。GO功能富集分析得到生物过程(BP)条目771个,细胞组成(CC)条目11个,分子功能(MF)条目79个。KEGG通路富集分析筛选得到67条(P0.05)信号通路,主要涉及糖尿病并发症AGE-RAGE信号通路、凋亡通路、P53信号通路、小细胞肺癌通路等。分子对接结果显示与关键靶点对接较好的成分有五味子内酯E、豆甾醇、N-反式阿魏酰酪胺。结论生脉注射液中的活性化合物五味子内酯E、豆甾醇、N-反式阿魏酰酪胺等能作用于CASP3、PTGS2、NOS2、NOS3等靶点调节多条信号通路发挥抗炎、免疫调节、抗休克、增加血氧饱和度等作用,从而可能发挥对COVID-19的治疗作用。     

维生素D联合糠酸莫米松乳膏治疗婴幼儿中重度湿疹的临床分析

目的:分析维生素D联合糠酸莫米松乳膏治疗婴幼儿中重度湿疹的临床疗效并探究维生素D对患儿免疫功能的影响。方法:104例中重度湿疹婴幼儿随机分为对照组和治疗组各52例,对照组用0.1%糠酸莫米松乳膏治疗,治疗组在对照组基础上予维生素D制剂阿法骨化醇滴剂治疗。分析治疗后2组患儿治疗总有效率,同时检测患儿治疗前及治疗4周后血清25-(OH)D3、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素(IL-2)、IL-4、IL-13水平。结果:治疗组总有效率为92.31%,优于对照组(76.92%),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组治疗后血清IFN-γ、IL-2水平较治疗前上升,并明显高于对照组,血清IL-4、IL-13水平较治疗前下降,并明显低于对照组(P<0.05)。结论:维生素D能调节中重度湿疹婴幼儿免疫功能,因此维生素D联合糠酸莫米松乳膏能提高中重度湿疹婴幼儿治疗疗效,值得在临床上应用。     

脑梗死患者血清五聚素3、甲壳质酶蛋白40和白细胞分化抗原36表达及检测临床意义

目的:探讨脑梗死患者血清中五聚素3(PTX-3)、甲壳质酶蛋白40(YKL-40)和白细胞分化抗原36(CD_(36))的表达特征,分析其临床意义及相关性,以期为临床工作提供支持。方法:收集97例急性脑梗死患者作为观察组,留取空腹血清,收集无明显器质性病变的成人血清标本32例作为对照组。应用酶联免疫吸附实验检测两组中PTX-3、YKL-40和CD_(36)的表达量,并进行统计学分析。结果:两组血清中PTX-3、YKL-40和CD_(36)的表达差别有统计学意义,观察组血清中PTX-3、YKL-40和CD_(36)的表达与梗死体积、病变严重程度及是否伴有高血压病密切相关,线性相关分析显示观察组中PTX-3和YKL-40的表达呈正相关性,其它指标间均未见明显相关性。结论:急性脑梗死患者血清中PTX-3、YKL-40和CD_(36)高表达,与病变的严重程度有关,也与患者是否伴有高血压有关,PTX-3和YKL-40具有协同正向作用。     

高级别胃肠胰神经内分泌肿瘤-NET G3的临床病理特征分析

  目的  分析高级别胃肠胰神经内分泌肿瘤（high-grade G3 gastroenteropancreatic neuroendocrine tumors，GEP NET G3）的临床病理特征及生存预后影响因素。  方法  回顾性分析2012年9月至2019年7月间北京大学肿瘤医院收治的86例GEP NET G3，收集临床病理及随访资料，采用单因素Log-rank检验和多因素Cox回归模型进行预后影响因素分析。  结果  86例GEP NET G3的原发肿瘤部位包括胰腺（40例）、胃肠（37例）以及原发肿瘤不明（9例）。镜检肿瘤均分化良好，呈器官样、巢状生长，局灶可见假腺样、细条索样或缎带样结构。免疫组织化学分析显示，肿瘤的Ki-67指数范围为21%~60%，中位值为30%，生长抑素受体2（somatostatin receptor type 2，SSTR2）的阳性率为83.9%（26/31），在检测病例中没有发现微卫星不稳定和P53异常表达（分别为0/24、0/11）。生存分析表明，获得随访的76例患者，27例患者死亡，中位生存时间为48.6（26.6~70.6）个月，确诊时有无远处转移和能否进行根治性手术切除对患者的总生存影响差异有统计学意义（P < 0.05），但患者的年龄、性别、原发肿瘤部位、确诊时血清神经元特异性烯醇化酶（neuron specific enolase，NSE）水平以及Ki-67指数对患者的总生存影响无显著差异（P>0.05）。多因素分析显示，确诊时有远处转移是影响患者生存的独立危险因素（P=0.01；HR=7.33，95% CI:1.56~34.10）。  结论  GEP NET G3的确诊依赖于组织病理学和免疫组织化学检测，易发生远处转移是其临床特点和主要的预后影响因素。      

丹参F3'5'H基因克隆及其序列分析

目的:为了验证丹参类黄酮-3′,5′-羟基化酶(Flavonoid 3′,5′-hydroxylase,F3′5′H)基因与丹参花色表型的相关性,本研究克隆并分析了紫花丹参99-3株系和一些白花丹参中的F3′5′H基因。方法:本研究通过提取紫花丹参和白花丹参中的总RNA,再将其反转录得到cDNA,以此cDNA为模板,利用PCR方法扩增获得F3′5′H基因全长序列。再利用生物信息学分析方法,分析了该基因编码蛋白质的理化性状、结构域、系统进化等特点,并预测了该蛋白质的亚细胞定位、跨膜区等;利用实时定量PCR方法检测了该基因的表达特异性;利用毛状根遗传转化方法获得了该基因的过表达阳性毛状根株系。结果:F3′5′H基因全长1551 bp,编码516个氨基酸,相对分子质量为57.4 kDa。该基因在丹参花中高丰度表达。在42份(紫花25份;白花17份)丹参样品中发现一个单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymorphisms,SNP)位点在紫花和白花丹参中呈现与花色相关的稳定变化。系统发育分析表明丹参F3′5′H与美女樱的F3′5′H具有较高序列同源性。获得了过表达F3′5′H的毛状根株系。结论:本研究在丹参中克隆到F3′5′H基因,对其序列进行了分析,为进一步研究丹参F3′5′H基因的功能奠定基础。     

健脾理气方通过下调NLRP3炎症小体的活化防治内毒素性急性肝损伤大鼠

目的:在网络药理学研究基础上,基于NLRP3炎性小体活化通路探讨健脾理气方对大鼠急性肝损伤(ALI)的防治作用。方法:(1)利用网络药理学技术预测分析健脾理气方通过抗炎和免疫调节治疗ALI的潜在靶点。(2)将雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为正常对照组、模型对照组以及健脾理气方6. 05、12. 1、24. 2 g/kg组,除正常对照组大鼠按体重一次性腹腔注射生理盐水外,其余各组大鼠给予腹腔注射600 mg/kg D-氨基半乳糖(D-GalN)诱导ALI模型。造模后健脾理气方6. 05、12. 1、24. 2 g/kg组立即分别灌胃相应体积药物,每日两次,给药间隔为12 h,连续给药2 d。末次给药后立即取材,采用HE染色观察肝脏组织病理形态学的改变;生物化学法检测大鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和γ-谷氨酰转肽酶(GGT)及肝脏组织中的Caspase-1活性,ELISA法检测血清炎症因子IL-1β、IL-18和NF-κB含量; Western Blot法检测肝脏组织中衔接分子(ASC)和炎性小体(NLRP3)蛋白表达水平的变化。结果:(1)网络药理学预测结果显示,健脾理气方可能通过NLRP3炎性小体等信号通路防治ALI。(2)与正常对照组相比,模型对照组大鼠肝脏组织损伤指数显著升高,血清ALT、AST、IL-1β、NF-κB含量明显升高,Caspase-1酶活性均明显升高,肝组织NLRP3和ASC蛋白表达水平明显上调(P <0. 05或P <0. 01);与模型对照组相比,健脾理气方12. 1、24. 2 g/kg组的大鼠肝脏组织损伤指数显著降低,12. 1 g/kg组的血清ALT、AST、GGT和NF-κB含量明显降低,及肝组织NLRP3、ASC蛋白表达量均明显下调(P <0. 05或P <0. 01),24. 2 g/kg组的血清GGT、IL-18和NF-κB含量明显降低,Caspase-1酶活性明显降低及肝组织NLRP3和ASC蛋白表达量明显下调(P <0. 05或P <0. 01)。结论:健脾理气方12. 1、24. 2 g/kg组对D-GalN诱导的急性肝损伤均具有一定的保护作用,其中以12. 1 g/kg组的健脾理气方防治的效果最佳;其作用的分子机制可能在于下调NLRP3炎症小体的活化;这一结果与网络药理学的预测结果相一致。     

E-cadherin在妇科三大恶性肿瘤中表达的意义及研究进展

E-钙黏蛋白（E-cadherin）是一种主要存在于人和动物上皮的黏附分子，主要功能是维持正常上皮细胞形态和结构完整性。现已在多种肿瘤研究中发现，E-cadherin表达的下调，极易造成肿瘤细胞向外周组织发生浸润和远端转移，但与E-cadherin相关研究在妇科恶性肿瘤中进展缓慢，E-cadherin在子宫内膜癌、卵巢癌和宫颈癌病变过程的调控机制尚不完全清楚，而且肿瘤的发生和发展是多因素作用的过程，需要进一步加强研究，该文章就 E-cadherin在妇科三大妇科恶性肿瘤中表达的意义及研究进展进行综述。     

单羧酸转运蛋白1促进胰腺导管癌细胞浸润转移的机制研究

背景与目的：单羧酸转运蛋白1（monocarboxylate transporter 1，MCT1）是细胞转运乳酸、丙酮酸等代谢产物及能量物质的一种重要蛋白质，其在胰腺导管癌中的作用及机制鲜有研究报道。该研究旨在探讨MCT1在胰腺导管癌中的表达及临床病理学意义。方法：纳入78例胰腺导管癌患者的癌组织及癌旁正常组织，运用免疫组织化学技术检测MCT1在癌组织和癌旁正常组织中的表达水平并分析其临床病理学意义。在体外细胞系水平上，我们运用胰腺癌细胞系PANC-1和Capan-1，运用细胞克隆形成实验、细胞划痕和Transwell实验分析沉默MCT1后胰腺癌细胞增殖、迁移和浸润的改变。为明确MCT1的相关作用机制，我们通过生物信息学分析，预测miR-124-3p是MCT1的潜在调控微小RNA；为了进一步验证，我们运用双荧光素酶报告实验分析miR-124-3p对MCT1的调控效果；运用实时荧光定量聚合酶链反应（real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction，RTFQ-PCR）分别检测51对新鲜胰腺癌组织中MCT1和miR-124-3p的基因表达并分析两者的相关性。结果：MCT1的阳性表达主要位于细胞膜和细胞质。相比癌旁正常组织，MCT1在胰腺导管癌组织中显著高表达，其表达水平与胰腺导管癌的分化程度、临床分期、淋巴结转移和不良预后具有显著相关性。在体外细胞系水平上，沉默MCT1能够显著抑制胰腺癌细胞系PANC-1和Capan-1的增殖、迁移和浸润；miR-124-3p在胰腺癌组织中显著低表达，并且与MCT1 mRNA的表达具有显著负相关性，能够负调控MCT1的蛋白表达。结论：MCT1是胰腺导管腺癌的致癌基因，miR-124-3p能够负调控MCT1的表达。