丹参F3'5'H基因克隆及其序列分析

目的:为了验证丹参类黄酮-3′,5′-羟基化酶(Flavonoid 3′,5′-hydroxylase,F3′5′H)基因与丹参花色表型的相关性,本研究克隆并分析了紫花丹参99-3株系和一些白花丹参中的F3′5′H基因。方法:本研究通过提取紫花丹参和白花丹参中的总RNA,再将其反转录得到cDNA,以此cDNA为模板,利用PCR方法扩增获得F3′5′H基因全长序列。再利用生物信息学分析方法,分析了该基因编码蛋白质的理化性状、结构域、系统进化等特点,并预测了该蛋白质的亚细胞定位、跨膜区等;利用实时定量PCR方法检测了该基因的表达特异性;利用毛状根遗传转化方法获得了该基因的过表达阳性毛状根株系。结果:F3′5′H基因全长1551 bp,编码516个氨基酸,相对分子质量为57.4 kDa。该基因在丹参花中高丰度表达。在42份(紫花25份;白花17份)丹参样品中发现一个单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymorphisms,SNP)位点在紫花和白花丹参中呈现与花色相关的稳定变化。系统发育分析表明丹参F3′5′H与美女樱的F3′5′H具有较高序列同源性。获得了过表达F3′5′H的毛状根株系。结论:本研究在丹参中克隆到F3′5′H基因,对其序列进行了分析,为进一步研究丹参F3′5′H基因的功能奠定基础。     

卡波姆基质帕司烟肼凝胶体外抗结核活性及动物实验的研究

目的　观察卡波姆凝胶与帕司烟肼联合体外抗结核作用和支气管介入的安全性。方法　手工法、仪器法分别测定卡波姆凝胶与帕司烟肼药物的最小抑菌浓度和最小杀菌浓度及家兔经支气管介入的安全性试验。结果　帕司烟肼的卡波姆凝胶对H37Rv标准株、牛型结核分枝杆菌、草分枝杆菌MIC值分别为 0 1、0 1、0 4mg/L ,MBC值分别为 0 2、0 2和 1 6mg/L ;帕司烟肼的卡波姆凝胶与帕司烟肼单体MIC、MBC值无显著差异 ;家兔动物实验表明该药无任何毒副作用。结论　帕司烟肼凝胶具有与帕司烟肼单体相同的抗结核菌药效 ,卡波姆基质不影响帕司烟肼的抗菌活性 ;以卡波姆为基质的帕司烟肼凝胶应用安全     

以居民身份证编号的健康信息归结与共享作用探讨

依据居民身份证编码基本特征与优势,分析了就医过程中应用各种各样“就医卡”所产生的问题,探讨了利用居民身份证号码作为统一“就医卡”编码的可行性及作用意义。得出结论：利用居民身份证编号创建就医卡,不仅可以简化就医登记手续,方便管理,提高就医效率,而且减少资源浪费,还是消除信息孤岛的有力举措之一,对于区域医疗信息交换共享具有重要的意义。     

Goniotriol和8a-Isogoniotriol的合成

目的Goniotriol是从番荔枝科哥纳香属植物Goniothalamus sesquipedalis，all(Annonaceae)分离得到具有抗肿瘤活性的化合物，为了合成抗肿瘤化合物，改进合成路进行本实验研究。方法以α-D-葡庚糖酸-δ-内酯为原料，经8步反应对其进行了合成研究。结果根据药物设计原理，设计合成了Goniotriol和它的8位差向异构体8α-isogoniotriol,总产率分别为7.4％和14.3％。结论该合成路线可容易地合成目标化合物.     

丹参酮合成相关的SmCYP81C16基因克隆和功能研究

目的:丹参(Salvia miltiorrhiza)根中所含的丹参酮为二萜醌类化合物,而鉴定参与丹参酮合成的CYP450基因成为解析丹参酮生物合成途径分子机制的关键步骤。方法:本实验从丹参基因组和转录组数据中筛选到SmCYP81C16基因,采用RT-PCR方法克隆获得基因cDNA全长序列,利用生物信息学分析方法分析其所编码蛋白质的理化性质,预测该蛋白质二级结构、保守结构域等,建立系统发育进化树;利用实时荧光定量PCR方法检测了该基因的组织/器官表达特异性;通过遗传转化方法获得了该基因的过表达转基因毛状根株系,通过化学检测及代谢组学分析丹参酮类化合物在对照株系和过表达株系中的含量变化。利用实时荧光定量PCR方法检测了毛状根中丹参酮合成途径关键酶基因中的相对表达量。结果:SmCYP81C16基因全长1497 bp,编码498个氨基酸残基,该蛋白质相对分子质量为55.8 kDa;SmCYP81C16在丹参茎和根的周皮部高表达;通过化学检测及代谢组学分析发现,与对照株系比较,在SmCYP81C16过表达阳性株系中,丹参酮类化合物的含量升高;过表达毛状根中丹参酮合成途径关键酶基因的表达量显著上升。结论:本研究结果表明SmCYP81C16具有正向调控丹参酮生物合成的功能。本研究为利用生物技术方法提高丹参酮类化合物含量奠定基础。     

植物次生代谢物转运蛋白研究进展

植物在生命活动中产生一系列的次生代谢物,这些化合物在植物细胞内产生后,将转运至特定细胞器进行储存,或被分泌到细胞外。转运蛋白是一类膜蛋白,可介导生物膜内外化学物质的跨膜转运及信号交换,在植物次生代谢物的跨膜运输过程中发挥重要作用。阐明植物次生代谢物转运蛋白的转运功能,有助于解析次生代谢物生物合成及利用途径的分子机制,为开展药用植物活性次生代谢物的合成生物学研究提供重要元件。详细介绍了转运蛋白的结构与分类,综述了近年来植物次生代谢物转运蛋白的研究进展,总结了转运蛋白功能验证的研究方法,为药用植物次生代谢物的生物合成途径解析及开发利用提供参考。