小儿骨髓间充质干细胞生物学特性及多向分化潜能☆

背景：国内报道人骨髓间充质干细胞多取材于成人细胞，小儿骨髓间充质干细胞的研究较少。 目的：拟分离培养小儿的骨髓间充质干细胞，观察其生物学特性以及向成骨、成脂肪、成神经分化的潜能。 设计：观察对比实验。 单位：华中科技大学同济医学院。 材料：实验于2006-03/09在武汉同济医院骨科实验室完成，小儿骨髓间充质干细胞取自5~8岁因髋关节发育不良行骨盆截骨术的患儿，男1例，女2例，实验经过医院伦理委员会批准许可，并征得所有患儿家属知情同意。地塞米松、维生素C、β-甘油磷酸钠、甲基异丁酸黄嘌呤、胰岛素、吲哚醚辛、羟基丁酸苯甲醚均为Sigma 公司产品，二甲基亚砜为Amersco公司产品。 方法：经Percoll梯度分离接种获得小儿骨髓间充质细胞，倒置相差显微镜下观察细胞形态、排列分布情况。分别采用成骨细胞诱导剂（β-甘油磷酸钠，地塞米松，维生素C）、成脂肪细胞诱导液（地塞米松，甲基异丁酸黄嘌呤, 牛胰岛素, 吲哚美辛）及二甲基亚砜和羟基丁酸苯甲醚无血清培养基诱导剂干预细胞向成骨、脂肪、神经细胞分化，经免疫组织化学染色、PCR、免疫细胞染色方法检测成骨标志物（碱性磷酸酶、骨钙素mRNA、钙结节）、脂肪标志物（脂滴、PPARγ-2mRNA）、以及类神经标志物（尼克氏体、神经烯醇化酶、神经丝蛋白）。 主要观察指标：①小儿骨髓间充质细胞形态以及增殖情况。②成骨、脂肪及类神经标志物检测结果。 结果：①小儿骨髓间充质细胞贴壁容易，细胞细长梭形，增殖能力强，融合后呈旋涡状分布。②骨髓间充质细胞分别经各诱导剂诱导后，细胞形态均发生相应的变化，用化学染色、PCR、免疫细胞染色等方法检测成骨标志物、脂肪标志物及类神经标志物有明显阳性表达。 结论：小儿骨髓间充质细胞生长具有稳定增殖、传代的能力，具有成骨、成脂肪、成神经等多方向的定向分化潜能。     

BORIS、CyclinD1蛋白在上皮性卵巢癌中表达及临床意义

目的探讨印记位点调节样因子(BORIS)及细胞周期素D1(Cyclin D1)在上皮性卵巢癌发生发展中的作用。方法应用免疫组化S-P染色法,检测上皮性卵巢癌、卵巢良性肿瘤及正常卵巢组织石蜡切片中BORIS与Cyclin D1蛋白的表达情况。结果 BORIS及Cyclin D1蛋白在上皮性卵巢癌组中的表达水平均高于对照组及卵巢良性肿瘤组,组间比较,差异有统计学意义(P<0.05);BORIS和Cyclin D1蛋白的表达与上皮性卵巢癌的临床分期及病理分级有关(P<0.05);BORIS和Cyclin D1蛋白在上皮性卵巢癌中的阳性表达正相关(r=0.582,P<0.05)。结论 BORIS蛋白可能通过调控细胞周期参与上皮性卵巢癌的发生发展。     

微侵袭血肿清除术对高血压脑出血患者术后神经功能恢复及并发症的影响

目的 分析微侵袭血肿清除术对高血压脑出血患者术后神经功能恢复及并发症的影响。方法 选取2017年6月至2020年5月期间我院38例高血压脑出血患者,按照手术方式不同将患者分为微侵袭组（n=12）和大骨瓣组（n=26）。微侵袭组给予微侵袭血肿清除术治疗;大骨瓣组采用基底节区改良翼点入路,骨窗大小约为6 cm×8 cm。比较两组患者临床疗效、手术情况、临床神经功能缺失量表（NDS）评分、日常生活能力量表（ADL）评分以及并发症发生情况。结果 微侵袭组患者总好转率为91.67%,高于大骨瓣组的73.07%,差异无统计学意义（P>0.05）;微侵袭组手术时间、术中出血量明显小于大骨瓣组（P<0.05）,两组血肿清除率、住院时间比较无明显差异（P>0.05）;手术后3个月,两组患者NDS评分均明显低于本组手术前（P<0.05）,ADL评分均明显高于本组手术前（P<0.05）,微侵袭组患者NDS评分明显低于大骨瓣组（P<0.05）,ADL评分明显高于大骨瓣组（P<0.05）;两组患者颅内感染、肺部感染以及再出血并发症总发生率对比无统计学差异（P>0.05）。结论 与传统大骨瓣开颅术相比,微侵袭血肿清除术治疗高血压脑出血更加安全有效,患者术后神经功能恢复更好,并发症更少。     

ACE基因多态性与ACE、血管紧张素Ⅱ及醛固酮的关系

目的:探讨原发性高血压患者血管紧张素转化酶(ACE)基因插入/缺失(I/d)多态性与血清ACE、血管紧张素Ⅱ及醛固酮的关系。方法:应用PCR技术测定146例高血压患者的ACE基因型,并测定其血清ACE、血管紧张素Ⅱ及醛固酮浓度。结果:ACE在DD、ID、Ⅱ三种ACE基因型之间的差异有显著性,ACE活性DD>IDⅡ,而血管紧张素Ⅱ及醛固酮在三种基因型之间的差异无显著性。结论:ACE基因多态性与ACE密切相关,而与血清血管紧张素Ⅱ及醛固酮没有关系。     

复方丹参对大鼠脊髓损伤后细胞凋亡的影响

目的：观察大鼠脊髓损伤后应用复方丹参对细胞凋亡的影响以进一步探讨其对急性脊髓损伤治疗的可能性。方法：成年大鼠随机分为正常组、脊髓损伤后应用复方丹参组和应用生理盐水对照组，损伤1，2，4周后按改良的联合行为评分(combined behavioral score，CBS)方法评价大鼠双后肢神经功能恢复情况，然后在不同时间点(8h，1，3，7，14，28d)处死。用苏木精-伊红(HE)染色观察损伤脊髓组织病理变化，原位末端标记法(TUNEL法)标记凋亡细胞。结果：HE染色镜检发现脊髓组织病理学改变复方丹参组明显轻于生理盐水组。CBS评分在复方丹参组、生理盐水组7，14，28d时间点间比较差异有显著性意义(t=3．572，4．853，2．495，v=8；P&;lt;0．05或P&;lt;0．01)；复方丹参组、生理盐水组两组均发现凋亡细胞，且神经细胞凋亡指数在生理盐水组、复方丹参组8h，1，3，7，14，28d时间点间比较差异有显著性意义(t=2．533，1．201，3．342，3．027，2．953，2．282，v=18；P&;lt;0．05或P&;lt;0．01)。结论：复方丹参能抑制大鼠脊髓损伤后细胞凋亡，并对其继发性损害有多重的保护作用。     

运动锻炼对30d-6°头低位卧床所致承重骨丢失的影响

目的观察下肢肌力锻炼和功率车锻炼对30 d-6°头低位卧床引起骨丢失的防护效果,为筛选航天员暴露于空间微重力环境下运动锻炼方法提供参考。方法15名男性青年受试者分为卧床对照组、下肢肌力锻炼组和功率车锻炼组,每组5人,在30 d-6°头低位卧床期间,两个运动锻炼组共进行了25 d(次)的运动锻炼,下肢肌力组每天锻炼16~18 min,功率车组每天锻炼30 min。分别于卧床前和起床后测量了全身骨密度(BMD QDR-4500/W Hologic)和腰椎骨小梁比值(CTPhilips-Mx-8000)。结果与卧床前相比,对照组卧床以后全身骨矿含量显著下降(P0.05)、左髋总骨密度和右髋大转子骨密度显著下降(P0.01),第2~4腰椎骨小梁比值显著下降(P0.05),功率车锻炼组虽然全身骨密度显著增加,但是第3~4腰椎骨密度却显著下降(P0.05),下肢肌力锻炼组全身和腰椎及髋部等承重部位的骨矿含量和骨密度均无明显下降。结论30 d-6°头低位卧床可引起腰椎和髋骨等承重部位明显的骨丢失,功率车锻炼方法不能改善腰椎部位的骨丢失,下肢肌力锻炼方法对于维持全身和承重部位的骨密度具有明显的防护效果,该结果将对我国载人航天飞行失重对抗措施方案的制定提供重要的参考。     

飞行人员膝关节镜下前交叉韧带重建术后的康复护理

目的评价飞行员膝关节镜下前交叉韧带重建术后的护理效果。方法对15例前交叉韧带重建术后的飞行员进行心理护理及膝关节功能锻炼指导。结果 15例患者全部康复出院,无术后感染、关节粘连等并发症发生,膝关节功能恢复良好,均顺利恢复飞行。结论成功的手术、术后心理护理和膝关节功能锻炼是使患者能够顺利康复并重返飞行员岗位的重要保证。     

骨髓间充质干细胞增殖与成骨分化中电磁场激活ERK通路的作用

背景：研究表明电磁场可调节骨髓间充质干细胞的增殖和分化,但其具体机制尚不清楚。 目的：从ERK信号途径探讨电磁场诱导大鼠骨髓间充质干细胞增殖与分化成骨的作用。 方法：取第3代生长良好的大鼠骨髓间充质干细胞,暴磁组给予15 Hz、1 mT的正弦波电磁场刺激,PD98059+暴磁组在电磁场刺激前给予20 μmol/L ERK阻断剂PD98059,PD98059组仅给PD98059不进行电磁场刺激,对照组正常培养。电磁场刺激后,收集各组细胞,Western blot法检测ERK通路的活性,MTT法检测细胞增殖活性,碱性磷酸酶试剂盒检测细胞碱性磷酸酶活性。 结果与结论：电磁场刺激后,细胞ERK1/2磷酸化水平、细胞的增殖活性、及碱性磷酸酶活性均明显升高(P < 0.01);PD98059可明显抑制ERK1/2磷酸化水平及细胞增殖活性的升高(P < 0.01),而在一定程度上提高细胞的碱性磷酸酶活性(P < 0.01)。说明电磁场刺激可通过激活骨髓间充质干细胞ERK信号通路,并且主要通过该途径促进骨髓间充质干细胞的增殖;而在脉冲电磁场促进骨髓间充质干细胞分化成骨的过程中,激活ERK信号通路所起的作用较小。     

植入金属裸支架治疗急性冠脉综合征患者的长期疗效与安全性随访研究

目的　探讨植入金属裸支架（BMS）治疗急性冠脉综合征（ACS）患者的长期疗效和安全性。方法　选择2000—2005年北华大学附属医院住院植入BMS随访资料完整的ACS患者491例为研究对象,均行经皮冠状动脉介入治疗植入BMS。经住院冠状动脉造影随访、门诊随访或电话随访,记录主要终点事件。结果　平均随访（95±39）个月,随访期间累积171例发生主要心脏不良事件（MACE）,MACE发生率为34.83%,年均MACE发生率为4.38%。死亡68例（13.85%）,靶病变血管重建71例（14.46%）,靶血管重建28例（5.70%）,晚期支架内血栓（LST）和极晚期支架内血栓（VLST）0例,心力衰竭2例（0.41%）,冠状动脉旁路移植2例（0.41%）。发生支架内再狭窄106例（21.59%）,支架节段内再狭窄60例（12.22%）,支架内再狭窄合并支架节段内再狭窄127例（25.87%）。结论　植入BMS治疗ACS患者,远期MACE、LST、VLST发生率较低,安全性较好。     

82例高原肺挫伤的临床治疗

目的探讨高海拔地区肺挫伤的特点,以提高临床治疗效果。方法回顾性分析82例肺挫伤患者的症状、体征及相关检查和综合治疗。结果 82例患者经综合治疗治愈67例（81.7%）,15例需应用机械通气,死亡9例,死亡率11%。结论高原地区肺挫伤患者承受原发性低氧、低气压和继发性肺创伤的双重打击,高原肺水肿（HAPE）和呼吸窘迫综合症（ARDS）可同时存在。低氧血症出现早,病情变化快,死亡率高。