空肠弯曲菌生物膜研究进展

空肠弯曲菌是全球范围内主要的人兽共患性、细菌性肠道病原菌之一[1],其感染率在世界各地普遍呈上升趋势,主要引起人体急性肠炎和食物中毒,并伴发反应性关节炎、肝炎、瑞特氏病和格林-巴利综合征等免疫性损伤性疾病[2]。     

饥饿期粪肠球菌生物膜的体外培养实验

目的体外培养观察饥饿期粪肠球菌的生物膜特点。方法通过菌落计数法计数,绘制生长曲线并找出饥饿期时间点,扫描电镜观察其生物膜特点。结果粪肠球菌在BHI液中的生长曲线可分为：迟缓期、对数生长期、稳定期、饥饿期,细菌在72h处于饥饿期。扫描电镜观察显示24h时形成的粪肠球菌生物膜厚度明显增加,菌细胞间可见胞外基质以及孔道。结论饥饿期粪肠球菌可在玻片上形成生物膜。生物膜在不同时间点经历从附着-聚积-成熟-播散的过程。     

单增李斯特菌1/2c血清型菌株生物膜相关基因分析及耐药性研究

目的 了解单增李斯特菌1/2c血清型菌株与其他血清型菌株的生物膜相关基因和抗生素耐药性是否有差异。方法 采用聚合酶链反应技术对19个生物膜相关基因全长扩增测序分析,并与参考菌株EGD-e序列进行比对确定基因变异情况;根据K-B纸片法对选取的实验菌株进行药敏实验。结果 氨基酸序列比对发现1/2c血清型菌株的flaA基因编码的氨基酸在141位点发生突变,其他血清型菌株则没有,1/2c血清型菌株在prfA基因编码的89氨基酸位点、luxS基因编码的112和140氨基酸位点都不发生突变,其他血清型菌株则发生突变。78.43%的1/2c血清型菌株对头孢西丁中度敏感,对氨苄西林、米诺环素、利福平和呋喃妥因有不同程度的耐药。结论 不同血清型单增李斯特菌的flaA、luxS、prfA 3个基因编码的氨基酸在某些位点突变有一定的规律性;1/2c血清型单增李斯特菌对某些抗生素呈现不同程度的耐药。     

生物膜处理神经吻合口促进神经再生的实验

目的:观察生物膜防止神经粘连的作用并与静脉、己丁糖、强的松龙以及单纯缝合进行对比,探索促进神经再生的方法。方法:实验于2002-04/07在解放军总医院骨科实验室完成。将新西兰大白兔随机分为5组:生物膜组、己丁糖组、强的松龙组、静脉组及单纯缝合组,每组12只。①模型制作:采用250g/L乌拉坦静脉麻醉,显露兔的双侧坐骨神经,并在胫骨外髁上方1cm处切断胫神经,双侧作同样处理。在手术显微镜下,将胫神经端端吻合,并将吻合口周围肌肉作适当损伤以形成瘢痕。②分组处理:生物膜组:生物膜片包裹神经吻合口,并将两端缝合成管状,生物膜管两端各与神经外膜固定1针。己丁糖组:在吻合口周围涂抹0.5mL己丁糖。强的松龙组:在吻合口周围注射0.5mL强的松龙。静脉组:取一段兔颈外静脉,长约2cm,分为两段,分别套在双侧胫神经上,两端各固定1针。单纯缝合组:直接吻合后放入肌间隙,吻合口不作特殊处理。③指标测试:于术后2,4,10和16周用肉眼观察足底溃疡及愈合情况,神经吻合口的粘连程度;取各时间段神经吻合口上下5mm神经,光镜观察再生神经通过吻合口情况及结缔组织增生情况;取吻合口近远端各2mm长神经,用伪彩色图像分析行轴突数目分析;对16周组,用诱发电位仪检测其神经传导速度、诱发电位波幅及潜伏期;在透射电镜下观察其超微结构特征。结果:每组12只新西兰白兔均纳入结果分析。①大体观察:单纯缝合组修复段神经2周时为瘢痕组织包裹压迫固定,4和10周时粘连加重,神经无活动度。静脉包裹组修复段神经2周时与周围界限清楚,4,10和16周时与周围粘连固定,无活动度。生物膜组、己丁糖组及强的松龙组各时间段神经活动不受限。②组织学检查:生物膜组、己丁糖组和强的松龙组再生纤维通过吻合口较直,神经内无明显结缔组织增生。单纯缝合组神经外膜较厚,吻合口处结缔组织增生明显,神经再生纤维通过障碍。静脉包裹组神经外膜与分界短期内基本清楚,但长期组有静脉壁坏死的表现,吻合口周围有较多结缔组织增生。③电生理检测结果:静脉组及单纯缝合组的神经传导速度和潜伏期的恢复程度低于生物膜组、己丁糖组和强的松龙组(P<0.01);诱发电位波幅恢复率各组间无显著性差异。④轴突图像分析结果:术后16周,单纯缝合组及静脉组与其他3组比较有髓纤维再生率明显较低(P<0.01)。⑤透射电镜观察结果:16周时吻合口远端单纯缝合组有髓纤维髓鞘较薄,轴突直径较细,但各组神经远端轴突及髓鞘均较成熟,可见大量再生无髓纤维。结论:术中使用生物膜、己丁糖、强的松龙处理神经吻合口,能有效地防止周围神经粘连,促进周围神经再生,最大限度地恢复周围神经的功能。     

粘液型铜绿假单胞菌耐药特性的实验研究

目的探讨粘液型铜绿假单胞菌的耐药性,为临床治疗选药提供依据.方法应用微量稀释法分别测试粘液型与非粘液型铜绿假单胞菌对常见1 2种抗生素的敏感性,并进行统计分析.结果粘液型铜绿假单胞菌对阿米卡星、妥布霉素和亚胺培南的敏感率均为100%,对头孢他定、复方派拉西林、复方替卡西林、派拉西林和奈替米星的敏感率均分别为93%,对替卡西林和环丙沙星的敏感率分别为86%,和79%,对复方新诺明的敏感率为47%.结论粘液型铜绿假单胞菌的体外耐药性较弱,且明显弱于非粘液型铜绿假单胞菌的耐药性(P＜0.005),但在临床用药时必须考虑粘液型铜绿假单胞菌在体内存在有生物膜的影响因素.     

甜菜碱对金黄色葡萄球菌生物膜形成抑制与分散的作用

目的研究金黄色葡萄球菌生物膜形成及甜菜碱对其抑制与分散的作用。方法采用结晶紫染色法分别测定终浓度为1.0 g/L的甜菜碱对20株金黄色葡萄球菌生物膜形成的抑制能力和甜菜碱对金黄色葡萄球菌生物膜的分散能力。结果 20株金黄色葡萄球菌均能形成生物膜,其中甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(MSSA)培养24 h时形成生物膜吸光度值(A_(590 nm))达峰值,为1.99±0.53;耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)培养48 h时形成生物膜A_(590 nm)达峰值,为1.13±0.47。加入甜菜碱共培养后,MSSA培养24 h后生物膜A_(590 nm)为1.74±0.61,MRSA培养48 h后生物膜A_(590 nm)为0.40±0.12,与对照组相比差异均有统计学意义(t值分别为2.43和5.84,P均0.05)。当生物膜形成后加入甜菜碱,与对照组相比,MSSA和MRSA的生物膜A_(590 nm)差异无统计学意义(P0.05)。结论 1.0 g/L甜菜碱对金黄色葡萄球菌生物膜的形成具有良好的抑制作用,但不能分散已经形成的生物膜。     

增强的中性粒细胞呼吸爆发对黏液型铜绿假单胞菌生物膜及其藻酸盐的影响

目的：在体内探讨中性粒细胞呼吸爆发增强后对黏液型铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa,P.a）生物膜（biofilm,BF）和其重要的胞外基质藻酸盐的影响。方法：建立大鼠气道黏液型P.a BF感染模型,分别用呼吸爆发增强剂（PMA）（BF-PMA组）和生理盐水（BF-对照组）干预,平板计数法检测BF内活菌数目,扫描电镜观察BF的结构;硫酸-咔唑法测定BF内藻酸盐含量;HE染色观察2组肺组织病理损伤情况、ELISA分析炎症反应水平。结果：扫描电镜显示BF-PMA组的BF结构较对照组更复杂、更厚,且BF-PMA组的BF活菌数目明显高于对照组（P=0.000）;BF-PMA组BF内藻酸盐合成明显高于对照组（P=0.004）;HE染色发现BF-PMA组肺组织病理改变更严重,且炎症反应更重,γ干扰素（interferon-γ,IFN-γ）水平较对照组高（P=0.002）,IFN-γ与白介素－１０（interleukin－１０,IL-10）的比值也高于对照组（P=0.023）。结论：在体内中性粒细胞呼吸爆发增强后可能通过促进黏液型P.a BF的重要胞外基质藻酸盐的合成,导致黏液型P.a BF清除更难,同时伴随更严重的病理损害和炎症反应。     

Ⅵ型分泌系统研究进展

VI型分泌系统(Type VI secretion system,T6SS)是存在于约25%革兰阴性细菌中的一种分泌系统。研究表明T6SS不仅具有对抗其他细菌和杀伤真核宿主细胞的能力,还与细菌的生存及致病能力等方面有着密切的联系。T6SS在不同菌种中表达与功能差异较大,多种致病菌T6SS得到了广泛的研究及讨论。本文主要对T6SS的结构、表达及其功能进行综述,为后续相关研究提供思路。     

根管预备的工作宽度

根管预备的工作宽度是指根管应该被扩大的程度。适宜的工作宽度是在尽可能保存牙体组织的前提下,彻底去除根管内的感染源,达到最佳的清理和成形效果。由于根管解剖形态的多样性以及根管内感染的复杂性,对于根管预备的工作宽度尚无明确定论,文章就根管预备的工作宽度做一介绍。