细菌生物膜及其临床问题

细菌生物膜 (bacterialbiofilm ,BBF)是相对于单个分散的浮游状态的细菌 (planktoniccells)生存形式而言的一种独特的细菌生存形式。BBF的形成 ,是细菌抵抗外部环境不利因素尤其是消毒剂及抗菌药物杀伤的重要机制之一。BBF的发现已有悠久的历史。早在 1 7世纪AntonjvanLeeuwenhoek就从他自己牙齿上刮取菌斑生物膜 (plaquebiofilm) ,用他研制的那台原始的显微镜 ,观察形成微生物群落的animalculi(小动物 )。但直到 1 970年才发现细菌以生物膜存在的形式。 2 0世纪 80年代到 90年代 ,才发现生物膜的精密结构。与此同时 ,BBF给人类社会带…     

胆胰内支架抗阻塞研究进展

胆胰内支架对解除胆胰良恶性狭窄尤其是肝门部肿瘤所致的恶性阻塞性黄疸效果显著,但阻塞依然是支架的主要并发症。肿瘤过度生长、胆汁成分、胆汁流动速度、细菌大量繁殖和支架的原料及形式参与了支架的阻塞。     

不同处理方法清除软式内镜生物膜的效果研究

摘要 目的 研究不同方法清除软式内镜生物膜的效果及其影响因素,为内镜再处理提供参考。方法 通过人工生物膜方式和细菌定量检测法,观察不同清洗消毒方法清除生物膜的效果。结果 采用手工清洗刷刷洗1、3和5 min,对软式内镜人工生物膜清除率分别为87.11%、93.60%和95.90%。分别采用甲、乙2种国产内镜专用多酶清洗剂对生物膜模型进行处理,其最终生物膜细菌清除率分别为78.97%和66.22%,差异具有统计学意义(P＜0.05)|使用邻苯二甲醛、过氧乙酸和复方含氯消毒剂对生物膜模型进行处理,其生物膜清除率分别为86.90%、96.51%和90.06%,且其清除率具有统计学意义(P＜0.05)。结论 研究软式内镜再处理过程中不同因素对生物膜清除效果,在保证试验其他因素相同的条件下,分别以手工刷洗5 min、甲内镜专用多酶清洗液、过氧乙酸对生物膜清除效果较好,但综合考虑清洗时间成本与清洗最终效果,在手工刷洗上选择手工刷洗3 min为最优。     

肠球菌属生物膜表型和基因型相关性分析

目的了解肠球菌属生物膜形成能力及其毒力基因携带率,分析生物膜的形成能力与毒力基因间的相关性。方法收集复旦大学附属华山医院2015-2017年临床分离自无菌体液的肠球菌属细菌,使用结晶紫染色法测定肠球菌的生物膜形成能力并进行形成能力的强弱分级,采用PCR方法筛查7种常见的肠球菌毒力基因以及Fsr群体感应系统基因(fsrA、fsrB、fsrC)。结果共收集了112株肠球菌菌株,其中粪肠球菌52株,屎肠球菌60株;两者生物膜形成的阳性率分别为63.46%和13.33%,差异具有统计学意义(P<0.001)。52株粪肠球菌毒力基因携带率分别为:esp 40.38%、gelE 69.23%、sprE 73.08%、asa157.69%、cylA 46.15%、cylB 48.08%、cylM 50.00%、fsrA 40.38%、fsrB 42.31%、fsrC 80.77%,携带esp、asa1、cylA、cylB、cylM和fsrB基因的菌株更易形成生物膜。60株屎肠球菌毒力基因携带率分别为:esp 65.00%、gelE 10.00%。结论粪肠球菌比屎肠球菌更容易形成生物膜;多种毒力基因与生物膜形成相关,提示生物膜的形成并不是由单一基因调控,而是由多个基因多系统调控。     

期刊导读

《耳鼻咽喉及听力学新闻》(《ENT and Audiology News》)2010,19(5)供稿/《中国医学文摘耳鼻咽喉科学》杂志社王琪,王楠2010年最受重视的耳科学文献(1)     

细菌生物膜在急性中耳炎大鼠中耳腔的形成特点及意义

目的 通过观察细菌生物膜在急性中耳炎大鼠中耳腔的形成特点,分析其与急性中耳炎的关系,并探讨该中耳炎模型用于细菌生物膜研究的可行性.方法 30只健康雄性SD大鼠,采用随机数字表法分为实验组(24只)和对照组(6只).麻醉后将50μl肺炎链球菌悬液[1×108菌落形成单位(colony forming unit,CFU)/...     

洗必泰葡萄糖酸盐对感染根管细菌生物膜的实验研究

目的：探讨洗必泰葡萄糖酸盐作为根管冲洗药物,对粪肠球菌生物膜的灭菌作用。方法：在无菌盖玻片上制备粪肠球菌生物膜,应用0．2％和5％洗必泰葡萄糖酸盐冲洗,分别作用1min和5min,激光扫描共聚焦显微镜观察灭菌效果。结果：0．2％或5％洗必泰葡萄糖酸盐的灭菌效果随作用时间的延长而增加（P＜0．05）;5％洗必泰葡萄糖酸盐作用1min的灭菌效果明显优于0．2％洗必泰葡萄糖酸盐（P＜0．05）,而其作用5min的灭菌效果与0．2％洗必泰葡萄糖酸盐者无差异（p＞0．05）。结论：洗必泰葡萄糖酸盐具有明显的杀灭粪肠球菌生物膜的作用,其不同浓度和不同作用时间的灭菌效果不同,然而尚不能达到完美的根管冲洗消毒目的。     

密度感应拮抗剂C-30对变异链球菌生物膜的影响

目的:研究密度感应拮抗剂呋喃C-30对变异链球菌生物膜形成的影响。方法:将已合成的密度感应拮抗剂呋喃C-30用BHI培养基配制至终浓度分别为2.0,4.0μg/mL,再加入新鲜培养的变异链球菌液,37℃微需氧培养24 h,在96孔板上形成体外生物膜,用MTT法检测生物膜的量。激光共聚焦显微镜观察不同浓度呋喃C-30处理后的生物膜结构。实验中以不含呋喃C-30的BHI培养基作为阴性对照。结果:实验发现呋喃C-30不会对变异链球菌的生长产生影响,但随着呋喃C-30的浓度增加,变异链球菌形成生物膜的量显著降低(P<0.05);激光共聚焦显微镜的结果也表明呋喃C-30浓度的增加使生物膜菌间结构变得稀疏,集聚程度明显减轻。结论:密度感应拮抗剂呋喃C-30能有效抑制变异链球菌生物膜的形成。     

变异链球菌luxS基因对多糖基质代谢的影响

目的:利用变异链球菌luxS基因敲除的突变株,研究该基因缺陷对于生物膜多糖基质的影响。方法:通过向生物膜培养悬液中加入与细菌直径相近的磁性小珠,利用这些小珠由于生物膜约束而在磁场中位移受限的原理,采用生物膜定量分析仪,定量比较luxS突变株与野生株在利用外源性碳水化合物合成生物膜多糖基质能力方面的差异。采用SPSS 10.0软件包对实验数据,进行Dunnet双侧t检验。结果:变异链球菌luxS基因突变株与野生株均可利用碳水化合物合成胞外多糖基质,且外源性糖的加入可显著促进生物膜的形成。在加入1%蔗糖时,2菌株生物膜均在1h内迅速形成,而两者之间无显著差异。在加入1%葡萄糖时,两菌株的生物膜形成速度均有所加快,突变株的改变则更为明显。结论:luxS基因参与调节细菌对多糖基质代谢的过程,而其对于生物膜形成的影响也更多是通过调节多糖基质代谢实现的。     

激光扫描共聚焦显微镜观察碱性环境对粪肠球菌生物膜的影响

目的:比较不同碱性条件对生物膜状态粪肠球菌的影响。方法:制备粪肠球菌生物膜,分别用pH值为7、9和11的TSB培养液作用2 h后,用激光扫描共聚焦显微镜观察粪肠球菌生物膜的变化。结果:pH值由7升到9时,生物膜内、中、外各层活菌比例虽有所减少,但差异无统计学意义(P>0.05);当pH值11时,各层活菌比例虽然均较pH值为7和9时明显减少(P<0.05),但仍有大量活菌存在。结论:粪肠球菌对碱性环境具有强的耐受性,pH值为7～9时,对生物膜状态粪肠球菌无明显影响。