可乐丽菲露SE BOND用于直接盖髓术的组织学评价

目的:对可乐丽菲露SEBOND在人体用于直接盖髓术进行组织学评价。方法:选择24名志愿者共45颗健康人第三磨牙,41颗在牙合面制备Ⅰ类洞并在洞底作人工穿髓孔,然后分为2组,实验组以可乐丽菲露SEBOND盖髓,对照组以氢氧化钙盖髓。4颗作为空白对照。所有实验牙齿分别在盖髓后的7、30、90d后拔除并进行组织学检测。结果:实验组和对照组志愿者均未出现术后实验牙齿敏感症状。病理检测显示,在7d和30d的观察期内2组均有轻度到中度的炎性反应,但可乐丽菲露SEBOND组的炎性反应较氢氧化钙组轻,其组织学评价分级上的差别有统计学意义(P<0.05)。在90d的观察期内2组均无明显的炎性反应,而牙本质桥的形成在氢氧化钙组显著多于可乐丽菲露SEBOND组,氢氧化钙组7例标本中有6例标本有牙本质桥的形成,可乐丽菲露SEBOND组7例标本中有3例形成,其差别有统计学意义(P<0.05)。结论:可乐丽菲露SEBOND对牙髓的刺激性较小,但诱导牙本质形成的能力较氢氧化钙弱。     

一种显示尼氏体的简单方法

我们在科研工作中摸索出一种显示尼氏体的简单方法,对采用4％多聚甲醛(用10％甲醛或95％乙醇固定均可)固定的鸡胚背根节细胞悬液的涂片,用苏本精染色,清晰地显示了神经细胞浆内的嗜碱性物质-尼氏体。1 材料和方法 Hamburger 35期来亨鸡胚,摘取腰段背根节,用0.125％胰蛋白酶消化(37℃)30分钟,打散成细胞悬液后涂片,稍干后用4％多聚甲醛固定10分钟,自来水冲洗至无福尔马林气味后,用苏木精染色10分钟,用1％盐酸酒精分色90秒钟,常规脱水、透明、封片后置显微镜下观察。     

Pluronic F-127表面修饰生物衍生骨的体外实验研究

目的：探讨成骨细胞复合PluronicF-127表面修饰生物衍生骨的三维培养，对成骨细胞活力及功能表达的影响。方法：将新鲜猪肋骨加工制成生物生骨，应用PluronicF-127对生物衍生骨进行表面修饰，然后体外复合第3代成骨细胞三维培养，实验为A、B和C组，A组为单纯生物衍生骨复合成骨细胞组，B组为PluronicF-127表面修饰生物衍生骨复合成骨细胞组，C组为单纯成骨细胞组，应用倒置相差显微镜和扫描电镜对各组成骨细胞生长及黏附进行观察，并对其细胞活力碱性磷酸酶（ALP）活性进行检测，结果：B组成骨细胞在支架材料上黏附，伸展及生长良好，成骨细胞活力和ALP活性表达与A组成骨细胞比较均无统计学意义（P＞0．05）；A、B组与C组比较，成骨细胞活性和ALP活性均明显降低，有统计学意义（P＜0．01）。结论：生物衍生骨经PluronicF-127表面修饰后具有良好的细胞相容性，可作为负载生物活性分子的载体修饰生物衍生骨。     

细胞治疗促进周围神经再生的实验研究

目的研究注射异体不同细胞于大鼠失神经靶肌肉,对神经再生的促进及防止运动终板变性、促进肌肉功能恢复的作用。方法取1周龄SD乳鼠400只,体重20.0±2.3g,制备雪旺细胞、成肌细胞和肾内皮细胞。将SD成年雌性大鼠36只,体重120～150g,随机分为四组,每组9只。无菌条件下切断左侧坐骨神经,一期神经外膜缝合。术后即于小腿三头肌处注射相应细胞,每7天注射1次,共4次。A组注射1×106/ml单纯雪旺细胞1ml,B组注射1×106/ml雪旺细胞加成肌细胞1ml（雪旺细胞∶成肌细胞为1∶1）,C组注射1×106/ml混合细胞提取液1ml（雪旺细胞∶成肌细胞∶肾内皮细胞为1∶1∶1）,D组注射无血清培养液1ml作对照。术后行大体观察,术后3个月取材行靶肌肉的组织形态学观察,行单位面积运动终板个数检测、单位面积靶肌肉Actin阳性肌纤维个数检测,以及酶组织化学观察。于神经缝合口近、远端检测神经鞘细胞密度和再生神经纤维面积的观察。结果术后1~3个月A、B、C组大鼠患肢由不同程度的足踝部溃疡逐渐愈合,肿胀消退,恢复正常行走;D组患侧下肢肌肉萎缩,足踝溃疡、肿胀,足趾挛缩明显,拖行。术后3个月,单位面积靶肌肉运动终板个数、Actin阳性细胞数、失神经肌肉各种酶活性和再生神经的组织学改变,C组优于A、B组（P〈0.01）。A、B、C组实验结果均明显优于D组（P〈0.01）。结论雪旺细胞、雪旺细胞加成肌细胞、混合细胞提取液均有促进神经再生及防止运动终板变性、促进肌肉功能恢复的作用,混合细胞提取液作用优于雪旺细胞及雪旺细胞加成肌细胞移植。     

WO-1促进兔桡骨骨缺损修复的实验研究

目的制作兔桡骨缺损模型,通过局部和全身用药了解W O-1对兔桡骨缺损修复的影响,并对其作用机制进行探讨。方法将新西兰大白兔36只,体重1.6~2.0 kg;手术制作双侧桡骨缺损模型,并随机分为3组,A组:局部用药组,骨缺损处一次注射W O-1 50 m g/m l,0.1 m l;B组:口服给药组,每天W O-1 5 m g灌胃至处死;C组:空白对照组,不予任何处理。分别于20、30和60 d每组随机处死动物4只,行血清学、X线片和组织学检查。结果A、B组碱性磷酸酶在20 d分别为159.0±4.7 U和174.3±13.2 U,30 d分别为130.0±8.0 U和113.5±9.0 U,均显著高于C组20d为95.8±23.1 U,30 d为88.3±21.1 U;60 d A组为65.3±6.2 U、B组为42.0±7.0 U,均显著低于C组116.0±3.9 U,差异有统计学意义(P<0.01)。A、B组血清骨钙素水平20 d分别为11.4±3.8、14.3±2.7 ng/m l和30 d分别为7.3±0.3、10.4±3.2 ng/m l均明显高于C组20 d为6.1±0.8 ng/m l,30 d为5.8±0.2 ng/m l;60 d A组为4.2±1.2 ng/m l,B组为4.4±0.9 ng/m l,均显著低于C组13.9±1.3 ng/m l,差异有统计学意义(P<0.01)。20、30和60 d X线片和组织学均显示,A、B组骨性愈合早于C组,而A组骨痂塑形早于B组。结论W O-1可促进兔桡骨缺损的修复,其量效关系和给药时间、方式仍有待进一步研究。     

WO-1生物衍生骨支架与成骨细胞相容性的实验研究

目的 研究WO-1生物衍生骨复合材料与兔成骨细胞的相容性及体外附着规律，为进一步的体内试验提供基础研究。方法 应用同种异体骨、Ⅰ型胶原及WO-1制备WO-1生物衍生骨复合材料；取幼兔的颅顶骨成骨细胞，经培养液体外培养、扩增后，与WO-1生物衍生骨材料联合培养。通过扫描电镜和倒置相差显微镜观察WO-1生物衍生骨复合材料的形貌特征、细胞与材料的粘附和增殖情况。结果 WO-1生物衍生骨复合材料具有天然骨的三维结构；扫描电镜和倒置相差显微镜均显示复合培养的成骨细胞在材料表面和孔隙内生长良好。结论 WO-1生物衍生骨复合材料具有良好的细胞相容性。     

组织工程软骨对兔膝关节胫骨平台浅层全关节软骨缺损的修复作用

目的探讨组织工程软骨对兔膝关节胫骨平台外侧髁浅层全关节软骨缺损的修复作用，并检测其修复组织的软骨类型。方法取2周龄乳兔软骨细胞体外培养传代至第3代后，与人胎盘Ⅰ型胶原蛋白海绵复合后植入成年兔的胫骨平台外侧髁完全软骨缺损区，并设立空白对照组，分别于术后4、12、24周取材。观察修复效果。运用天狼星红染色检测Ⅰ型胶原，Ⅱ型胶原单克隆抗体检测Ⅱ型胶原的表达。结果实验组术后4周缺损表面未见明显的新生软骨形成，组织学切片上少数几个呈上皮样生长的软骨细胞，苏木素-伊红（HE）染色胞浆呈深蓝色，周围软骨基质染色成浅蓝色；12周，缺损表面有少量的新生软骨形成，组织学切片上可见软骨细胞呈边缘不规则的，小蜂窝状结构，软骨细胞周围有软骨陷窝形成；24周，缺损表面的新生软骨较4、12周的新生软骨明显，表面光滑，且与周围组织结合紧密，但仍存在部分缺损尚未修复，组织学切片上可见软骨细胞呈边缘不规则的，多层细胞的蜂窝状结构，软骨细胞周围有软骨陷窝形成，并分泌甲苯胺蓝异染的软骨基质。而对照组则均未见明显的修复；随着术后时间的延长，Ⅰ型胶原的表达呈逐渐减弱的趋势，而Ⅱ型胶原的表达呈逐渐增强的趋势。结论该方法制成的组织工程软骨对兔胫骨平台外侧髁全层软骨缺损有修复作用，运用该方法不能完全修复兔胫骨平台外侧髁软骨完全缺损；形成的新生软骨为透明软骨样组织。     

胎儿足发育研究

采用胚胎透明标本骨骼染色研究４６例受精龄为１０－３７周胎儿的足长、足骨骨化顺序和程度，结晶酹明：（１）足长随胎龄的增加而增长，左右足长的变化差异无显著性，（２）随着胎龄的增加，胎足从１０周开始，跖骨等先后依次出现骨化点。（３）各足骨化灶范围随胎龄的增加面是增大，骨化值与受精龄呈显著的正直线相关。