儿童呼吸道腺病毒基因分型方法的建立及其应用

目的 利用PCR技术,建立引起儿童呼吸道感染的腺病毒的基因分型方法,便于推广和应用.方法 分析GenBank中不同型别腺病毒的六邻体基因序列特点,设计不同型腺病毒的特异性引物,以PCR方法进行基因分型,建立基因分型方法,并利用此方法对广州市2004年7月某幼儿园流行的腺病毒感染进行了基因分型.结果 建立了呼吸道腺病毒的基因分型方法.广州市2004年7月某幼儿园流行的腺病毒为3型腺病毒.结论 PCR方法可进行腺病毒的基因分型,且简便、结果可靠,便于推广应用.     

1998～2001年广州市婴幼儿腹泻中轮状病毒感染检出率及血清型分布

轮状病毒(HRV)是引起婴幼儿非细菌性腹泻最常见的原因之一。过去称为“秋季腹泻”。为了解近年来广州市婴幼儿轮状病毒感染的分子生物学特征，我们在1998年开始收集腹泻病的大便标本，现将结果报道如下。     

诺如病毒衣壳蛋白重组人3型腺病毒的构建

目的 制备表达诺如病毒衣壳蛋白的重组人3型腺病毒.方法 将诺如病毒衣壳蛋白基因(Noro-orf2)克隆到腺病毒穿梭载体pBSE3CMV-egfp上,与线性化人3型腺病毒骨架质粒pBRAdv3共电转化感受态大肠杆菌BJ5183,使其在细菌内发生同源重组,带Noro-orf2基因的表达框置换腺病毒E3区,PCR及酶切筛选得到重组腺病毒质粒,将重组腺病毒质粒转染Hep-2细胞进行包装,获得感染性的重组腺病毒粒子,免疫组化分析重组腺病毒中诺如病毒衣壳蛋白的表达.结果 同源重组后经酶切和PCR鉴定证明插入Noro-orf2基因的重组腺病毒质粒pBRAdv3E3dNor成功构建,并经转染包装得到高滴度的重组腺病毒Adv3E3dNor,免疫组化证明诺如病毒衣壳蛋白得到表达.结论 成功构建表达诺如病毒衣壳蛋白的重组3型腺病毒Adv3E3dNor,为研制人3型腺病毒-诺如病毒双价疫苗奠定了基础.     

VEGF在非小细胞肺癌中表达与血管生成关系及临床意义

目的　采用免疫组化方法观察血管内皮生长因子 (VEGF)及血管内皮细胞膜抗原CD34在非小细胞肺癌(NSCLC)组织、肺炎性假瘤及正常肺组织中的表达状况。方法　用抗VEGF多克隆抗体及CD34单克隆抗体作免疫组化染色 ,免疫标记物阳性细胞和癌组织中微血管密度 (MVD)计数。结果　 81例NSCLC组织上VEGF表达的总阳性率为 72 .84 % ,VEGF在肺癌细胞中主要分布于胞浆、胞膜 ,少量胞外基质也有阳性表达。鳞形细胞癌阳性细胞呈弥散或局灶分布 ,腺癌则呈腺泡状分布。VEGF表达强度同非小细胞肺癌的MVD值紧密相关 ,随VEGF表达强度增高 ,MVD值亦显著增高 (P <0 .0 0 1)。结论VEGF的表达和MVD与NSCLC的发生、发展、转移关系密切 ,可作为NSCLC预后标志     

儿童特发性血小板减少性紫癜与病毒感染关系探讨

目的探讨儿童特发性血小板紫癜(ITP)与病毒感染的关系.方法应用酶联免疫吸附法(ELISA),对527例学龄前患儿和70例健康儿童进行巨细胞病毒-IgM(CMV)、单纯疱疹病毒-IgM(HSV)、风疹病毒-IgM(RV)和EB病毒-IgM血清学检查.结果 527例ITP患儿中,其中进行CMV检测的175例,阳性40例(22.86%),HSV116例,阳性14例(12.07%),风疹病毒104例,阳性10例(9.6%),EB病毒132例,阳性7例(5.3%),总阳性率为13.47%. 结论病毒感染是儿童特发性血小板减少性紫癜的一个重要原因,巨细胞病毒感染是主要病原.     

广州检出星状病毒4型的全基因组序列测定及分析

目的 探讨广州地区儿童感染的星状病毒基因组分子结构特点和基因型.方法 参考GenBank上的星状病毒基因组设计分段扩增引物,进行RT-PCR分段扩增星状病毒基因组,克隆于T载体上,序列测定,用Clustal W和DNAStar软件分析基因组序列.结果 星状病毒HASTVgz01全基因组为6721 bp,提交到GenBank上的序列号为DQ344027,其中5＇端非编码区（5＇UTR）长82bp,3＇端非编码区末端长81 bp,病毒基因组编码区全长6558个核苷酸,分别编码ORF1a、ORF1b、ORF2,ORF1a基因长2763 bp（83～2845 nt）,ORF1b基因长1557bp（2785～4332 nt）,其中ORF1a、ORF1b两基因有71个核苷酸的重叠区;ORF2全长2316 nt,位于基因组中4325～6640 nt.ASTVgz01与GenBank中8种基因型星状病毒的ORF2基因氨基酸序列同源性比较发现,HASTVgz01与4型的同源性为93%,其他的同源性在61%～70%之间.结论 广州地区儿童腹泻感染的星状病毒HASTVgz01全基因组为6721bp,GenBank序列号为DQ344027,HASTVgz01与4型星状病毒的ORF2基因氨基酸序列比较同源性为最高,确认HASTVgz01是4型星状病毒.     

2012年安徽省城乡居民六类健康问题知晓率的比较分析

目的通过调查安徽省城乡居民健康素养六类健康问题现状,并进行城乡相比分析,为今后制订合适城乡居民的健康教育规划提供根据。方法采用PPS抽样,选择安徽省15~69岁城乡居民3 213人,使用2012年度居民健康素养监测调查问卷进行调查。结果城乡居民对科学健康观、传染病预防、慢性病预防、安全与急救、基本医疗以及健康信息等六类的知晓率有显著差别,农村居民低于城市居民。结论应加强农村居民健康教育与健康促进工作,探索适合城乡居民的健康知识传播途径,针对六类问题的单薄环节,积极开展健康干预,从而提高安徽省城乡居民的健康素养水平。     

儿科重症监护病房腺病毒感染分析

目的：了解广州地区PICU中人腺病毒( human adenovirus,HAdV)肺炎的病原学特点及临床特征。方法选取2012年1月至2014年12月在广州市妇女儿童医疗中心PICU住院的HAdV感染患儿87例为研究对象。采集患儿咽拭子样本,用实时荧光定量聚合酶链反应( FQ-PCR)方法进行HAdV及其亚型检测,同时检测甲型流感病毒、乙型流感病毒、合胞病毒、肠道病毒、偏肺病毒、博卡病毒、鼻病毒、肠道病毒、肺炎支原体、肺炎衣原体、副流感病毒等10种常见呼吸道病原体。对HAdV肺炎患儿的临床资料进行分析。结果87例HAdV肺炎患儿中, HAdV-3感染占35.6％(31/87), HAdV-7感染占52.9％(46/87),HAdV-4感染占2.3％(2/87),8例未定型;病原体混合感染检出率为27.6％(24/87),其中87.5％(21/24)是2种混合感染,12.5％(3/24)是3种混合感染;与肺炎支原体发生混合感染的占50.0％(12/24),与人博卡病毒混合感染的占20.8％(5/24)。 HAdV-7感染患儿中73.9％(34/46)需要呼吸机辅助通气,而 HAdV-3感染患儿中51.6％(16/31)需要呼吸机辅助通气(χ2＝4.045,P＝0.044)。 HAdV-7感染患儿发生2个以上器官功能不全或衰竭的比例大于HAdV-3感染患儿[47.8％(22/46)vs.22.6％(7/31),χ2＝5.027,P＝0.025]。结论 HAdV是广州地区PICU感染的重要病毒病原,可导致重症肺炎。 PICU中发现3、7、4型HAdV感染,7型HAdV肺炎患儿所占比例和临床表现较3型更多、更危重。 HAdV与其他病原体发生混合感染的现象较为常见。     

未定病因肝衰竭患者的临床特点分析

目的 探讨未定病因肝衰竭的临床发病特点及其预后.方法 回顾性分析解放军302医院2005年1月-2014年12月收治的326例未定病因肝衰竭住院患者的临床资料.结果 未定病因肝衰竭的发病比例较高,占同期肝衰竭总数的6.50％,发病率仅次于HBV相关肝衰竭及酒精性肝衰竭.未定病因肝衰竭分型主要是亚急性肝衰竭(39.88％),其次是慢加急性肝衰竭(36.50％)和急性肝衰竭(23.62％),而其他类型肝衰竭(明确病因肝衰竭)主要分型是慢加急性肝衰竭(92.16％).与我国最常见的HBV相关慢加急性肝衰竭比较,未定病因肝衰竭肝功能恶化程度更明显(ALT、AST、TBil更高,PTA更低),ALP及白细胞平均水平也更高.未定病因肝衰竭好发于青中年患者(18～60岁,56.13％),其次是青少年(＜18岁,28.53％),老年患者(≥60岁)占15.34％.未定病因肝衰竭预后较差,总的治愈好转率仅占26.07％,青少年患者好转率为31.18％,青中年患者25.14％,老年患者20.00％.在3种类型肝衰竭分型中,以急性肝衰竭转归最差,好转率仅12.99％,亚急性肝衰竭好转率为34.62％,慢加急性肝衰竭好转率为25.21％.结论 未定病因肝衰竭近年来发病比例增加,好发于青年及儿童,以亚急性肝衰竭多见,转归差.     

内镜诊断78例贲门癌的体会

我院1974～1984年应用Olympus纤维胃镜检出胃和贲门癌共206例,其中贲门癌78例,占37.9％。现将临床、内镜和病理所见报告如下。一般资料一、性别、年龄:男性65例、女性13例:男女之比5:1。年龄<40岁2例占2.6％,40～50岁10例占12.8％,51～60岁32例占41％,>60岁34例占42％。二、症状、体征:78例中吞咽困难52例占66.7％,消瘦45例占57.7％,上腹痛