人多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶-2对胶质瘤细胞U251中MMP-2、TIMP-2 mRNA表达及细胞迁移能力的影响

目的探讨多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶-2（ppGalNAc-T2）对胶质瘤细胞侵袭转移的作用。方法将ppGalNAc-T2的真核表达正义载体、RNA干扰载体通过脂质体稳定转入胶质瘤细胞U251;通过荧光显微镜观察及RT-PCR检测ppGalNAc-T2的表达来确定载体正确转入细胞;细胞分为以下5组：U251转染正义载体组与空载体组、U251转染干扰载体组与对照载体组、U251未转染组,通过RT-PCR方法检测各组细胞基质金属蛋白酶（MMP）-2、基质金属蛋白酶抑制剂（TIMP）-2mRNA表达的变化;通过划痕法检测各组细胞的迁移差异。结果荧光显微镜观察及RT-PCR检测结果表明,载体成功转入细胞;RT-PCR检测结果发现,随着ppGalNAc-T2的增高,MMP-2的表达降低,而TIMP-2的表达升高（P〈0.05）;划痕结果显示,正义组细胞迁移能力随ppGalNAc-T2的上调而减弱（P〈0.05）,干扰组划痕修复较快（P〈0.05）,其他对照组相近（P〈0.05）。结论 ppGalNAc-T2的上调可抑制细胞的划痕修复,由此推测ppGalNAc-T2可能与胶质细胞的侵袭转移密切相关。     

E-钙黏附素在大鼠肝纤维化模型中的表达及意义

目的探讨大鼠实验性肝纤维化形成过程中E-钙黏附素的表达及其变化,为临床肝纤维化及肝硬化的诊断和治疗提供借鉴。方法取SD大鼠60只,其中40只按皮下注射四氯化碳每周2次,每次2 ml/kg的方法造成肝纤维化模型,另外20只皮下注射相同容量生理盐水作为正常对照组。根据造模的不同时间及肝组织的病理改变,20只造模7周后的SD大鼠设为肝纤维化组,20只造模12周后的SD大鼠设为肝硬化组。最后收集所有标本按肝纤维化0~Ⅳ期分为5组。采用免疫组织化学方法以及RT-PCR法检测肝组织中E-钙黏附素的表达及分布。结果肝纤维化0期标本仅见少量E-钙黏附素表达。与0期相比,Ⅲ期及Ⅳ期E-钙黏附素表达均增强,尤以Ⅳ期最为显著（P＆lt;0.05或P＆lt;0.01）。结论肝纤维化肝组织中E-钙黏附素的表达增强。表达量与肝纤维化程度一致。E-钙黏附素与肝纤维化的发生发展密切相关。     

Hedgehog-Gli 1信号通路对肝星状细胞增殖和凋亡的调控作用

目的 研究肝星状细胞(HSC)中hedgehog(Hh)信号通路成员Shh、patched、smoothened(Smo)和Gli-1的表达,及Hh通路抑制剂环耙明对HSC-T6细胞株增殖、凋亡及其激活的影响.方法 体外培养HSC株,提取细胞总RNA,用RT-PCR扩增Shh、patched、Smo、Gli-1基因;用环耙明作用HSC-T6后采用四甲基偶氮唑盐法检测其在体外对HSC-T6的抑制情况,流式细胞仪检测其对HSC-T6细胞周期的影响,碘化丙啶和膜联蛋白-Ⅴ双染荧光标记法及提取细胞DNA检测HSC-T6细胞凋亡,荧光定量聚合酶链反应检测Gli-1,转化生长因子β1、血小板衍生生长因子、Bcl-2 mRNA的表达水平.结果 HSC-T6中表达有Hh通路家族成员.环耙明在50、100、150、200,250 μmol/L作用下,A值分别为1.55±0.07、1.19 ±0.05,0.78±0.06、0.48±0.03、0.38±0.04,正常对照组为1.74±0.03,环耙明组与正常对照组相比,F=636.81,P<0.01,差异有统计学意义.流式细胞术测出干预后环耙明G0/G1期细胞所占比例为65.08%±1.50%,正常对照组为55.41%±2.54%,两组比较,t=-8.05,P<0.01.药物干预后提取DNA及碘化丙啶和膜联蛋白-Ⅴ双染荧光标记均检测出HSC-T6细胞凋亡.荧光定量结果表明,经环耙明干预后,HSC-T6细胞中Gli-1、转化生长因子β1、血小板衍生生长因子、Bcl-2 mRNA的目的基因相对表达量分别0.28±0.05、0.13±0.04、0.07±0.04、0.17±0.02,正常对照组为1,各基因表达量较正常对照组均明显降低,t值分别为23.09、31.34、43.87和59.10,P值均<0.01,差异有统计学意义.结论 HSC-T6中存在Hh信号通路,环耙明能抑制HSC增殖及增殖周期,促进活化的HSC凋亡,其抑制HSC活化可能是通过抑制Hh-Gli-1信号通路的结果.     

EGCG对富亮氨酸重复激酶2活性的影响及其作用机制

目的: 研究表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin 3 gallate, EGCG)对富亮氨酸重复激酶2(leucine rich repeat kinase 2, LRRK2)活性的影响及其分子机制。方法: 选用Ddc LRRK2 G2019S品系果蝇,分为7组,对照组用标准玉米培养基饲养,各实验组果蝇分别用含LRRK2抑制剂GW5074、N 乙酰半胱氨酸（NAC）及浓度为0.1、1、10和100 μmol/L的EGCG加药培养基饲养,检测并统计果蝇生命周期和运动能力,筛选出药物作用的最佳浓度与最适时间点;用蛋白质印迹法检测果蝇脑组织中p LRRK2、p p38 MAPK、核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2 related factor 2, Nrf2)、p ERK1/2和酪氨酸羟化酶(TH)等蛋白的表达。结果： 与对照组相比,10 μmol/L EGCG延长果蝇寿命、改善果蝇运动能力的效果最为突出,1 μmol/L EGCG效果较好(P<0.05);各组果蝇第5周时行为学变化最显著(均P<0.05);与对照组相比,10 μmol/L 和1 μmol/L EGCG组Nrf2、p ERK1/2、TH表达均明显增加(均P<0.05),p LRRK2、p p38 MAPK表达明显降低(P<0.05)。 结论： EGCG可能通过Keap1 Nrf2 ARE、MAPK等信号通路有效抑制LRRK2激酶活性。     

箭叶淫羊藿中化学成分及其体外抗肿瘤活性研究

目的 分离箭叶淫羊藿中的化学成分并对8-异戊烯基黄酮类化合物进行体外抗肿瘤活性筛选.方法 采用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱和HPLC制备色谱方法分离纯化,根据理化性质和波谱分析方法鉴定其结构,利用MTT法对分离得到的异戊烯基黄酮类化合物进行体外抗肿瘤活性筛选.结果 分离得到7个黄酮类化合物,分别鉴定为淫羊藿苷(1)、淫羊藿素(2)、宝藿苷Ⅰ(3)、去甲淫羊藿素(4)、苜蓿素(5)、淫羊藿次苷Ⅰ(6)和朝藿定C(7).体外抗肿瘤结果表明,在0.5～1 00 μmol/L浓度,化合物2、3、4、6对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖具有明显抑制作用,并随浓度的增加抑制作用更加明显,48 h的IC50分别为12.43、35.44、11.53、16.31 μmol/L,化合物1、7活性很弱.结论 化合物3、4为首次从箭叶淫羊藿植物分离得到,化合物3有望成为靶向抗乳腺癌的候选药物.     

手掌侧腱滑囊非特异性炎症的CT诊断

目的 :探讨手掌侧腱滑囊非特异性炎症的诊断与鉴别诊断。方法 :5例行螺旋CT平扫 ,2例行增强扫描并做多平面重建 (MPR) ,层厚 5～ 10mm ,层距 5～ 10mm。结果 :CT显示腕尺侧滑液囊滑膜增生 ,滑液囊增宽、增厚、延长 ,其内肌腱排列次序紊乱、分散、推移而无增粗改变。增宽延长的滑液囊自腕横韧带上 3cm至掌骨远段止 ,而桡侧滑液囊正常 ,MPR显示尤为清楚。结论 :本病为非特异性炎症引起滑膜增生 ,可能与外伤及过度劳作有关。需与化脓性、结核性滑囊炎、单纯滑膜囊肿、腱鞘囊肿鉴别     

欣普贝生联合催产素对足月妊娠分娩引产的疗效观察

目的:观察欣普贝生联合催产素对足月妊娠引产的临床效果。方法:将120例足月妊娠分为欣普贝生10mg塞阴道引产组(50例),1U催产素加入5%的葡萄糖溶液500ml中静滴引产组(40例),欣普贝生联合催产素产组(30例)。观察和比较3组用药后孕产妇平均临产时间、总产程潜伏期时间、分娩成功率,以及血压及心率变化。结果:孕产妇平均临产时间:欣普贝生组为50%,催产素组为20%,欣普贝生联合催产素组分66.7%;8小时内产程潜伏期率:欣普贝生组为85.1%,催产素组为66.7%,欣普贝生联合催产素组分100%;分娩成功率:欣普贝生组为80%,催产素组为55%,欣普贝生联合催产素组分86.7%。结论:欣普贝生联合催产素用于足月妊娠分娩引产可有效提高自然分娩率,缩短临床临产时间及分娩总产程潜伏期时间,对孕产妇血压及心率无明显影响,值得临床应用。     

口服斯利安防治习惯性流产的临床分析

目的对运用口服斯利安的方法对患有习惯性流产的患者进行治疗的临床效果进行研究分析。方法抽取78例患有习惯性流产的临床确诊患者病例,将其分为A、B两组,平均每组39例。A组患者采用常规方法进行治疗;B组患者在A组基础上采用斯利安进行治疗。结果 B组患者治疗后的流产症状改善效果明显优于A组;治疗过程中并发症的发生率明显低于A组。结论运用口服斯利安的方法对患有习惯性流产的患者进行治疗的临床效果非常明显。     

IL-2、IL-10、TNF-α在子痫前期不同发病类型中的水平变化及意义

目的探讨IL-2、IL-10、TNF-α在子痫前期不同发病类型患者血清中的水平变化。方法用ELASA检测30例早发型重度子痫前期、30例晚发型重度子痫前期和30例正常妊娠孕妇血清中IL-2、IL-10、TNF-α的水平。结果早发型重度子痫组和晚发型子痫前期组患者体内IL-2、TNF-α水平与对照组相比明显升高,差异有显著统计学差异(P0.05),早发型重度子痫组和晚发型子痫前期组中IL-2、IFN-α水平相比也有显著统计学差异(P0.05);早发型重度子痫组和晚发型子痫前期组患者体内IL-10水平与对照组相比明显降低差异有统计学意义(P0.05),而早发型重度子痫组和晚发型子痫前期组患者体内IL-10水平相比差异无统计学意义(P0.05)。结论子痫前期患者血清中的IL-2、TNF-α的水平升高及IL-10水平降低与该病的发生发展密切相关。     

三级预防健康教育管理与生活方式干预在变应性鼻炎治疗中的作用研究

目的:探讨三级预防健康教育管理和生活方式干预在变应性鼻炎(AR)治疗中的作用。方法:将需要三级预防管理的210例AR患者随机分为A、B、C 3组,每组70例,进行为期3年的随机对照研究。A组:单用布地奈德鼻喷雾剂治疗。B组联合用布地奈德鼻喷雾剂和盐酸左卡巴斯汀鼻喷雾剂治疗。C组在B组联合用药的基础上采取健康教育管理和生活方式干预:每季度进行1次健康知识讲座、问题咨询和教育资料发放,内容主要为健康知识知晓率、健康行为形成率(健康知、信、行)指导;生活方式干预包括平衡饮食、尽量避免生活环境中的变应原、有氧运动(每天0.5～1.0h)。分别于干预前和干预1、3年后进行症状和体征评分,随访比较患者治疗依从性情况。结果:从AR症状和体征的改善情况、鼻内镜和放射学检查的结果进行记分评定疗效:干预3年后3组患者症状、体征评分比较均差异无统计学意义;3组患者干预前和干预1、3年后组内比较AR症状、体征均有不同程度改善,鼻塞、流涕、鼻痒、喷嚏4项症状及体征评分均较干预前显著降低,均差异有统计学意义(均P<0.05)。干预3年后,A组8例(11.43%)、B组6例(8.57%)、C组1例(1.43%)失访,C组患者治疗依从性显著高于A组和B组。结论:AR的三级预防健康教育管理在保持临床治疗有效性的同时,能明显提高AR患者的治疗依从性,是疗效得以保证的重要手段。