Notch信号通路介导血小板源生长因子AA诱导的血管平滑肌细胞增殖和迁移

目的探讨Notch信号通路在血小板源生长因子AA(PDGF-AA)诱导血管平滑肌细胞(VSMC)增殖和迁移中的作用及机制。方法脱臼处死1~2月龄雄性SD大鼠,无菌取腹主动脉,剥弃外膜及去除内皮后,贴块法培养VSMC,α-SM-actin染色鉴定。实验分为四组:对照组、γ-secretase抑制剂组(DAPT组)、PDGF-AA组和PDGFAA+γ-secretase抑制剂组(PDGF-AA+DAPT组)。实时荧光定量PCR(Real-time q PCR)检测Notch信号分子mRNA表达;Cell Titer96 Aqueous One Solution试剂盒检测细胞增殖活性;采用细胞划痕实验检测VSMC的迁移能力。结果腹主动脉VSMC表达Notch信号通路Jagged1、Jagged2、Notch1~3等几种主要的配体及受体;PDGF-AA刺激24h和48 h后分别导致Jagged2和Jagged1 mRNA表达显著增强(P0.01,n=4);与0 h相比,PDGF-AA刺激72 h后,Notch1、Notch3 mRNA表达显著增高(P0.01,n=4),而刺激24 h后Notch2 mRNA表达显著降低。PDGF-AA显著促进HES1(P0.05,n=4)、HEY2(P0.05,n=4)和转录因子Rbp-jКmRNA(P0.05,n=4)表达,DAPT抑制PDGF-AA介导的HES1、HEY2 mRNA表达增强(P0.01,n=4),但是进一步促进PDGF-AA诱导的Rbp-jКmRNA表达(P0.05,n=4);PDGF-AA刺激促进VSMC增殖(P0.01,n=5)和减少划痕余留面积(P0.01,n=4),两种效应均可被DAPT显著阻抑(P0.01,n=4)。结论 PDGF-AA调节了VSMC Notch信号分子表达,PDGF-AA部分通过激活Notch信号通路调节VSMC的增殖和迁移。     

KIAA1199基因表达与胃癌临床病理学相关性

[目的]探讨KIAA1199基因在胃癌中的表达与临床病理特征及预后的相关性,以明确KIAA1199基因在胃癌中的临床意义。[方法]采用实时定量RT-PCR方法检测手术切除胃癌及癌旁正常组织中KIAA1199的mRNA表达;采用免疫组织化学染色方法检测胃癌组织中KIAA1199的蛋白原位表达;分析KIAA1199的mRNA表达水平与患者临床病理特征及预后的相关性。[结果]胃癌组织KIAA1199的mRNA水平明显高于癌旁正常组织(P0.05),胃癌组织中KIAA1199蛋白表达较癌旁正常组织亦升高。χ~2检验发现胃癌组织KIAA1199的mRNA水平与肿瘤分化程度、浆膜浸润、淋巴结转移及临床分期呈正相关(P0.05),与患者年龄、性别及远处转移无相关性。生存分析提示KIAA1199mRNA高表达组生存率明显低于低表达组(P0.05)。[结论]KIAA1199基因在胃癌中表达量升高,与胃癌的临床病理学及生存率密切相关,对评估胃癌病程进展及预后有一定指导意义。     

PDGF-α受体反义寡核苷酸对体外视网膜色素上皮细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨血小板源性生长因子-α受体反义寡核苷酸(PDGFR-αASODN)对体外人视网膜色素上皮(humanretinal pigment epithelium,HRPE)细胞增殖和凋亡的作用。方法:使用阳离子脂质体lipofectamineTM2000将靶向PDGFR-α基因的ASODN转染至细胞株HRPE细胞,MTT法检测对HRPE细胞增殖的影响;Hoechst33258荧光染色观察凋亡细胞;流式细胞仪检测HRPE细胞的周期和凋亡率。结果:PDGFR-αASODN转染组细胞增殖抑制率和凋亡率均明显高于对照组(P<0.05)。结论:沉默PDGFR-α基因表达可显著抑制HRPE细胞的增殖,并能诱导其凋亡。     

体外扩增人脐带血来源的NK细胞对食管癌细胞的促凋亡作用

目的：建立体外扩增人脐带血来源的NK细胞的方法,并研究其对多株人食管癌细胞系和食管癌患者原代肿瘤细胞的杀伤作用。方法：分离人脐带血单个核细胞,加入放射线灭活的人白血病K562细胞及IL-2、IL-15、IL-18细胞因子体外扩增培养2周,诱导NK细胞。采用流式细胞术检测NK细胞的扩增效果及其产生的IFN-γ等细胞因子杀伤靶细胞K562的能力,并检测体外扩增的人脐带血来源NK细胞对多种食管癌细胞系和食管癌患者原代肿瘤细胞凋亡的影响。结果：利用放射线灭活的K562细胞联合多种细胞因子,可以有效的扩增人脐带血来源的NK细胞。体外培养2周后NK细胞比率可达80%左右,并对靶细胞K562有明显促凋亡作用。此外,体外扩增的人脐带血来源NK细胞能够促进6株人食管癌细胞系和食管癌患者原代肿瘤细胞的凋亡。结论：本研究建立了体外扩增人脐带血NK细胞的方法,并证实这些NK细胞对食管癌细胞的促凋亡作用,可能为食管癌的免疫治疗提供新的手段。     

肿瘤微环境中T细胞功能障碍及其逆转策略

肿瘤微环境中T细胞功能障碍是肿瘤逃逸免疫监视的关键机制,免疫检查点分子上调导致的T细胞功能障碍是目前的研究热点。阻断免疫检查点PD-1 和CTLA-4 的临床试验在许多晚期癌症患者中显示令人鼓舞的疗效,证实肿瘤微环境中存在T细胞功能障碍以及逆转T细胞功能障碍在肿瘤治疗中的潜力。然而,这些新的免疫治疗方法只在少数癌症患者中产生持久的临床疗效,提示肿瘤微环境的异质性和复杂性。最近,单细胞水平的研究进一步阐明了肿瘤微环境中T细胞功能障碍的表型特征和临床意义,揭示表观遗传学和代谢改变是导致肿瘤微环境中T细胞功能障碍的重要机制,并提出逆转肿瘤微环境T细胞功能障碍的新方法。本文聚焦这些肿瘤微环境中T细胞功能障碍及其逆转策略的最新研究进展。     

应用近红外光谱技术评价早产儿认知功能的探讨

目的：通过建立对早产儿光刺激后的反应模式,评价早产儿早期的认知功能,研究早产儿在发育过程中的脑反应性与足月儿之间的差距。方法：对纠正胎龄3个月、6个月的早产儿进行光刺激,应用近红外光谱技术,观察光刺激后脑反应性的变化,并与同龄儿对照。结果：早产儿在纠正胎龄3个月时,光刺激后开始反应时间、反应高峰出现的时间分别为17.2±5.2s、38.4±9.6s,明显长于足月儿的13.1±2.7s、28.9±5.0s;脑组织还原血红蛋白、氧合血红蛋白、脑组织氧饱和度在刺激后的最大反应值分别为(1.2±0.5)%、(1.5±0.6)%、(1.3±0.4)%,明显低于足月儿的(2.3±0.3)%、(2.8±0.3)%、(2.4±0.5)%。到了纠正胎龄6个月时,光刺激后的脑反应性与足月儿相比,无统计学差异。结论：早产儿在发育过程中,认知功能存在一定的滞后,到纠正胎龄3个月时,外界刺激后的脑反应性仍落后于同龄儿,到了纠正胎龄6个月时,脑反应性接近同龄儿,应加强对早产儿的早期干预。     

血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1在颈总动脉球囊损伤大鼠血管中的表达

目的 观察血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)在颈总动脉球囊损伤大鼠血管中的表达.方法 建立大鼠颈总动脉球囊损伤后血管再狭窄的动物模型,40只SD大鼠随机分为4组(每组10只):假手术组、损伤24h组、损伤7d组、损伤14d组.硫代巴比妥钠法检测血清MDA含量,应用RT-PCR技术和免疫组化技术分别检测LOX-1 mRNA和蛋白的表达,HE染色评价血管增生情况并计算内膜中膜面积比值(IA/MA).结果 假手术组大鼠颈总动脉内膜与中膜面积比值(IA/MA)很小,损伤7d组LA/MA值显著高于假手术组(P<0.05);损伤14d组IA/MA值显著高于7d组(P<0.05).假手术组未见LOX-1 mRNA表达,损伤24h组、损伤7d组、损伤14d组均可见LOX-1mRNA表达,损伤7d组、损伤14d组LOX-1mRNA表达水平显著高于损伤24h组(P<0.05),而损伤7d组和损伤14d组无显著差异(P>0.05).免疫组化显示LOX-1在血管壁的表达主要位于新生内膜区,随损伤时间延长其表达量逐渐升高;而假手术组未见LOX-1蛋白表达.损伤24h组、损伤7d组,损伤14d组血清MDA含量均较假手术组显著增加(P<0.05).结论 颈动脉球囊损伤后血管内膜增生伴有LOX-1表达上调、血清MDA含量增加,LOX-1及其介导的氧化应激可能参与新生内膜的形成.     

卡铂的时辰化疗

目的观察按时辰给药对卡铂(CBP)毒副反应的影响。方法2007年9月—2008年12月以时辰给药方式治疗20例卵巢癌、子宫癌患者(A组),化疗方案为紫杉醇/卡铂,卡铂在16:00以后静脉滴注给药。同期20例含卡铂方案化疗的患者(B组)在14:00前静脉滴注完毕。2组病例常规予以地塞米松预处理和昂丹司琼、西咪替丁止吐。结果A、B 2组胃肠道反应发生率分别为15%和55%,2组比较有显著性差异(P0.05);2组血液学毒性和肾毒性比较无显著性差异。结论运用CBP化疗时可将常规给药方法改为时辰给药,能显著降低CBP的胃肠道反应,提高患者的生存质量和对治疗的依从性。     

精神分裂症患者照料者生活质量调查

目的:了解住院精神分裂症患者照料者生活质量。方法:应用世界卫生组织生活质量表(WHOQOL-100)特质应对方式问卷对101例精神分裂症患者照料者进行调查。结果:精神分裂症患者的照料者的生活质量总分低于国内常模(P<0.01),在生理和社会关系二个领域,精力与疲倦、睡眠与休息、身材与相貌、工作能力、个人关系、经济来源等6个方面得分低于国内常模(P<0.05);在环境和精神支柱二个领域,疼痛与不适、消极感受、对药物及医疗手段的依赖性、社会安全保障、住房环境、医疗服务与社会保障获取途径与质量、环境条件(噪声、污染)等7个方面得分高于国内常模,差异有显著性(P<0.05)。长期照料者WHOQOL-100生活质量中,工作能力、个人关系、经济来源、获取新信息、知识、技能的机会、医疗服务与社会保障获取途径与质量等五个方面得分低于非长期照料者;长期照料者消极应对方式得分高于非长期照料者,差异有显著性(P<0.05)。结论:精神分裂患者照料者生活质量总体水平低于普通人群;长期照料者生活质量水平低于非长期照料者,主要因素是照料者更多采用消极应对方式。