GST-GP302融合蛋白在大肠杆菌中的表达及其抗血清的制备

目的 :在大肠杆菌中表达血小板糖蛋白GPIbα之vWF结合区(GP30 2 )与谷胱甘肽S 转移酶GST的融合蛋白并制备其抗血清。方法 :将GP30 2片断插入GST融合表达载体 pGEX 4T 1,重组载体酶切鉴定后 ,在大肠杆菌中经IPTG诱导表达获得GST GP30 2融合蛋白 ,SDS PAGE分析表达产物。包涵体经变性复性后免疫新西兰白兔 ,制备抗血清 ,ELISA、Westernblot检测重组抗原的免疫活性。结果 :重组质粒酶切鉴定表明 ,GP30 2基因已正确插入到 pGEX 4T 1中 ,经IPTG诱导后 ,表达出相对分子质量 (Mr)约为 5 90 0 0的融合蛋白 ,获得了ELISA效价为 1× 10 -5的多克隆抗体。Westernblot证明所制备的多抗可以与血小板糖蛋白特异性结合。结论 :GP30 2片断在大肠杆菌中的成功表达及制备得到的多克隆抗体 ,为检测血小板糖蛋白GPIbα及其在其他体系中的表达提供了一种检测途径     

猪血小板膜糖蛋白的纯化与鉴定

目的：分离纯化猪血小板膜糖蛋白并对其进行鉴定。方法：差速离心法分离猪血小板，1％TritonX-100溶解膜糖蛋白，麦胚凝集索亲和层析纯化糖蛋白(0．3mol／L N-乙酰葡萄糖胺洗脱)，用鼠抗人GPⅠb单抗PHN89作点印迹，聚丙烯酰胺凝胶电泳，考马斯亮蓝(Coomassie blue，CB)和过碘酸-Schiff(PAS)染色鉴定糖蛋白，腺苷二磷酸钠盐(ADP)和瑞斯托菌素(ristocetin)诱导的人血小板聚集测定其体外活性。结果：用GPⅠb单抗PHN89为一抗的点印迹表明0．3mol／L N-乙酰葡萄糖胺能充分洗脱结合到凝集素上的GPⅠb。PAS法糖定性有2条显色条带，SDS-PAGE纯化后有2条蛋白区带。ADP阳性对照血小板聚集率为74％，纯化前后的样品血小板聚集率分别为42％和4％，ristocetin阳性对照血小板聚集率为100％，纯化前后的样品血小板聚集率分别为25％和3％，表明制备的血小板糖蛋白具有生物学活性。结论：得到了较纯的血小板膜糖蛋白，为血小板膜糖蛋白的进一步研究及应用奠定基础。     

特殊类型心肌病2例诊疗体会

随着超声及心血管造影技术应用的普及，心肌病的诊断已不困难，但是特殊类型心肌病的诊断与治疗仍很棘手。现报告2例非典型心肌病的诊断治疗体会。亚病历简介例1：男，44岁。反复心悸2年，加重2天，于1996年4月9日入院。2年前饮酒后感心悸、胸闷，休息后缓解，后多次出现心悸、胸闷，无明显心绞痛，含服速效救心丸后可缓解。曾多次在发病期间查心电图均提示频发室性早搏，外院怀疑心肌炎。此次于2天前无明显诱因心前区不适、胸闷加重，急查心电图示：室性心动过速（呈l，BBB型）。经静滴利多卡因、异搏定等治疗无效，静滴乙胺碘峡酮后转为…     

人工组织神经移植物桥接狗坐骨神经缺损后的机体免疫功能反应

目的：观察机体免疫系统对人工组织神经移植物的反应。方法：将人工组织神经移植物桥接到狗的坐骨神经缺损处，并在术前和术后6个月时分别取血，进行淋巴细胞转化试验、E花环试验，同时光镜观察术后6个月时再生神经中白细胞浸润的情况。结果：人工组织神经移植物植入后未见排斥反应产生。结论：人工组织神经移植具有较好的生物相容性。     

高山红景天抗伤害感受作用初探

[目的 ]观察高山红景天的提取物多糖和甙的抗伤害感受作用。[方法 ]对 2 7只昆明种小鼠用醋酸扭体法测内脏痛 ;2 4只昆明种小鼠计算机PCLab软件测痛阈观察躯体痛。[结果 ]高山红景天多糖和甙均能明显减少醋酸扭体法 1 5min内小鼠扭体的次数 (P <0 .0 1 ) ,并能明显提高电刺激所致小鼠躯体痛的痛阈 (P <0 .0 1 )。[结论 ]高山红景天具有明显的抗伤害感受作用     

尿微量白蛋白检测对早期糖尿病肾病的诊断

目的通过尿中微量白蛋白的含量变化对糖尿病肾病(DN)早期诊断的意义。方法采用透射免疫比浊法检测85例糖尿病肾病(DN)患者尿中微量白蛋白,并与50例健康体检人员对照。结果糖尿病肾病(DN)患者尿微量白蛋白的含量明显高于对照中,两组比较有统计学意义(P<0.01)。结论尿微量白蛋白对糖尿病肾病(DN)患者早期发现、早期诊断和治疗具有重要意义。     

TSA体外抑制Ⅱ型胶原诱导的抗原特异性T细胞增殖

目的：检测TSA对Ⅱ型胶原诱导的T细胞增殖的抑制作用。方法：采用CIA小鼠模型，收集引流淋巴结细胞。MTT法观察不同浓度TSA对T细胞的抑制作用，Annexin-v观察细胞凋亡情况。用Caspase3试剂盒检测Caspase3酶活性。结果：TSA呈时间和剂量依赖性抑制T细胞增殖，经20ng／ml TSA处理后，T细胞凋亡率增高，呈现时间依赖性效应关系。20ng/ml TSA作用T细胞后，实验组与对照组相比Caspase3活性明显升高。结论．TSA可能通过上调Caspase 3活性，诱导细胞凋亡，从而抑制T细胞增殖。     

爱宝疗液联合尤靖安治疗宫颈糜烂的疗效观察

目的 探讨爱宝疗液联合尤靖安治疗宫颈糜烂的疗效.方法 随机选取80例宫颈糜烂患者采用爱宝疗液联合尤靖安治疗为治疗组,70例宫颈糜烂患者采用爱宝疗液单纯治疗为对照组.两组疗效进行比较.结果 治疗组与对照组治疗宫颈糜烂在时间上有显著差异(P＜0.05),在疗效上有显著差异(P＜0.05).结论 爱宝疗液联合尤靖安治疗是治疗宫颈糜烂的较理想的方法.     

肾病综合征高凝状态的中医治疗体会

肾病综合征(以下简称肾病)是临床常见病, 应用中西医结合治疗可取得较好疗效.