积雪草酸对颅脑损伤的保护作用及其机制研究

目的 研究积雪草酸对颅脑损伤的保护作用及其机制。方法 采用落重法建立大鼠闭合性颅脑损伤模型和液压冲击颅脑损伤模型,测定大鼠脑组织含水量、血脑屏障通透性、以及观察脑组织病理形态学变化,研究积雪草酸对颅脑损伤的保护作用;用酶联免疫吸附测定(ELISA)和聚合酶链式反应(PCR)检测炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)的表达,探讨其作用机制。结果 积雪草酸可显著减少颅脑损伤后脑组织含水量,减轻血脑屏障通透性,改善脑组织细胞形态;并且可以显著抑制颅脑损伤后炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6的表达。结论 积雪草酸具有保护颅脑创伤的作用,其作用机制可能与其抑制炎症作用有关。     

辛伐他汀对家兔动脉粥样硬化血管组织作用的蛋白质组研究

目的通过研究辛伐他汀对高血脂致动脉粥样硬化家兔血管组织蛋白质组的变化，评价其药效影响。方法建立新西兰家兔高脂致动脉粥样硬化模型，用双相凝胶电泳技术检测其蛋白质组的变化。结果服用辛伐他汀后，脂肪肝病变基本消失；通过分析比较得到的2DE图像，17个点明显上调（＞3倍），12个点明显下调（＜3倍），辛伐他汀对其中少数蛋白点有回调作用, 对多数点无回调作用。结论辛伐他汀能明显改善肝脏对脂肪的代谢功能，但未能有效修复高血脂引起的动脉血管壁的损伤。     

基因芯片分析补阳还五汤对局灶性脑缺血再灌注大鼠的保护作用机制

目的 :用基因芯片分析补阳还五汤 (BYHWT)对脑缺血再灌注损伤大鼠的基因表达影响 ,探讨其保护作用机制。方法 :以博星公司定制的包含 512条大鼠的cDNA基因表达谱芯片 ,研究脑缺血 2h再灌注 2 4h的大鼠脑组织基因表达谱 ,并观察补阳还五汤对大鼠脑缺血再灌注损伤的基因表达影响。结果 :脑缺血 2h再灌注 2 4h的大鼠脑组织共筛选出差异表达基因 149条 ,其中 69条基因表达上调 ,80条表达下调 ;脑缺血同时灌胃BYHWT大鼠脑组织共筛选出差异表达基因 31条 ,其中 2 5条基因表达上调 ,6条表达下调。结论 :补阳还五汤对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后的许多基因表达变化都有调节作用 ,是其保护脑缺血再灌注损伤的机制。     

积雪草总苷对实验性抑郁症大鼠血清皮质酮和单胺类神经递质的影响

目的:探讨积雪草总苷抗抑郁症可能的作用机制.方法:采用荧光法检测积雪草总苷对实验性抑郁症大鼠血清皮质酮的影响;HPLC-ECD法检测积雪总苷对大鼠皮质、海马和下丘脑单胺类神经递质含量的影响.结果:积雪草总苷降低抑郁症大鼠的血清皮质酮水平,增加脑内5-HT,NE和DA及其代谢产物的含量.结论:积雪草总苷的抗抑郁活性与改善下丘脑-垂体-肾上腺轴功能和增加胺神经递质的水平有关.     

缺血性脑卒中药物治疗的一些进展

本文介绍防治缺血性脑卒中的几类主要药物。重点介绍抗血栓药，包括溶栓药、抗凝药及抗血小板药在目前临床应用的情况；并简要介绍神经保护药、降脂药、降压药以及新提出的一些可能有效药物，如基于抗炎症的药物及基因治疗的研究进展。     

CXCL16基因与红色荧光蛋白pDsRed2-N1融合基因表达载体的构建

目的:构建人趋化因子配体16(CXC ligand 16,CXCL16)与增强型红色荧光蛋白(red fluorescent protein,RFP)的融合基因表达载体pDsRed2-N1/CXCL16,使CXCL16-RFP融合蛋白在人293T细胞中稳定表达。方法:针对CXCL16基因设计引物,扩增人CXCL16 cDNA,退火后插入含有RFP的表达载体pDsRed2-N1。测序正确的CXCL16和RFP的融合基因表达载体pDsRed2-N1/CXCL16,经脂质体转染人293T细胞株,G418筛选获得稳定转染的细胞株。荧光显微镜观察细胞转染情况,Western blotting比较转染前后293T细胞中CXCL16蛋白的表达变化。结果:经转化细菌、抽提质粒、酶切鉴定和DNA序列分析证实,CXCL16基因已正确插入pDsRed2-N1中RFP基因的上游,获得融合基因表达载体pDsRed2-N1/CXCL16。空载体pDsRed2-N1和融合基因表达载体pDsRed2-N1/CXCL16经脂质体转染人293T细胞后,在荧光显微镜下可观察到表达RFP的细胞发出红色荧光,转染效率分别可达95%和85%。pDsRed2-N1/CXCL16转染293T细胞后,CXCL16蛋白的表达水平显著上调。结论:成功构建的pDsRed2-N1/CXCL16融合基因表达载体可在293T细胞中稳定表达CXCL16蛋白,为进一步研究CXCL16在细胞增殖调控中的作用奠定了基础。     

胶质母细胞瘤微血管内皮细胞中Nogo-B的表达意义

目的:研究人胶质母细胞瘤(GBM)源性微血管内皮细胞(GBMDMEC)和正常人脑组织源性微血管内皮细胞(GBMDMEC)中Nogo-B的功能表达,了解Nogo-B在GBM血管生成中起的作用.方法:通过显微外科神经手术获得14例GBM标本,利用CD105免疫磁珠内皮细胞分选系统纯化内皮细胞,采用免疫组化染色,Real-time PCR和Western Blot等方法检测其中Nogo-B在蛋白和mRNA水平上的表达.结果:与正常脑组织源性微血管内皮细胞相比较,Real-time PCR和Western Blot检测结果发现,在GBM源性微血管内皮细胞中Nogo-B表达上调.结论:Nogo-B在恶性GBM中mRNA和蛋白水平上表达均显著上调,证明Nogo-B参与了GBM新生血管形成,与GBM发生发展密切相关.     

烟碱对白细胞介素1β诱导的培养牛脑微血管内皮细胞表达E-选择素的增强作用

目的··：观察烟碱对牛脑微血管内皮细胞（ＢＣＭＥＣ）表达Ｅ－选择素的影响。方法··：离体培养新生牛脑微血管内皮细胞;血细胞计数仪测定ＢＣＭＥＣ粘附大鼠血单核细胞（ＭＮ）的数目;应用ＥＬＩＳＡ法检测ＢＣＭＥＣ表达Ｅ－选择素的量。结果··：高浓度烟碱（１０－５ｍｏｌ·Ｌ－１）单独作用于ＢＣＭＥＣ２ｈ后,使ＢＣＭＥＣ对ＭＮ的粘附率从１２．９％±ｓ０．４％增至１５．７％±ｓ０．６％,且ＢＣＭＥＣ也可表达少量的Ｅ－选择素;而当烟碱与ＢＣＭＥＣ作用２ｈ后,再经白细胞介素１β（ＩＬ－１β）诱导４ｈ,烟碱可浓度依赖性（１０－７ｍｏｌ·Ｌ－１－１０－５ｍｏｌ·Ｌ－１）地增强ＩＬ－１β的诱导作用,增加ＢＣＭＥＣ对ＭＮ的粘附率以及Ｅ－选择素的表达量;抗Ｅ－选择素单克隆（ＡＥｍＡｂ）能显著阻断ＩＬ－１β诱导ＢＣＭＥＣ后对ＭＮ的粘附率。结论··：烟碱增强ＩＬ－１β诱导的脑微血管内皮细胞表达Ｅ－选择素的作用。     

ox-LDL促进树突状细胞LOX-1表达及炎症因子分泌

目的应用小鼠高脂模型及树突状细胞株研究血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1(LOX-1)高表达树突状细胞(DC)在动脉粥样硬化中的作用。方法氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导原代培养的C57小鼠骨髓来源的树突状细胞(BMDC),采用Western blot检测BMDC LOX-1蛋白水平;采用流式细胞术检测高表达LOX-1和低表达LOX-1细胞亚群的比例;MACS磁珠分选LOX-1表达水平不同的两种细胞亚群,观察ox-LDL对两种细胞亚群的影响及释放炎症因子的影响;采用C57小鼠高脂模型,在高脂喂养的不同时间(4周、6周、8周)检测小鼠总胆固醇水平和主动脉中DC数量;用不同浓度的Dil标记的ox-LDL(Dil-ox-LDL)刺激DC2.4细胞,荧光显微镜观察各组细胞吞噬作用的差异,Western blot检测LOX-1的表达。结果 DC可分为高表达和低表达LOX-1两种细胞亚群,且ox-LDL能增加LOX-1~(high)DC的比例;分选后的阳性细胞被ox-LDL刺激后,TNF-α和IL-1βmRNA的表达明显上调(P0.01),且阳性细胞的上升比例高于阴性细胞。在C57小鼠高脂模型中,高脂喂养组总胆固醇水平明显升高,且随着总胆固醇水平的升高,小鼠主动脉中DC增多,且LOX-1~(high)DC比例明显增加。用不同浓度的Dil-ox-LDL刺激DC2.4细胞,随着Dil-ox-LDL浓度的升高,DC2.4细胞对ox-LDL的吞噬也增加,并且ox-LDL可以诱导DC2.4细胞表面LOX-1表达,20 mg/L和40 mg/L的ox-LDL对LOX-1表达的诱导作用明显。结论 ox-LDL能够上调DC表面受体LOX-1,增加LOX-1~(high)DC比例,促进炎症因子表达。