泛耐药鲍曼不动杆菌PBP1A、CarO及β-内酰胺酶的编码基因分析

目的了解一株泛耐药鲍曼不动杆菌（js01株）可能存在的β-内酰胺类药物耐药机制。方法对自2011年12月宁波市第一医院住院患者的痰样本js01株分离,用gyrA和parC基因PCR扩增、测序和BLASTn比对确认菌种。用PCR法分析33种β-内酰胺酶基因（13种A类酶基因、10种B类酶基因、2种C类酶基因、8种D类酶基因）和插入序列与β-内酰胺酶编码基因连锁检测以及CarO膜孔蛋白编码基因。再用分段PCR法扩增PBP1A编码基因,双向测序后拼接成全长序列。结果js01株检出β-内酰胺酶TEM-1、ADC-30、OXA-23和OXA-66编码基因。插入序列与β-内酰胺酶编码基因连锁检测显示ISabal-ADC-30和ISabal—OXA-23为阳性。js01株carO基因序列与鲍曼不动杆菌敏感株（SDF）相比存在有义突变,氨基酸序列一致率为76．0％（189／249）,存在3个氨基酸缺失。is01株PBP1A编码基因序列与SDF株相比存在有义突变,氨基酸序列的一致率为99．6％（848／851）,存在3个氨基酸变异,但js01株PBP1A蛋白分子立体结构比SDF株丢失2个螺旋结构。结论本株鲍曼不动杆菌对β-内酰胺类药物耐药主要与该菌株管家基因（PBP1A、CarO编码基因）突变与可移动遗传元件介异的β-内酰胺酶编码基因有关。     

2009-2011年肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶和碳青霉烯酶检测及耐药性分析

近年来,由于抗菌药物的广泛使用,尤其是第三代头孢菌素及碳青霉烯类抗生素的不合理使用,细菌耐药现象越来越严重,临床分离的多重耐药菌株日益增多,给实验室诊断和抗感染治疗带来极大困难。肠杆菌科细菌耐药的主要机制是产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）和碳青霉烯酶,可以导致多重耐药的发生,因此有必要增加此类酶的检测,     

鲍曼不动杆菌β-内酰胺类抗生素耐药机制研究进展

鲍曼不动杆菌（Acinetobacter baumannii）是不动杆菌属（Acinetobacter spp．）的一个种类。其完整的分类学谱系为Cellular organisms;Bacteria;Proteo—bacteria;γ-proteobacteria;假单胞菌目;莫拉菌科;不动杆菌属,为严格需氧、无动力、过氧化氢酶阳性且氧化酶阴性…。不动杆菌属的自然生态系统为水和土壤,在人类可定植于皮肤、伤口、呼吸道和消化道。     

烧伤创面常用外用药对鲍氏不动杆菌生物膜内菌的影响

目的 观察烧伤创面常用外用药对鲍氏不动杆菌(AB)游离菌及生物膜内菌的抗菌活性,以及协同应用氨溴索对AB生物膜内菌的影响. 方法 11株AB均分离自2005年8月-2007年4月笔者单位烧伤住院患者创面、呼吸道和血液标本.(1)稀释法测定醋酸磺胺米隆溶液和醋酸氯己定溶液对AB游离菌(敏感株、标准株、耐药株)的MIC和最低杀菌浓度(MBC).(2)以LB或TSB培养液培养AB 12、24、48 h形成生物膜,采用MBC的上述2种外用药分别处理30 min(磺胺米隆组和氯己定组),以不加外用药处理的生物膜作为对照组,激光扫描共聚焦显微镜检测生物膜厚度,计算生物膜内活菌比例.将每个外用药组生物膜混匀并接种于LB培养皿,观察有无细菌生长.(3)另以LB培养液培养AB 48 h形成生物膜,采用MBC的上述2种外用药单独(磺胺米隆组和氯己定组)及分别联合终浓度3.75 mg/mL氨溴索溶液(氨溴索+磺胺米隆组和氨溴索+氯己定组)处理30 min,以不加任何药物处理的生物膜作为对照组,噻唑蓝法检测生物膜内菌增殖情况(数据以吸光度值表示).对数据行单因素方差分析和LSD-t检验. 结果 (1)醋酸磺胺米隆溶液和醋酸氯己定溶液对AB游离菌的MIC分别为25.00、0.03 mg/mL,且每种药物的MIC和MBC相同.(2)各组耐药株生物膜厚度于多数时相点大于敏感株.与对照组比较,2个外用药组各时相点下3种菌株生物膜厚度及膜内活菌比例均有所降低.各外用药组生物膜培养均可见大量细菌生长.(3)对照组耐药株吸光度值为0.776±0.071,磺胺米隆组和氯己定组耐药株吸光度值分别为0.625±0.063、0.420±0.068;氨溴索+磺胺米隆组、氨溴索+氯己定组耐药株吸光度值分别为0.174±0.089、0.178±0.044,显著低于对照组(t值分别为11.823、16.009,P值均为0.000)和对应的单独用药组(t值分别为9.248、6.681,P值均小于0.01). 结论 耐药AB易形成生物膜,并可阻碍创面外用药物对细菌的杀灭作用,联合应用氨溴索与创面外用药能起到协同灭菌作用.     

嗜麦芽窄食单胞菌的耐药机制研究

近年来，嗜麦芽窄食单胞菌感染率不断增加，该菌已成为医院感染的重要病原菌。其耐药机制复杂，与产生β内酰胺酶等灭活酶、外膜通透性改变、靶位变异、主动外排系统、生物膜形成以及质粒、整合子、转座子等介导的耐药基因转移等有关。现就嗜麦芽窄食单胞菌耐药现状、耐药机制的研究进展作一综述。     

家蝇对常用杀虫剂的抗药性调查

目的检测家蝇对溴氰菊酯、高效氯氰菊酯、胺菊酯、仲丁威和敌敌畏的的抗药性。方法采用点滴法测定家蝇对杀虫剂的半数致死量(LD50)。结果家蝇对溴氰菊酯、高效氯氰菊酯、胺菊酯、仲丁威和敌敌畏LD50分别为0.071 1、0.347 7、0.850 7、59.633 7和0.382 7μg/只,对溴氰菊酯、高效氯氰菊酯、敌敌畏的抗性级别均为超高抗性,对胺菊酯为中抗,对仲丁威为高抗。结论可根据抗药性合理选择杀虫剂,以提高对家蝇的防制效果。     

冠心病介入术后氯吡格雷抵抗的代谢相关基因检测及临床对策研究

目的 探讨细胞色素P450(CYP)2C19基因单核苷酸多态性与冠心病患者经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后长期服用氯吡格雷临床预后的关系.方法 前瞻性入选2013年1月至2014年6月住院治疗并PCI的冠心病患者150例.均接受双联抗血小板治疗,于服药前和PCI术后检测血小板聚集率,根据检测结果分为氯吡格雷抵抗组(CR)和非氯吡格雷抵抗组(NCR).并测定CYP2C19基因单核苷酸多态类型.CR组经临床对策干预后与NCR组对比,观察两组患者术后1年心绞痛复发、出血等情况的发生.结果 约有24.67％的冠心病患者采用氯吡格雷治疗后血小板聚集率不能达标;通过关联分析,发现CYP2C19*2携带者血小板聚集率显著较高;综合分析发现CYP2C19 * 2、长期吸烟、血小板计数增高及糖尿病为血小板聚集率不能达标的独立危险因素;CR组经临床对策干预后与NCR组主要终点、次要终点及出血事件差异无统计学意义.结论 CYP2C19 *2、长期吸烟、血小板计数增高及糖尿病为血小板聚集率不能达标的独立危险因素.氯吡格雷抵抗患者,经临床对策干预强化抗血小板治疗可改善冠心病患者PCI术后血小板高反应性状态等,且不增加出血风险.     

广州市致倦库蚊幼虫对常用杀虫剂的抗药性研究

目的了解广州市致倦库蚊对常用杀虫剂的抗药性水平,为控制蚊虫合理用药提供依据。方法选择4种常用杀虫剂,采用幼虫浸渍法对广州市3个中心城区(越秀、荔湾、天河)致倦库蚊幼虫进行抗药性测定。结果广州市越秀、荔湾、天河区致倦库蚊除对高效氯氰菊酯敏感外(R/S<2),对倍硫磷、氯菊酯、溴氰菊酯均产生了不同程度的抗性。3个城区的致倦库蚊对倍硫磷的抗性系数分别为2.77、1.84、1.16;对氯菊酯的抗性系数分别为8.25、10.80、8.35;对溴氰菊酯的抗性系数分别为45.87、12.29、4.65。结论在广州市蚊虫防治中,应落实媒介综合治理策略,以防抗药性的产生。     

咸阳市德国小蠊对6种常用杀虫剂的抗性测定

目的 测定咸阳市德国小蠊对常用杀虫剂的抗性水平,为合理使用杀虫剂提供科学依据。方法 采用全国蟑螂防治学组制定的《蟑螂抗药性监测方案(试行)》规定的药膜法测定德国小蠊的半数击倒时间(KT50)。结果 咸阳市德国小蠊对6种杀虫剂乙酰甲胺磷、敌敌畏、氯氰菊酯、高效氯氰菊酯、溴氰菊酯和残杀威的抗性倍数分别为1.71、2.46、1.77、1.38、1.74、2.16。结论 咸阳市德国小蠊对6种常用杀虫剂抗性倍数在1.38~2.46之间,处于低抗水平。     

血液病科2011-2013年临床标本分离病原菌及耐药性分析

目的分析血液病科近3年临床送检标本病原菌分布及耐药情况。方法收集2011年1月—2013年12月血液病科住院患者送检标本分离菌株,使用K-B法或自动化仪器法进行药敏检测,抗菌药物药敏结果判定依照美国临床试验标准化委员会(CLSI)2011年版指南,应用WHONET5.6软件进行数据统计分析。结果 2011—2013年血液病科临床送检标本共分离病原菌462株,其中革兰阳性球菌161株,革兰阴性杆菌279株,真菌22株。葡萄球菌属中耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRSCN)及耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的检出率为81.37%和62.50%。葡萄球菌属及肠球菌属细菌对利奈唑胺耐药率分别为1.69%及3.57%,葡萄球菌属细菌对替考拉宁耐药率为3.39%,未检出对万古霉素耐药的革兰阳性球菌。肠杆菌科中大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素高度敏感(敏感率为97.56%~98.88%);而非发酵革兰阴性杆菌铜绿假单胞菌及鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素耐药明显(耐药率为38.71%~64.00%)。结论血液病科主要细菌耐药现象较重,应根据血液病科细菌分布的特点及药敏结果,有针对性地合理应用抗菌药物,加强医院感染控制措施,降低细菌耐药率。