外伤性无骨折脱位型颈髓损伤的误诊及对疗效的影响

目的 探讨外伤性无骨折脱位型颈脊髓损伤的误诊原因及其对疗效的影响. 方法 回顾1998年10月至2005年10月52例无骨折脱位型颈脊髓损伤患者病例资料,分析18例被漏诊或误诊患者其被漏诊或误诊的原因,并分别于入院时及治疗后随访时对脊髓损伤程度按ASIA标准分级进行评定与比较. 结果 所有患者获得6～67个月(平均29个月),患者入院时及治疗后随访时采用ASIA标准分级比较,34例无漏诊或误诊患者平均提高1.06级,18例被漏诊或误诊患者平均提高0.50级,采用等级资料Ridit分析,两组差异有统计学意义(u=2.0739,P=0.0381). 结论 无骨折脱位型颈脊髓损伤易被漏诊或误诊,早期确诊并合理治疗具有较好的疗效.     

人胰岛素样生长因子Ⅰ基因对兔关节软骨细胞的有效转染及表达

目的 研究人胰岛素样生长因子Ⅰ(hIGF-Ⅰ)基因构建的真核表达载体质粒对兔关节软骨细胞的有效转染和表达.方法 将hIGF-Ⅰ基因构建在pcDNA 3.1质粒上,经FuGENE 6介导转入兔关节软骨细胞;设未转hIGF-Ⅰ基因软骨细胞作对照.转染后第3天用RT-PCR技术检测hIGF-Ⅰ、Ⅱ型胶原和聚合素在mRNA水平的表达,用细胞爬片免疫组织化学和Western blot测定hIGF-Ⅰ在蛋白水平的表达.结果 RT-PCR显示hIGF-Ⅰ在转染组中琼脂糖电泳318 bp处见到相应的目的 条带,而对照组未出现目的 条带;Ⅱ型胶原和聚合素在转染和对照组中以β-actin为参照半定量检测分别增加到1.3倍和1.4倍(P<0.05).免疫组织化学显示转染组细胞爬片有hIGF-Ⅰ表达的棕黄色颗粒,对照组胞浆中未见棕黄色颗粒,转染组胞浆中出现大量的Ⅱ型胶原棕黄色颗粒.Western blot显示转染组细胞在7.6 KDa标记处有hIGF-Ⅰ的蛋白条带出现对照组则没有.结论 FuGENE 6介导的重组hIGF-Ⅰ基因真核表达载体质粒可有效转染兔关节软骨细胞,在mRNA和蛋白水平上有效表达hIGF-Ⅰ及Ⅱ型胶原,表达的hIGF-Ⅰ能在mRNA水平上增加Ⅱ型胶原和聚合素的合成,保持软骨细胞表型的稳定.     

G蛋白偶联受体激酶相互作用蛋白1对BMSCs向内皮细胞分化的影响机制研究北大核心CSCD

目的通过比较G蛋白偶联受体激酶相互作用蛋白1(G protein coupled receptor kinase interacting protein 1,GIT1)野生型及GIT1基因敲除型小鼠BMSCs向内皮细胞分化过程,探讨GIT1影响血管形成的机制。方法 GIT1杂合子小鼠雌雄配对饲养,对获得的新生小鼠采用PCR法行基因型鉴定。取GIT1野生型与GIT1基因敲除型小鼠胫骨及股骨,分离培养BMSCs并传代。取第2代BMSCs分为4组,分别为野生型对照组(A组)、野生型实验组(A1组)、基因敲除型对照组(B组)、基因敲除型实验组(B1组);A1、B1组细胞采用内皮细胞诱导液培养,A、B组细胞进行常规培养。Western blot检测各组细胞VEGF受体2(VEGF receptor 2,VEGFR-2)、VEGFR-3、磷酸化VEGFR-2(phospho-VEGFR-2,p VEGFR-2)、p VEGFR-3蛋白表达;流式细胞仪检测各组内皮细胞标志物血管性血友病因子(von Willebrand factor,v WF)、血小板内皮细胞黏附因子1(platelet-endothelial cell adhesion molecule 1,PECAM-1)、血管内皮黏钙蛋白(vascular endothelial cadherin,VE-Cadherin)表达。另取GIT1野生型小鼠第2代BMSCs分为4组:Ⅰ组,原细胞培养液培养;Ⅱ组,细胞培养液中加入VEGFR-3阻断剂SAR131675;Ⅲ组,内皮细胞诱导液培养;Ⅳ组,内皮细胞诱导液中加入SAR131675。流式细胞仪检测各组内皮细胞标志物v WF、PECAM-1、VE-Cadherin表达。结果 Western blot检测示,A、A1、B、B1组细胞的VEGFR-2、p VEGFR-2蛋白表达无明显差异,A1组VEGFR-3、p VEGFR-3蛋白表达明显高于其余3组。流式细胞仪检测示,A1组v WF、PECAM-1及VE-Cadherin表达均显著高于A、B、B1组,B1组显著高于A、B组(P<0.05);A、B组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。阻断VEGFR-3实验中,Ⅲ组v WF、PECAM-1及VE-Cadherin表达均显著高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ组,Ⅳ组高于Ⅰ、Ⅱ组(P<0.05);Ⅰ、Ⅱ组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 GIT1通过VEGFR-3影响小鼠BMSCs向内皮细胞分化,进而影响血管形成。     

应用零切迹椎间融合器对颈椎前路椎间盘切除及融合术后并发症的影响

目的探讨零切迹椎间融合器对颈椎前路椎间盘切除及融合术后并发症的影响。方法回顾性的分析2014年8月至2018年8月于南京医科大学附属无锡人民医院行颈椎前路椎间盘切除及融合术治疗的74例患者,其中观察组40例应用零切迹椎间融合器,余观察组34例应用钛板联合cage融合器。采用日本骨科学会(JOA)评分评估两组患者的手术效果,随访记录两组患者术后并发症的发生情况。结果两组患者术前及术后末次随访JOA评分比较差异无统计学意义(P 0. 05);观察组末次随访JOA评分显效改善率为92. 5%,而对照组为91. 2%,两组间比较差异无统计学意义(P 0. 05)。观察组吞咽困难发生率为2. 5%明显低于对照组的20. 6%,两组间比较差异有统计学意义(P 0. 05);观察组邻近节段骨化的发生率为5. 0%明显低于对照组的23. 5%,两组间比较差异有统计学意义(P 0. 05)。结论零切迹椎间融合器相比钛板联合cage融合器手术效果相当,但零切迹椎间融合器可显著降低术后吞咽困难及邻近节段骨化的发生率。     

经口咽入路上颈椎手术患者的围手术期护理

上颈椎病变如齿状突肿瘤和陈旧性的寰枢椎骨折脱位等,可造成延髓、高位颈髓腹侧受压,产生明显神经压迫症状者,手术为唯一的治疗方法.     

不同质量浓度丝裂霉素C干预椎板切除大鼠硬膜外瘢痕组织增生:定性和定量的结合检测

背景:目前较为常用的预防椎板切除术后硬膜外瘢痕粘连的措施是以各种半流体物质或者膜性材料作为硬膜与瘢痕之问的物理屏障,但效果并不令人满意.抑制作为修复细胞主要成分的成纤维细胞增殖,调节胶原代谢成为当前生物学防治病理性瘢痕的热点.目的:采用定性和定量结合的方法,比较局部应用不同浓度丝裂霉素C预防椎板切除术后硬膜外粘连的效果.设计:完全随机分组,对照动物实验.单位:连云港市第二人民医院骨科材料:选用健康成年SD大鼠40只,雄性,体质量200～220 g,由南京医科大学动物实验中心提供.实验用药丝裂霉素C由日本协和发酵工业株式会社富士工厂生产,批号:425ACI,进口药品注册证号:H20020163.方法:实验于2004-06/10在南京医科大学动物实验中心及江苏大学医学院基础实验中心完成.随机将40只大鼠分为4组:丝裂霉素C高、中、低浓度组和生理盐水组,每组10只.将鼠麻醉后,切除L1椎板,形成0.2 cm×0.5 cm缺损,暴露硬脊膜.对照组以浸透生理盐水棉片,丝裂霉素C高、中、低质量浓度组以浸透质量浓度分别为0.1,0.05,0.01 g/L的丝裂霉素C棉片置于裸露的硬脊膜后方5 min.实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准.主要观察指标:手术后4周将每组麻醉后各处死4只动物,切取手术段脊柱硬脊膜外瘢痕组织,计算其中羟脯氨酸含量.其余动物在麻醉后,切取手术段脊柱包括其后侧瘢痕组织及骶棘肌,测不规则形态的瘢痕横切面面积,并计数纤维细胞数.光镜下评估各组标本硬膜外瘢痕粘连的程度.结果:大鼠40只均进入结果分析.对照组标本硬膜外瘢痕组织致密,与硬脊膜形成紧密粘连.丝裂霉素C高质量浓度组组无明显硬膜外粘连,瘢痕组织中羟脯氨酸含量、胶原组织面积及成纤维细胞计数较对照组显著减少(P＜0.05).丝裂霉素C中、低质昔浓度组瘢痕组织中羟脯氨酸含量、胶原组织面积及成纤维细胞计数较对照组有小同程度的减少,其中只有丝裂霉素C中质量浓度组成纤维细胞计数与对照组比较,差异有显著性意义(P＜0.05);丝裂霉素C中、低质量浓度组瘢痕组织与硬膜间有不连续的粘连.结论:局部应用浓度为0.1 g/L的丝裂霉素C能够有效减少硬膜外瘢痕组织增生,避免椎板切除术后硬膜外瘢痕粘连.     

小鼠骨髓内破骨细胞诱导形成的实验观察

目的：建立骨髓间充质干细胞诱导培养成为破骨细胞的培养方法并进行初步的形态观察，为破骨细胞学及与其相关疾病的发病机制的研究提供更有意义的手段。方法：采用小鼠骨髓间充质干细胞通过1，25-(OH)2D3诱导分化为破骨细胞的培养方法，并观察原代成骨细胞对该方法破骨细胞形成及其功能的影响。根据是否加原代成骨细胞，分成未加成骨细胞、加成骨细胞二组，未加成骨细胞组是骨髓间充质干细胞直接诱导培养，加成骨细胞组是骨髓间充质干细胞与原代成骨细胞共同培养。分别培养6，9，12及15d，各组细胞到培养时间后取出进行TRAP染色阳性的多核细胞计数、骨片甲苯胺蓝染色及扫描电镜观察。结果：未加成骨细胞、加成骨细胞两组的骨髓间充质干细胞经培养后均出现破骨细胞，而且随着培养时间的延长，破骨细胞及骨片吸收陷窝的数目增多。培养相同时间的未加成骨细胞、加成骨细胞两组之间的破骨细胞及骨片吸收陷窝的数目差异无显著性意义。结论：通过1,25-(OH)2D3诱导骨髓中的间充质干细胞培养破骨细胞的方法是可行的，而且骨髓间充质干细胞诱导培养成破骨细胞时加入原代成骨细胞共同培养对破骨细胞的形成和骨吸收功能并无明显促进作用。     

软骨细胞和骨髓间质干细胞混合培养构建组织工程软骨的实验研究

目的 探讨软骨细胞和骨髓间质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)混合培养对构建组织工程软骨的影响,并确定两者的最佳比例.方法 体外分离培养兔(1月龄)关节软骨细胞和BMSCs,按不同比例(软骨细胞和BMSCs的浓度比为:4:1、2:1、1:1、1:2、1:4及单纯软骨细胞)混合培养一代.以4×107/ml的细胞终浓度接种40μl于聚乳酸-羟基乙酸共聚物[poly(lactic-co-glycolic acid),PLGA:4mm×4mm×2mm),静态培养2 d,然后移至周期性压力场(压力0～200 kPa,频率:0.1 Hz,时间:8 h/d)培养3周.收获组织工程软骨行大体观察,组织切片,定量检测糖胺聚糖(glyeosaminoglycans,GAGs)含量、DNA含量及Ⅱ型胶原染色面积.结果 软骨细胞和BMSCs混合培养组与单纯软骨细胞组相比,体积较大,表面光滑,有弹性,有光泽.组织学检查显示混合培养组结构致密,细胞外基质分布更均匀,其中软骨细胞和BMSCs的浓度比为2:1组可见软骨陷窝.混合培养组的Ⅱ型胶原染色面积、GAGs含量、DNA含量高于单纯软骨细胞组,其中软骨细胞和BMSCs的浓度比为2:1组含量最高,与其他比例混合组比较,差异有统计学意义.结论 软骨细胞和BMSCs混合培养能提高组织工程软骨的质量,其中以软骨细胞和BMSCs的浓度比为2:1最佳.     

股骨近端骨肿瘤的治疗

目的：探讨股骨近端骨肿瘤的诊治方法。方法：对2002～2009年在本院诊治的41例股骨近端骨肿瘤患者的临床资料进行回顾性分析。良性肿瘤及肿瘤样病损31例,骨质破坏较轻行病灶刮除,瘤壁灭活,自体和（或）异体骨、人工骨植骨12例;病变范围较大或合并病理性骨折行病灶刮除,瘤壁灭活,自体和（或）异体骨、人工骨植骨后行内固定19例,其中带肌蒂髂骨瓣3例。内固定方法包括股骨颈病理性骨折空心加压螺纹钛钉内固定,粗隆间病理性骨折DHS、PFN内固定或倒LCP内固定。恶性骨肿瘤10例,原发性恶性肿瘤行广泛切除人工假体置换4例;转移性病灶切除,骨水泥充填,DHS或PFN内固定4例;原发恶性肿瘤髋关节离断术2例。结果：良性肿瘤及肿瘤样病损31例中2例失访,29例随访12～48个月,平均32个月,均获得满意功能恢复。1例骨巨细胞瘤局部复发后再手术。原发性恶性肿瘤6例,随访12～30个月,其中1例死亡,余未见局部复发,生活均可自理,可独立行走。转移性骨肿瘤4例,其中2例于1年内死亡。所有患者均未发生再次病理性骨折。结论：应根据股骨近端肿瘤的病理性质、病变范围选择个体化治疗,以减少局部复发,防止病理性骨折的发生及提高患者的生活质量。     

密固达治疗绝经后骨质疏松模型大鼠的观察

目的：探讨密固达对去势后绝经骨质疏松模型大鼠的治疗作用。方法：建立雌性SD大鼠去势后绝经骨质疏松模型16只,随机分为A、B两组,每组8只,A组大鼠给予密固达治疗,B组大鼠去势手术后未行治疗。另选8只正常雌性大鼠作为空白对照组（C组）。喂养12周后测定大鼠骨密度,同时检测血清中骨钙素、骨保护素和骨保护素配体的水平。结果：与B组比较,A组大鼠的骨密度显著增加（P〈0.01）,血清中骨钙素含量和骨保护素配体/骨保护素值显著降低（P〈0.01）。结论：密固达对去势大鼠的骨质疏松有良好的治疗作用,其作用可能与降低血清中骨钙素含量和骨保护素配体/骨保护素值有关。