Rb基因导入对膀胱癌细胞生长的抑制作用

由于免疫原性,鼠源性单克隆抗体在人体疾病治疗方面受到限制,运用基因重组技术,将抗体轻链、重链可变区基因连接,构建单链Fv(ScFv)基因.表达制备ScFv片段,由于其分子小,免疫原性弱,有潜在应用前景.本实验将获得的抗人肺癌单克隆抗体轻重链可变区基因,通过Linker基因序列连接并克隆至pIg20表达载体,表达制备抗人肺癌scFv融合蛋白.现报道如下.l 材料与方法1.1 抗人肺癌单克隆抗体3D_3(McAb3D_3)重链可变区基因(VH)克隆至表达载体pIg20,以SmaⅠ,XbaⅠ分别双酶切VH及pIg20质粒,以粘末端方式,将SmaⅠ-VH-Xba片段连接到pIg20载体,连接产物电穿孔法转染BL21菌,筛选鉴定.阳性子命名为pIgVH.1.2 将McAb3D_3轻链可变区基因(VL)克隆至pIgVH,以BgLⅡ、NcoⅠ分别消化中pIgVH及VL,以粘     

野生型P53基因诱导人胃腺癌MGC—803细胞凋亡的实验研究

目的 观察野生型P53基因诱导人胃腺癌MGC－803细胞凋亡的现象,探讨野生型P53基因导入抑制细胞增殖的机制。方法 构建含目的基因P53腺病毒载体（AdCMV P53),转染P53基因表达缺失的人胃腺癌细胞MGC－803。应用流式细胞仪分析细胞周期和细胞凋亡率,琼脂糖凝胶电泳图谱及脱氧核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记（TUNEL）技术检测细胞凋亡。结果 腺病毒介导的P53基因转染人胃腺癌细胞MGC－803后,流式细胞仪显示75．7％细胞生长停滞在G0／G1期,20．8％的细胞发生凋亡;琼脂糖凝胶电泳可观察到呈阶梯DNA区带图谱（DNA ladder);AdCMV P53转染组可见细胞凋亡,细胞核内有特异性的蓝黑色团块。结论 野生型P53基因通过诱导MGC－803细胞凋亡抑制细胞增殖。     

上海市599名15岁以下儿童乙型肝炎感染危险因素的研究

目的 研究影响上海市15岁以下儿童感染乙型肝炎(乙肝)病毒(HBV)的危险因素,为提高儿童乙肝免疫预防效果提供依据.方法 以2006年全国乙肝血清流行病学调查上海现场的599名1～15岁儿童为研究对象,按是否感染HBV分为研究组和对照组,进行单因素分析并拟合多因素logistic回归模型,探讨影响儿童感染HBV的危险因素.结果 全部调查对象中感染HBV的儿童共有15例,感染率为2.50%.经综合考虑单因素分析和多因素分析,母亲怀孕时HBsAg状况、乙肝疫苗接种史、出生地点是影响儿童感染HBV的危险因素(P＜0.05),OR值分别为母亲HBsAg阳性者5.338,未接种乙肝疫苗者42.118,在家出生者12.239.结论 进一步降低上海市儿童HBV感染率,免疫预防的干预重点应为外来流动孕产妇和HBsAg阳性孕产妇,并应改进乡镇级医院新生儿乙肝免疫预防条件.     

张永树运用手阳明大肠经穴经验

张永树从医40余年,在学术上形成了“养阳育阴、通调督任、灸刺并重、针药结合”的学术观点。本文就“养阳育阴”在手阳明大肠经穴的临床应用做了总结,手阳明大肠经穴具有养阳、生津、通腑的作用,临床应用时辨证准确则效如桴鼓。     

南昌市1996—1998年性病流行病学分析

目的：了解南昌市1996－1998年性病的流行病学特征。方法：收集南昌市性病专报系统1996－1998年性病疫情资料进行流行病学分析。结果：南昌市性病流行呈现以下特点：性病发病率逐年翻倍上升;男性发病率和构成比普遍高于女性,只有尖锐湿疣女性高于男性;20－40岁青壮年为高发人群;中学以下文化程度人群占88．85％;职业以个体户、无（待）业和工人占前三位;城区发病率高于城郊和农村;传播途径以非婚途径居首。提示性病病种三年平均构成比前四位依次为淋病、尖锐湿疣、非淋菌性尿道炎和梅毒,其中淋病和梅素的构成比逐年下降,尖锐湿疣和生殖器疱疹的构成比上升后持平,非淋菌性尿道炎的构成比逐年上升。结论：①提倡安全性行为,强调正确使用避孕套。②普及健康教育处方。③各级妇保医疗单位应警惕女性尖锐湿疣易成为潜伏的传染源。     

高危险人群预防艾滋病性病综合干预研究

目的探讨在娱乐服务公共场所高危人群（服务小姐）中开展预防艾滋病性病的健康教育和综合干预的方法、效果及可行性。方法调查员深入现场，采用面对面的深入访谈与咨询，免费分发宣传资料和安全套，实施外展健康教育，增设安全套自动售套机，推广使用安全套，运用调查问卷和访谈方法，评价下预效果。结果干预前后分别调查145人和106人。通过干预，服务小姐艾滋病预防知识水平有显著提高，对安全套预防艾滋病经性传播的态度和信念有明显转变。在与固定和非固定性伴侣行为中，最近1次安全套的使用率分别为63．21％和98．11％。在与非固定性伴性行为中，最近1周和最近1个月每次都用安全套的比率分别由86．21％上升为96．23％、84．83％．上升为95．28％。结论在娱乐服务场所开展预防艾滋病性病的健康教育和综合干预足可行的而且是有效的。     

高脂喂养联合链脲佐菌素注射的糖尿病大鼠模型特征

目的观察高脂喂养联合低剂量STZ注射的SpragueDawley(SD)大鼠2型糖尿病模型的代谢特征、病理学以及胰岛分子生物学变化。方法4周龄雄性SD大鼠36只随机分为三组(1)正常对照组(Control)9只,普通饲料喂养。(2)高脂组(HighFatchow,HE)9只,高脂饲料喂养,为普通饲料中添加20%脂肪(猪油和蛋黄粉各50%)和20%蔗糖。(3)糖尿病组(DM)18只。喂养4周后腹腔注射STZ(40mg/kg)。所有大鼠做灌胃葡萄糖耐量(OGTT)试验。放免法测定血清胰岛素,免疫组化染色观察胰岛β细胞的形态学特点,彩色图像分析系统测定胰岛素表达量,RT-PCR测定胰腺β细胞胰岛素mRNA表达水平。结果糖尿病大鼠空腹血糖(FBG)、胰岛素水平(FINS)显著高于Control组和HE组大鼠(P<0.01),空腹血清甘油三酯(TG)和游离脂肪酸(FFA)水平显著高于Control组(P<0.05);胰岛β细胞吸光度(A)显著低于高脂组大鼠(P<0.05),降低11.6%。胰岛素免疫反应阳性区占胰岛百分比显著低于Control组和HE组,分别下降31.9%(P<0.05)和43.1%(P<0.01)。胰岛素mRNA表达水平显著低于HE组(P<0.05)。STZ注射后48h(基线值)大鼠FBG水平的分布情况为A组(FBG<10.0mmol/L)占7/18;B组(FBG10~19.9mmol/L)占5/18;C组(FBG≥20mmol/L)占6/18。STZ注射后9d的OGTT结果与基线值相比,B组OGTT值总体变化最小,A组FBG的变异最大,达到25%。结论高脂喂养联合低剂量STZ注射的糖尿病大鼠模型模拟2型糖尿病发生的主要病理生理过程,具有高血糖、高胰岛素血症以及血脂异常等基本特征。     

氧化型低密度脂蛋白诱导U937细胞凋亡及其对p53、p21和Bcl-2表达的影响

为研究单核细胞源性泡沫细胞凋亡机制,以氧化型低密度脂蛋白诱导人髓系白血病细胞U937凋亡,观察p5 3、p2 1和Bcl- 2的表达。用流式细胞术和DNA断裂分析检测细胞凋亡;用细胞免疫荧光标记结合流式细胞术检测p5 3、p2 1和Bcl- 2蛋白表达,反转录聚合酶链反应显示p5 3、p2 1和Bcl- 2mRNA表达水平。结果表明氧化型低密度脂蛋白可致U937细胞凋亡,其作用具有浓度效应;氧化型低密度脂蛋白诱导U937细胞凋亡过程中,p5 3、p2 1mRNA和蛋白表达增加,Bcl- 2mRNA和蛋白表达减少。提示氧化型低密度脂蛋白可能通过上调p5 3、p2 1基因表达,下调Bcl- 2基因,导致U937细胞凋亡。     

免疫细胞在动脉粥样硬化中的代谢重编程现象

动脉粥样硬化是以动脉血管壁脂质沉积为特征的慢性炎症性疾病,其中固有免疫细胞和适应性免疫细胞都参与疾病进程并发挥不同作用。这些免疫细胞的代谢重编程通过调节免疫细胞表型和功能进而调控疾病的进展。文章综述了动脉粥样硬化病程相关的主要免疫细胞的代谢途径变化,并对这些免疫细胞间代谢重编程的种类和机制进行总结。     

BP人工神经网络模型在上海市感染性腹泻日发病例数预测中的应用

目的 建立基于气象因素的上海市感染性腹泻逐H发病例数BP人工神经网络预测模型。方法 收集上海市2005-2008年感染性腹泻逐日发病例数与同期气象资料包括气温、相对湿度、降雨量、气压、日照时数、风速,通过SPearman相关分析选出与感染性腹泻相关的气象因素,用主成分分析(PCA)去除气象因素间的共线性影响。利用MatLabR2012b软件的神经网络工具箱建立感染性腹泻日发病例数的BP神经网络预测模型,并对拟合效果、外推预测能力和等级预报效果进行评价。结果 SPearman相关性分析显示,日感染性腹泻与前两天的日最高气温、最低气温、平均气温、最低相对湿度、平均相对湿度呈正相关(PP<0.01)。输入PCA提取的4个气象主成分构建BP神经网络预测模型,训练和预测样本平均绝对误差、均方根误差、相关系数、决定系数分别为4.7811、6.8921、0.7918、0.8418和5.8163、7.8062、0。7202、0.8180。模型预测值对2008年实际发病数的年平均误差率为5,30%,对感染性腹泻的等级预报正确率为95.63%+H26。结论 温度和气压对感染性腹泻日发病例数影响较大。BP神经网络模型的拟合及预测误差较小,预报正确率较高,预报效果理想。