纤维粘连蛋白修饰的多孔PLGA对大鼠骨髓间充质干细胞粘附和增殖的影响

目的探讨经纤维粘连蛋白(Fn)修饰的聚乙醇酸乳酸共聚物(PLGA)对骨髓间充质干细胞(MSCs)粘附和增殖的影响。方法用密度梯度离心法和贴壁培养法相结合获得SD大鼠的骨髓间充质干细胞,培养后以不同的浓度分别接种于PLGA上。其中,预先包被纤维粘连蛋白的PLGA作为实验组,未经纤维粘连蛋白修饰的作为对照组。分别于3、6、9h和7、14、21d收获细胞,通过细胞记数法测定细胞数,反映细胞的粘附和增殖情况。并通过电镜观察细胞在材料上的形态和贴附情况。结果纤维粘连蛋白能明显促进MSCs在PLGA上的粘附和增殖:在6、9h和7、14、21d时间点上实验组与对照组相比细胞数差异均有显著意义(P<0.05和P<0.01)。电镜证实实验组细胞贴附良好,为多角或梭形;对照组细胞数少,细胞铺展差,多为圆形。结论纤维粘连蛋白能促进MSCs在高分子材料上的粘附和增殖。     

不同布局空心螺钉治疗股骨颈骨折的生物力学差异

目的探讨在采用三枚空心加压螺钉治疗股骨颈骨折时,不同空间布局的螺钉固定后生物力学性能上的差异。方法采集24具尸体股骨标本,模拟股骨颈头下型骨折,随机分成4组,每组6个标本,用三枚空心加压螺钉以4种不同的三角形布局排列固定：（1）上三角形,上1枚,下2枚;（2）下三角形,上2枚,下1枚;（3）前三角形,上下2枚偏后,中间1枚偏前;（4）后三角形,上下2枚偏前,中间1枚偏后。测定并计算各组载荷下的应变值、股骨头位移、刚度、断面张开角,并进行扭转试验和极限力学性能的测定。结果三枚空心加压螺钉采用上2枚,下1枚的三角形布局排列时,生物力学稳定性相对较好。结论采用三枚空心加压螺钉以下三角形空间布局固定比其它布局形式固定更具有生物力学优势。     

微动对人工关节无菌性松动影响的实验研究

目的 :研究一定参数的微动对骨组织生长分化的影响。方法 :用特制的骨微动室模型 ,通过动物实验分别计算无微动组( A组 ) ,微动组 ( B组 )实验中 ,长入骨微动室模型中的骨组织占所有新生组织的比例。结果 :在 A组中可见大量不成熟新生骨形成 ,B组可见少量或无新生骨组织 ,但可见大量的纤维结缔组织。 A组中 ,骨组织占新生组织的比例为 ( 4 0 .65± 8.2 5 ) %,B组为 ( 6.65±2 .3 4 ) %。结论 :一定参数的微动可以显著抑制骨组织的形成而有利于纤维组织的形成。     

髋关节三维有限元模型的构建及关节囊修复预后分析

目的 构建髋关节置换的三维有限元模型,模拟关节囊修复和术后康复活动,比较两种关节囊修复方法的生物力学差异。方法 以骨-囊-骨方式采集6个冷冻髋关节的后关节囊韧带复合体标本,用万能材料试验机测定标本的载荷-应变曲线等力学特性。采集一名志愿者骨盆及下肢薄层CT扫描数据导入Mimics软件,构建髋关节的三维模型,在CATIA软件中建立臼杯、股骨假体、关节囊的三维数字模型导入Mimics,模拟行全髋关节置换手术（THA）,装配后数据导入ABAQUS软件中,根据解剖研究、力学结果、本构方程设定关节囊属性,测量、比较屈髋过程中,解剖和传统修复关节囊的生物力学差别。结果 关节囊韧带复合体标本测试平均极限拉伸应变（39.21±5.23）%、极限拉伸强度（1.65±0.38）MPa。有限元模型应力-应变曲线与标本力学测试的结果相似,符合关节囊的力学特征,屈髋活动时解剖修复的关节囊应力分布均匀,均在极限拉伸强度范围内,传统修复关节囊应力分布不均,屈髋90°时下部关节囊的拉伸应力达到关节囊标本的拉伸强度极限。结论 有限元模型可用于动态、量化、可视化分析髋关节囊应力分布,解剖修复比传统修复更符合生物力学特点。     

脂联素通过AMPK/mTOR通路抑制H2O2诱导的大鼠髓核细胞凋亡及细胞外基质退变

目的：探讨脂联素（adiponectin,APN）对氧化应激下大鼠髓核细胞凋亡和细胞外基质（extracellular matrix,ECM）退变的保护作用及相关机制。方法：原代培养SD大鼠髓核细胞,CCK?8法检测细胞活力,以确定APN的最适保护浓度。将细胞分为对照组、H2O2组、APN+H2O2组及Compound C+APN+H2O2组,流式细胞术检测凋亡率,Western blot检测Bcl?2、Bax、Cleaved Caspase?3、基质金属蛋白酶?13（matrix metalloproteinase?13,MMP?13）及带有血小板凝血酶敏感蛋白样模体的解整链蛋白金属蛋白酶?5（a disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs?5,ADAMTS?5）等蛋白的表达,RT?PCR检测Ⅱ型胶原（collagen type Ⅱ alpha 1 chain,COL2A1）、蛋白聚糖（aggrecan,ACAN）的mRNA水平,Western blot评估5′?单磷酸腺苷活化蛋白激酶（adenosine 5′?monophosphate?activated protein kinase,AMPK）和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin,mTOR）的磷酸化水平。结果：1 μg/mL APN对200 μmol/L H2O2所致的细胞毒性起最佳拮抗作用。APN预处理显著抑制H2O2诱导的髓核细胞凋亡。相应地,Bax/Bcl?2比值及Cleaved Caspase?3 表达的增加也被APN抑制。尽管对ADAMTS?5无明显抑制作用,APN降低了H2O2诱导的MMP?13的表达。此外,H2O2对COL2A1及ACAN转录的抑制作用也被APN显著缓解。APN还促进AMPK磷酸化并抑制mTOR磷酸化,而AMPK抑制剂Compound C显著减轻了APN对mTOR磷酸化的抑制作用。APN对凋亡、分解代谢的抑制作用及其对合成代谢的促进作用也均被Compound C逆转。结论：APN通过AMPK/mTOR通路抑制H2O2诱导的大鼠髓核细胞凋亡及ECM退变。     

骨盆髋臼骨折系列研究

骨盆髋臼骨折的手术治疗是20世纪后期骨科领域的重大进展。20世纪90年代初南京医科大学一附院和苏大附一院率先在国内对骨盆髋臼骨折提出急救新概念、应用介入放射、提出骨折分型、改进手术方法、发明内固定和生物力学等方面的系列研究。自1987年来,在国内我们率先应用介入放射并提出活动性出血的造影表现为造影剂外溢,血管异常,其中,最可靠的是造影剂外溢。造影中见造影剂外溢、血管异常即应作栓塞处理。必要时行双侧髂内动脉栓塞。对骶骨骨折的治疗,虽然各种内固定发展迅速,但骶骨棒固定骶骨骨折有损伤或加重损伤骶神经的可能,不能用于     

人参皂苷Rg1对软骨细胞Ⅱ型胶原表达的影响

背景：人参是具有抗炎、抗应激、调节免疫等广泛药理学活性的中草药,其主要药理活性成分是人参皂苷,而Rg1是含量较多的活性成分。目的：探讨人参皂苷Rg1对白细胞介素1β诱导的人骨关节炎模型中软骨细胞Ⅱ型胶原及环氧合酶2mRNA表达的影响。方法：取因骨关节炎接受全膝关节置换患者的膝关节软骨进行体外培养,取第2代体外培养的软骨细胞,CCK-8检测0．001,0．01,0．1,1,10,100mg／L人参皂苷Rg1对软骨细胞增殖率的影响。再将第2代体外培养的关节软骨细胞,随机分为空白组、对照组和实验组,分别加入DMEM培养液、10μg／L白细胞介素1β,10μg／L白细胞介素1β＋0．1,1,10,100mg／L人参皂苷Rg1,培养24h后反转录PCR检测各组细胞中Ⅱ型胶原和环氧合酶2mRNA的表达。结果与结论：与对照组相比,人参皂苷Rg1质量浓度为0．001,0．01,0．1,1mg／L时促进软骨细胞的增殖作用不明显,差异无显著性意义（P〉0．05）;当人参皂苷Rg1质量浓度为10,100mg／L时,促进软骨细胞的增殖作用明显（P〈0．05）。与空白组相比,对照组的软骨细胞Ⅱ型胶原的mRNA表达明显下降,而环氧合酶2mRNA表达明显升高（P〈0．05）;与对照组相比,联合加入人参皂苷Rg1质量浓度为0．1和1mg／L时,人软骨细胞中Ⅱ型胶原和环氧合酶2mRNA表达没有明显变化（P〉0．05）;而联合加入人参皂苷Rg1质量浓度为10和100mg／L时,人软骨细胞中Ⅱ型胶原mRNA表达增加,而环氧合酶2mRNA表达降低（P〈0．05）。说明一定浓度的人参皂苷Rg1可以拮抗白细胞介素113引起的人软骨细胞中Ⅱ型胶原的mRNA表达的降低和环氧合酶2mRNA表达的升高。     

人参皂甙Rg1对大鼠关节软骨细胞凋亡的拮抗作用

目的 探讨人参皂甙Rg1对软骨细胞凋亡的影响.方法 正常大鼠关节软骨细胞分为三组:A、B组用白细胞介素1β(IL-1β)10 ng/ml作用24 h,建立软骨细胞凋亡模型;B组事先加入10 μg/ml的人参皂甙Rg1保护2h;C组作为空白对照.TUNEL法检测人参皂甙Rg1对软骨细胞凋亡的影响;Western blot检测人参皂甙Rg1对凋亡软骨细胞基质金属蛋白酶13(MMP-13)和基质金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP-1)蛋白表达的影响.结果 A、B和C组细胞凋亡率分别为(37.30±4.05)％、(10.30±1.08)％和(2.20±1.93)％,B组胞凋亡率低于A组(P＜0.05).与A组比较,B组软骨细胞TIMP-1的表达增加,MMP-13的表达降低(P＜0.05).结论 人参皂甙Rg1具有拮抗大鼠关节软骨细胞凋亡的作用.     

人工肱骨头置换治疗肱骨近端粉碎性骨折

目的探讨人工肱骨头置换治疗肱骨近端粉碎性骨折的疗效及技术要点。方法2001年1月至2004年6月，对21例肱骨近端四部分骨折患者行人工肱骨头置换术，男12例，女9例；年龄45-72岁，平均64．6岁。患者均于受伤后2周行人工肱骨头置换术，使用单极人工肱骨头假体骨水泥固定。68个国人肱骨近端骨标本，男36个，女32个；年龄41-58岁，平均47．9岁；均无骨性疾病。分别测量肱骨头后倾角和肱骨头最高点至大结节最高点的垂直距离。结果术后随访1．5-5年，平均3．9年。X线片显示，肱骨头假体位置均满意，2例术后假体近端周围即出现透亮带，但临床无松动迹象。16例患者无疼痛，4例偶感肩部疼痛，1例时常伴肩部疼痛。所有患者上肢肌力均基本正常，日常活动无困难。按Neer评分标准，优7例，良11例，可3例，优良率86％。评价为可的3例中，2例患者上举受限，经理疗和功能锻炼后症状无明显改善；1例患者肩部上举疼痛，服用非甾体抗炎药结合理疗后疼痛好转，对日常生活和睡眠无明显影响。无肩部感染、肩关节不稳、神经损伤等并发症。国人肱骨近端骨标本的肱骨头后倾角，左侧26．59°±1．36°，右侧26．85°±1．61°；肱骨头最高点至大结节最高点的垂直距离：左侧（6．63＋1．13）mm，右侧（6．80＋1．02）mm。结论应用人工肱骨头置换术治疗肱骨近端四部分骨折疗效满意。术中大结节和肩袖的重建是术后关节功能好坏的重要因素。将假体安放于恰当的位置（人工肱骨头的最高点至肱骨大结节最高点的垂直距离应为6-8mm，人工肱骨头的后倾角应在30°-35°）及适当的早期功能锻炼是手术成功的关键。     

磷酸化细胞外信号调节激酶1/2定位于成骨细胞的局部黏附时需要Src活性

目的探讨血小板源性生长因子(platelet-derived growth factor,PDGF)刺激成骨细胞,对磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(phosphorylation extracellular signal-regulated kinase1/2,pERK1/2)位置的影响。方法出生3d清洁级健康小鼠10只,雌雄不拘,体重6～9g。取小鼠颅骨,分离培养原代成骨细胞。取第6代成骨细胞,1%血清培养液培养12h后,随机分成经10μmol/L PP2处理30min组(实验组)和未处理组(对照组),每组再随机分成2个亚组:其中一组用PDGF(20ng/ml)刺激10min,另一组不用PDGF刺激,采用免疫组织化学染色检测pERK1/2分布。另取第6代成骨细胞,当细胞生长至80%融合时,用细胞刮随机分成2组,一组用10μmol/L PP2预处理30min(实验组),另一组不用PP2作用(对照组),再用20ng/ml PDGF培养12h,采用划痕愈合法检测PP2对成骨细胞在PDGF刺激下迁移能力的影响。另取第6代成骨细胞,调整细胞浓度1×106/ml,随机分成2组,分别经DMSO(对照组)和10μmol/L PP2(实验组)预处理30min,每组再随机分成2个亚组:其中一组用PDGF(20ng/ml)刺激10min,另一组不用PDGF剌激,采用Western blot检测细胞骨架蛋白内pERK1/2活性。结果免疫荧光染色结果显示,PDGF促进pERK1/2定位于成骨细胞的局部黏附和细胞核内;而PP2显著抑制了由PDGF刺激引起的pERK1/2定位于成骨细胞的局部黏附,但并不影响pERK1/2定位于细胞核内。细胞划痕愈合实验显示,PP2明显抑制了由PDGF所诱导的成骨细胞迁移。Western blot检测结果显示,PP2明显抑制了由PDGF所诱导的成骨细胞局部黏附内ERK1/2的磷酸化。结论PDGF通过激活Src活性,促进pERK1/2定位于成骨细胞的局部黏附内;PP2通过抑制pERK1/2定位于成骨细胞的局部黏附,从而抑制由PDGF所诱导的成骨细胞迁移。