兔骨髓间充质干细胞诱导分化为成骨细胞的实验研究

目的 探讨兔骨髓间充质干细胞(MSCs)体外培养、定向诱导分化为成骨细胞的途径.方法 抽取兔骨髓,以全骨髓贴壁培养法进行体外培养,贴壁细胞传代.取第3代细胞诱导培养,倒置显微镜下观察细胞形态.培养16 d后,用5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸盐(BCIP)/氯化硝基四氮唑蓝(NBT)底物显色试剂检测碱性磷酸酶(AP),茜素红染色检测钙结节.结果 全骨髓贴壁培养法可获得MSCs,原代和传代培养的MSCs具有活跃的增殖能力.诱导培养后,AP检测与钙结节染色均为强阳性.结论 兔骨髓中培养出的MSCs可以定向分化为成骨细胞,可用作骨组织工程中的种子细胞.     

急性颈髓损伤后低渗性脑病的诊治(附29例报告)

目的:探讨急性颈髓损伤后低渗性脑病的临床表现、诊断及治疗。方法:回顾性分析2003年10月～2008年10月收治的29例急性颈脊髓损伤后诊断低渗性脑病患者临床资料。结果:29例中,27例于3周内血电解质紊乱逐渐纠正,临床症状逐渐消失;1例放弃治疗,1例经抢救无效死亡。结论:急性颈髓损伤后低渗性脑病与电解质紊乱有关,临床表现无特异性症状,通过补钠、适当限水及补充胶体纠正低渗状态可取得较好的临床效果。     

不同持续时间的周期性压力对构建组织工程软骨的影响

目的 探讨在周期性压力条件下构建组织工程软骨每天加压的最佳持续时间.方法 构建自行没汁的生物反应器和往复式加压泵组成的"周期性压力场培养系统",将体外培养的第二代乳兔关节软骨细胞接种到聚乳酸-聚羟幕乙酸共聚物(PLGA)支架上,随机分成四组.第一、二、三组分别在每天持续时间为4、8、12 h的周期性压力(强度0～200 kPa,频率为0.1 Hz)下培养,第四组(对照组)为不加压的静态培养,各组培养时间均为2周.2周后肉眼人体观察,HE染色组织学观察工程软骨细胞增殖及分布;甲苯胺蓝染色法规察硫酸糖氨多糖(GAG)的分泌及分布,并用1,9.二甲基亚甲蓝法定量检测GAG的含接;采用Ⅱ型胶原免疫绀织化学法观察Ⅱ型胶原的分泌及分布,并用image-pro plus图像分析系统对Ⅱ型胶原染色面积行半定量分析.结果 在强度0～200 kPa,频率为0.1 Hz周期性压力作用下,8 h组支架-细胞复合体体积最大,表面光滑、有光泽、有弹性,支架内软骨细胞数量最多,排列最为规则,Ⅱ胶原和GAG含量也最高(P<0.01).结论 软骨细胞的新陈代谢受周期件压力持续时间的影响,在0～200 kPa、0.1 Hz频率作用下,每天持续8 h的周期性压力能更好地促进软骨细胞增殖,合成Ⅱ型胶原、GAG等细胞外基质.     

髋部手术继发髋关节感染的二期全髋关节置换

 目的 探讨应用抗生素骨水泥间隔体二期全髋关节置换治疗髋部手术继发髋关节感染的疗效。方法 从2005年1月至2010年1月应用二期全髋关节置换连续治疗髋部手术继发髋关节感染患者6例,男2例,女4例;年龄43～68岁,平均(59.7±9.2)岁。股骨颈骨折行加压螺钉固定3例,股骨头坏死骨瓣移植1例,早期股骨头坏死行中心钻孔减压及局部介入治疗各1例。一期手术彻底清创,植入抗生素(万古霉素)骨水泥间隔体,感染控制后二期植入全髋关节假体。术后定期随访,常规复查红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate,ESR)、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP),摄髋关节正侧位X线片,采用Harris髋关节评分评估髋关节功能。结果 所有患者均获得随访,随访时间24～81个月,平均46个月。5例患者在一期清创后平均14周(12～18周)行二期全髋关节置换,1例患者在一期清创后7个月行二次清创及重新植入骨水泥间隔体,12周后行二期全髋关节置换。Harris髋关节评分从术前平均(35.6±3.3)分,间隔期平均(57.8±5.4)分,提高至末次随访平均(92.3±5.7)分,差异有统计学意义。1例患者于间隔期出现下肢深静脉血栓形成及左下肺栓塞。随访期间未出现感染复发及新发感染病例。结论 对继发于髋部手术的髋关节感染,应用抗生素骨水泥间隔体行二期全髋关节置换可以获得较满意的近中期疗效。     

单根肌腱多韧带重建治疗急性第一腕掌关节脱位

目的：探讨桡侧腕长伸肌腱重建第一腕掌关节周围4束韧带治疗急性第一腕掌关节脱位的临床疗效。方法：自2008年12月至2012年10月,对4例急性第一腕掌关节脱位的患者切开复位后采用单根桡侧腕长伸肌重建关节周围4组韧带,即背侧韧带,掌侧韧带,桡背侧韧带,第一、二掌骨间韧带;其中男3例,女1例;平均年龄38．7岁（22~63岁）。术后根据X线片、JAMAR握力测试、拇指关节活动范围（rangeofmotion,ROM）、活动时疼痛视觉模拟评分（visualanaloguescale,VAS）等指标评价手术效果。结果：所有患者获随访,时间6~40个月,平均19个月。术后伤口均I级愈合。术后1、3、6个月x线片未见第一腕掌关节脱位复发,关节间隙无明显狭窄退变。JAMAR握力测试患侧恢复至健侧的60％N90％。ROM测定3例屈伸、收展活动恢复正常,1例内收受限。拇指活动时疼痛VAS评分0-1分。结论：对于急性第一腕掌关节脱位,桡侧腕长伸肌腱重建关节周围韧带可恢复关节稳定性,改善功能。     

脊柱外固定复位器在胸腰椎骨折的应用

目的　应用脊柱外固定复位器治疗胸腰椎骨折。方法　自行设计研制脊柱外固定复位器,器械由经皮椎弓根钉和支架构成。临床应用 127 例,其中屈曲压缩型骨折 37 例,爆裂骨折 81例,屈曲牵张骨折9例。结果　随访2 5~7年,平均5年2个月。127例术后椎体高度明显恢复,椎体前缘高度丧失度术前(41 .00±16. 73)%,术后(2. 50±2 .97)%;椎体后缘高度丧失度术前(8 00±10 .65)%,术后(6 .70±1 .32)%。脊柱后凸畸形角显著减小,术前(19 .00±7. 09)度,术后(6. 79±3 .78)度。81 例爆裂骨折术后椎管矢径增大,从术前( 7. 00±1. 75 ) mm 增至术后( 13. 00±3. 73) mm。术前、术后测值比较均有显著性差异(P<0 .01)。27 例神经损伤恢复,其中 15 例恢复正常,10例部分恢复,2例无恢复。115例术后恢复正常生活工作,11例能进行日常生活及轻工作,1 例日常生活困难需人照料。结论　临床应用脊柱外固定复位器治疗胸腰椎骨折获得良好疗效。     

骨形态发生蛋白对兔人工关节周围骨长入的影响

目的探讨骨形态发生蛋白(BMP)对兔人工肱骨头周围骨长入的影响。方法新西兰兔30只随机分成两组行模拟人工肱骨头置换手术。实验组假体周围放置骨形态发生蛋白30mg;对照组不作处理。分别于植入后4、8、12周每组处死5只兔子。取出肱骨标本,分别运用普通X线摄片及不脱钙骨组织切片等观察方法,比较假体周围的骨生长情况。结果假体植入后4周、8周,组织学观测实验组假体周围骨性结合率分别为(67.11±4.84)%和(70.79±6.56)%,显著高于对照组(34.61±5.74)%和(57.73±5.85)%(P<0.05)。12周时实验组骨性结合率为(74.71±6.10)%,对照组为(69.42±5.76)%(P>0.05)。结论BMP能促进骨假体界面的骨长入能力,这种作用在植入早期尤为明显。     

组织工程化软骨形成的细胞浓度选择

目的探讨兔组织工程化软骨形成的合适细胞浓度。方法分离培养兔关节软骨细胞,体外扩增后以1,2,4,6,8,10×107/ml 6种不同浓度种植到PLGA支架上。在体外培养软骨细胞支架复合物,4周终止培养,进行HE、Masson组织学染色、Ⅱ型胶原免疫组织化学染色。结果体外培养的软骨组织,与正常软骨组织有相似的组织学特性,形成软骨组织适宜细胞浓度为4×107/ml。结论体外形成兔软骨组织的适宜细胞接种浓度为4×107/ml。