排序方式: 共有61条查询结果,搜索用时 78 毫秒
41.
HBsAg转基因小鼠模型的建立及其用于基因治疗研究初探 总被引:5,自引:0,他引:5
目的构建HBsAg转基因小鼠模型,并利用其进行基因治疗研究。方法显微注射外源基因pcDNAHBsAg至FVB小鼠原核,注射胚胎移植到同期发情的假孕受体出生个体,经PCR和Southern检测获得阳性转基因小鼠。通过ELISA方法比较分析转基因小鼠经pcDNAHBsAg质粒基因免疫后抗体产生的情况。结果PCR结合Southern检测到了HBsAg阳性小鼠。基因免疫有抗体产生。结论得到的HBsAg转基因小鼠,基因免疫可诱发转基因小鼠产生抗体。 相似文献
42.
42只不渗漏SCID小鼠分别腹腔注射经冷冻、复苏的胎肝或胎肝加胎胸腺细胞,每鼠2×107活细胞,建立人胎肝细胞SCID小鼠模型Ⅰ和Ⅱ,研究人免疫系统。用人肝癌细胞(HHCC)免疫,SCID鼠出现初始免疫答应,血清人IgG平均滴度分别达到513.0±84.2ng/ml和719.7±201.6ng/ml,IgG峰值分别出现在免疫重建后10~12和10~14周,特异性抗HHCC抗体滴度分别达到1∶70.4±35.05和1∶294.4±168.52,免疫重建后7~8周龄,ABC法免疫组化染色,免疫鼠模型肝、脾中可检出标记人的CD3+、CD20+T和B淋巴细胞克隆和细胞岛。流式细胞仪检测了抗原免疫组和模型组外周血、脾脏、肝脏的人CD3+、CD4+、CD8+、CD19+、CD20+标记的淋巴细胞数,其中标记CD20+淋巴细胞平均值外周血3.12±3.03%、脾脏1.4±0.20%、肝脏2.32±1.49%。而无抗原免疫的模型组在肝脏仅有微量或检测不到人标记淋巴细胞。 相似文献
43.
金黄色葡萄球菌耐热核酸酶nuc基因的克隆和序列测定 总被引:2,自引:0,他引:2
根据已公布的金黄色葡萄球菌耐热核酸酶nuc基因的序列,设计并合成一对特异性的引物。以鼠金黄色葡萄球菌临床分离株SA.m0109的基因组DNA为模板,利用PCR技术对其耐热核酸酶nuc基因片段进行扩增,获得了预计大小的片段。将这一片段克隆到质粒载体pGEM-T中,对重组质粒pGEM-NUC进行限制内切酶分析,PCR鉴定和克隆片段的序列测定。证实了克隆片段的可靠性。 相似文献
44.
乳腺高效表达人溶菌酶转基因小鼠的制备 总被引:12,自引:0,他引:12
目的 研究自行构建的动物乳腺特异表达载体p2 0 5C3的表达特性。方法 将人溶菌酶 (hLYZ)cDNA插入p2 0 5C3载体 ,用获得的基因构件注射小鼠受精卵 ,用PCR和Southernblot对出生鼠进行基因整合检测 ,用微球菌溶解试验和Westernblot对表达产物进行鉴定。结果 共出生 136只F0 代小鼠 ,从中筛选出 4只 (1♀ 3♂ )转基因整合阳性鼠 ,其中的 1只母鼠不表达hLYZ ,1只雄鼠的 4只F1 代母鼠乳汁中hLYZ的表达量分别为 5、75、175和 2 0 0 μg ml,纯合后的 3只F3代母鼠乳汁中hLYZ的表达量分别为 5 2 6 μg ml、6 4 8μg ml和 75 0 μg ml,表达仅限于乳腺中 ,表达产物的相对分子质量与正常hLYZ相同。结论 p2 0 5C3能驱动hLYZcDNA在小鼠乳腺中特异和高效表达 ,可以用于动物乳腺生物反应器的研制。 相似文献
45.
目的 为解决SV4 0T转基因小鼠高发瘤难保种的问题 ,构建了两种含有SV4 0T不同区段的外源基因 :Rb结合域点突变的SV4 0T基因 (SV4 0T DRb)和无p5 3结合域的SV4 0T基因 (SV4 0T Dp5 3)。方法 利用分子生物学的基因克隆手段 ,将改造的SV4 0T基因片段克隆测序 ,最终将这两个改造后的基因克隆进乳腺特异性的真核表达载体p2 0 5C3中 ,运用雄原核显微注射法制备转基因小鼠。结果 利用PCR方法检测出 6只双阳性转基因 (同时检测到SV4 0T DRb和SV4 0T Dp5 3两种基因 )小鼠 ,为避免检测结果中假阳性的发生 ,应用Southern blot方法检测出 1只双阳性转基因小鼠。结论 本试验的结果证明 ,构建的两种含SV4 0T不同区段的策略是成功的 ,其建立的阳性转基因小鼠确实是弱化了SV4 0T转基因小鼠高发瘤的特性。 相似文献
47.
人化SCID小鼠对肝癌抗原的体液免疫应答 总被引:1,自引:0,他引:1
为了较真实地反应人体内免疫系统对肝癌抗原的免疫应答,我们选择了SCID小鼠作为模型。实验选择4~12周龄SCID小鼠(免疫缺陷特性稳定),用人胎肝和胸腺细胞悬液(2×107/只)经腹腔注射途径及用适量(500U/只)IL-2诱导,对其进行了免疫重建。... 相似文献
48.
49.
目的研究卵巢移植在胰腺癌转基因小鼠模型保种传代中的应用。方法通过显微手术将SV40T阳性转基因小鼠的卵巢原位移植给相同背景品系去除卵巢的正常FVB雌鼠体内。移植后与正常FVB雄鼠配种,后代以PCR检测确定阳性,统计后代发病情况。并对移植受体鼠进行卵巢的组织切片观察。结果实验中移植用供体鼠19只。成功移植给32只受体。其中有21只移植受体怀孕产子,得到后代159只,存活96只,PCR检测阳性34只,阳性率约为25.4%。结论卵巢移植可被用于转基因小鼠的传代繁殖保种。 相似文献
50.
目的评价地方株HPV16E7基因疫苗诱导的免疫反应。方法从先期构建的地方株HPV16E7基因重组质粒pGEM-T-E7经限制性核酸内切酶酶切,获得E7基因亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1(-)中,构建地方株pcDNA-E7基因疫苗,转染CHO细胞,通过IFA试验验证E7蛋白的表达。用pcDNA-E7肌注方法免疫6周龄BALB/c小鼠,同时设pcDNA空载体为阴性对照,于第1天、第15天和第43天共免疫3次,用IFA和MTT法分析基因免疫在小鼠体内诱导的免疫应答。结果pcDNA-E7免疫小鼠后能检测出特异的抗体,而原载体免疫后不能产生特异抗体;但2组刺激淋巴细胞增殖的能力差异不显著。结论地方株HPV16E7基因疫苗可诱导产生小鼠免疫反应。 相似文献