乙肝表面抗原核酸疫苗诱导小鼠产生母源抗体

目的　研究核酸疫苗激发的抗体传递给仔代的能力。方法　以编码人类乙型肝炎病毒表面抗原 (ayw亚型 )的质粒 pcDNA HBs作为疫苗 ,肌肉注射 6周龄的BALB/c雌鼠 ,三星期后加强免疫一次 ,再过两周后使其配种怀孕 ,怀孕第 19天剖腹产取出胎儿并分离孕鼠及胎儿的血清 ,作ELISA检测。结果　经ELISA检测 ,10只小鼠中有 7只产生了抗体 (IgG)并传递给胎儿 ,且母体与胎儿的抗体效价相同 ,实验组与对照组差异显著 (P <0 .0 5 )。 结论　核酸疫苗与传统疫苗一样能诱导产生母源抗体。     

人内皮抑素基因治疗卵巢癌裸鼠移植瘤的研究

目的探索人内皮抑素基因治疗人肿瘤的可行性：方法将人卵巢癌(SKOV3)瘤组织或其细胞移植于裸鼠皮下，建立成裸鼠移植瘤模型；用高保真PCR从含有人内皮抑素基因的重组质粒中扩增出与人生长激素信号肽序列融合的人内皮抑素编码区，将此基因克隆入pGEM-T载体中，经序列测定证明其序列的正确性；将此基因克隆入真核表达载体pcDNA3。经免疫荧光试验证明能在CPS-1细胞中表达。结果用重组质粒注射已形成移植瘤的裸鼠，能显著抑制移植瘤的生长；将基因注射与肿瘤移植同时进行，基因注射不仅能部分抑制移植瘤的形成，而且能抑制移植瘤的生长。结论本研究构建的分泌型表达人内皮抑素的重组质粒可以用于肿瘤的基因治疗研究。     

小鼠39个微卫星的PCR条件及其运用

目的探索小鼠基因组39个微卫星的PCR条件,评价微卫星在小鼠遗传检测中的运用.方法采用梯度法探索39个微卫星的PCR条件;选择本中心不同来源及引种时间的C57BL/6、BALB/c、DBA/2J、CBA/N、FVB/NJ、ICR共6个品系(8个组)小鼠,每组采用10只个体的鼠尾,提取DNA并混合成DNA池,用39个微卫星扩增后电泳观察、比较种系纯度.结果小鼠微卫星的PCR条件差异较大,Mg2+浓度多数在1.5 mmol/L左右,退火温度多数在59℃左右.在6个品系小鼠的39个微卫星位点中,C57BL/6、BALB/c、DBA/2J都是纯合的; 其余品系有1～3个杂合位点. BALB/c在D5Mitl68、D8Mit320、D13Mit262三个位点,DBA/2J在D14Mit205位点与数据库记录有差异.结论本研究为小鼠39个微卫星提供了候选的PCR条件,并对6个品系小鼠的微卫星概貌及微卫星的运用价值进行了探讨.     

重组TRAIL抑制7402肝癌细胞生长的实验研究

目的　重组TRAIL对BALB/c裸鼠肝癌细胞皮下移植模型的抑瘤作用。方法　建立裸鼠 740 2肝癌细胞皮下移植瘤模型 ,纯化后的质粒DNA与PEI混合后经肌肉注射进行基因转染 ,体内验证重组蛋白的抑瘤活性 ,采用原位缺如末端标记 (TUNEL)法 ,进行肿瘤组织凋亡检测。结果　肿瘤体积测定显示TRAIL对肝癌生长有明显抑制作用 ,凋亡检测表明实验组镜下有蓝紫色凋亡细胞。结论　荷瘤小鼠经肌肉注射TRAIL质粒DNA后 ,能引起肿瘤细胞的凋亡 ,有效抑制 740 2肝癌细胞在裸鼠体内的生长。     

卵母细胞核移植中去核技术的探讨

目的：了解卵母细胞进行去核手术时其去核方法的可靠性。方法：通过2步法对1756枚卵母细胞进行去核操作。结果：存活1246枚，存活率71．1％，将存活卵子进行固定、染色后观察、去核完全的卵母细胞有1070枚，去核率为85．9％，总去核率为61．0％，结论：此法去核有一定可靠性。细胞核的定位是手术成功的关键，固定针、去核针，注射针的制备是成功的必备条件。     

人B-CAM/Lu基因逆转录病毒载体的构建及其在L929细胞中的表达

目的 克隆人B-CAM/Lu基因,构建其逆转录病毒表达载体,获得稳定高表达B-CAM/Lu的L929细胞株.方法 RT-PCR技术克隆人B-CAM/Lu基因,并插入逆转录病毒载体pEGZ中,该重组逆转录病毒载体与pH456、pH460两个辅助病毒载体一起,共转染包装细胞293T,并感染L929细胞,经Zeocin筛选获得的细胞株通过RT-PCR、Western blot及间接免疫荧光鉴定细胞中B-CAM/Lu基因mRNA的转录和蛋白表达.结果 成功获得人B-CAM/Lu基因,测序正确,亚克隆至逆转录病毒载体pEGZ后,经转染筛选,获得的抗性L929细胞株通过RT-PCR和Western blot分析,检测到B-CAM/Lu mRNA的转录和目的 蛋白的表达,通过间接免疫荧光确定该蛋白定位表达在L929转基因细胞膜上.结论 成功克隆并构建了人B-CAM/Lu基因的重组逆转录病毒表达载体,获得稳定高表达B-CAM/Lu蛋白的L929细胞株,为将其作为免疫源,制备B-CAM/Lu单抗用于镰刀型红细胞病及一些肿瘤疾病的检测诊断打下了基础.     

基因打靶技术及其研究进展

简要阐述了基因打靶的概念和基本环节，系统介绍了筛选方法和基因打靶的策略，基因打靶在基因功能研究，家畜遗传改良，人类疾病动物模型的建立和基因治疗等方面有着广阔的应用前景。     

PCR技术在检测鼠金黄色葡萄球菌中的应用研究

为研究橡胶籽油对 SD大鼠胚胎发育的影响 ,将 60只妊娠 SD大鼠随机分成阴性对照组、阳性对照组和高中低剂量处理组。孕鼠于妊娠 7～ 1 6d分别灌服植物油、敌枯双和高中低剂量橡胶籽油。妊娠 0、7、1 2、1 6、2 0 d称重。妊娠 2 0 d处死剖腹取子宫 ,检查并记录着床数、吸收胎、死胎和活胎数 ;活胎鼠观测胎盘、胎仔体重、体长、尾长和外观。结果表明 :阳性对照组孕鼠体重增长明显低于阴性对照组、剂量处理组 ( P<0 .0 5 ) ,而剂量处理组和阴性对照组相比无差异 ( P>0 .0 5 ) ;活胎仔数、吸收胎数、死胎数、平均胎仔体重、体长及尾长 ,阳性对照组与阴性对照组、剂量处理组相比有显著差异 ( P<0 .0 5 ) ,而剂量处理组与阴性对照组无差异 ( P>0 .0 5 )。结果提示 ,橡胶籽油对 SD大鼠胚胎发育无明显致畸和胚胎毒性作用。     

毕格犬的心电图观察

作者记录了68只6～14月龄普通级毕格犬的9个导联心电图（清醒状态仰卧保定）。结果显示：正常毕格犬的心率为154．0±31．1次／min，均为窦性心津，但29％的毕格犬出现窦性心律不齐。P波在Ⅰ、Ⅱ导联均为直立，aVR导联中均为倒置，其它导联P波有直立、倒置、低平和双相形态；P波平均振幅以Ⅱ导联最高，为0．180±0．042mV。QRS波群在各导联形态不一，Q波出现率高；R波振幅以Ⅱ导联最高，为1．104±0、331mV。各导联的T波方向多样，与QRS波主波方向无一定关系。S－T段大多位于等电线，仅有10％偏移-0．03～0．04mV。P－R间期为0．083±0.0095，Q－T间期为0．174±0．014s。平均QRS电轴为59．5±32．6°（-45°～132°）。     

人红细胞血型糖蛋白GYPC的克隆与表达

目的克隆人红细胞血型糖蛋白C(GYPC)基因,构建GYPC重组逆转录病毒载体,以获得稳定表达GYPC的L929细胞。方法RT-PCR扩增人GYPC基因,克隆入T载体后,将GYPC双酶切亚克隆入逆转录病毒载体pEGZ,用此重组载体转染L929细胞,Zeocin筛选得到阳性克隆;用RT-PCR及流式细胞术等方法对重组载体进行鉴定。结果克隆了人GYPC基因,并获得稳定表达GYPC的L929细胞系。结论应用基因工程技术,成功构建了含人GYPC基因重组逆转录病毒载体和稳定表达人GYPC的细胞株,建立了红细胞血型抗原的异源表达系统,为血清中抗GYPC特异性抗体的检测及GYPC单克隆抗体的制备和研究奠定了基础。