甘草饮片中微生物及真菌毒素污染状况考察

摘要：目的:研究甘草饮片微生物及其真菌毒素污染状况。方法:按照中国药典2020年版进行需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数、耐热菌数、沙门菌和真菌毒素检测。结果:甘草饮片中未检出沙门菌,需氧菌、霉菌和酵母菌及耐热菌污染菌数的对数值平均分别为4.38,2.14,2.58。真菌毒素共检出10批次,检出率为90.9%,涉及黄曲霉毒素B1（AFB1）、伏马毒素B1（FB1）、伏马毒素B2（FB2）、伏马毒素B3（FB3）及赭曲霉毒素A（OTA）等5种真菌毒素。结论:甘草中微生物污染状况较为严重,易感染而产生的真菌毒素为黄曲霉毒素、伏马毒素、赭曲霉毒素,参考国外的限量值,建议暂时拟定甘草饮片中OTA不得超过20μg·kg-1,AFB1不得超过10μg·kg-1,需氧菌总数不得超过105cfu·g-1,霉菌和酵母菌总数不得超过103cfu·g-1。     

丹东近海真菌Aspergillus pseudoglaucus次级代谢产物的研究

目的 研究海洋来源真菌假灰绿曲霉Aspergillus pseudoglaucus次级代谢产物的化学成分及其抗氧化活性。方法 摇床发酵后,采用硅胶柱层析、LH20凝胶色谱和半制备HPLC等方法,对假灰绿曲霉发酵总浸膏进行分离纯化;利用核磁共振(NMR)、质谱(MS)、旋光和单晶X-ray衍射技术结合文献报道数据,确定化合物结构并对其抗氧化活性进行测定。结果 从假灰绿曲霉中共分离鉴定了10个单体化合物：ent-3β-hydroxy-8α,11-drimanediol (1)、3,4-dihydroxy-5-methoxyphthalaldehyde (2)、fomecin B (3)、3, 4-二羟基苯甲酸(4)、(3R,10S, 7E)-2,6,10-trimethyldodeca-6,11-diene-2,3,10-triol (5)、(10R,2E,6E)-3,7,11-trimethyldodeca-2,6-diene-1,10,11-triol (6)、methyl (10R,2E,6E)-10,11-dihydroxy-3,7,11- trimethyl-2,6-dodecadieoate (7)、环(酪氨酸-亮氨酸) (8)、环(苯丙氨酸-酪氨酸) (9)和环(丙氨酸-苯丙氨酸) (10)。结论 从假灰绿曲霉中分离得到化合物1~10,其中1为新化合物,2为新天然产物。化合物2和3清除DPPH自由基的IC₅₀分别为2.42 和1.86 μg/mL。     

杂色曲霉素对小鼠小脑Purkinje细胞TNF-α和TGF-β_2 mRNA表达的影响

本研究观察了杂色曲霉素(sterigmatocystin,ST)对小鼠Purkinje细胞TNF-α和TGF-β2 mRNA表达的影响。给予BALB/c小鼠一次灌胃ST(3000μg/kg),分别于灌胃后0.5、1、2、4、8和16h处死动物,用原位杂交方法观察了Purkinje细胞TNF-α和TGF-β2 mRNA的表达。TNF-α和TGF-β2mRNA在对照组和处理组各时间点的Purkinje细胞均有阳性表达。但各处理组与对照组比较,TNF-α和TGF-β2 mRNA表达显著增加(P<0.01)。上述结果说明单次ST灌胃后TNF-α和TGF-β2 mRNA在Purkinje细胞表达明显增加,TNF-α和TGF-β2在ST对脑组织的损伤过程中起着重要的作用。     

百两金皂苷A的微生物转化及其产物的细胞毒活性研究

目的利用燕麦曲霉Aspergillus avenaceus AA 3.4454对百两金皂苷A进行微生物转化,并对转化产物进行细胞毒活性研究。方法将百两金皂苷A放置燕麦曲霉液体培养基中,28℃、160 r/min条件下共培养3 d后,利用多种柱色谱分离转化产物,采用核磁共振等波谱手段鉴定结构;采用MTT法测定转化产物对肿瘤细胞系的细胞毒活性。结果从百两金皂苷A的燕麦曲霉液体发酵液中分离出3个主要转化产物,其结构分别鉴定为西克拉明皂苷元A-3β-O-{α-D-半乳吡喃糖基-(1→4)-[β-D-木吡喃糖基-(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-[β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)]-α-L-阿拉伯吡喃糖苷}(1)、西克拉明皂苷元A-3β-O-{α-D-半乳吡喃糖基-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)-[β-D-木吡喃糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)]-α-L-阿拉伯吡喃糖苷}(2)、西克拉明皂苷元A-3β-O-{β-D-木吡喃糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-[β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)]-[α-D-半乳吡喃糖基-(1→3)]-α-L-阿拉伯吡喃糖苷}(3)。结论首次利用燕麦曲霉对百两金皂苷A进行微生物转化并分离得到在糖链的不同位置增加了α-D型半乳糖的转化产物,3个转化产物均为新化合物,均具有一定的细胞毒活性,且转化产物1对大细胞肺癌细胞的细胞毒活性略优于底物。     

曲霉感染的PCR检测

由于各种原因造成的免疫抑制或免疫缺陷患者的不断增多，曲霉感染的发病率迅速上升，死亡率很高，然而其早期诊断甚为困难。聚合酶链反应（PCR）技术的问世为此提供了一个颇有前途的工具。本文就PCR检测曲霉核酸的引物设计、标本处理、扩增程序、扩增产物的分析及临床应用效果予以综述。     

曲霉感染的PCR检测

由于各种原因造成的免疫抑制或免疫缺陷患者的不断增多，曲霉感染的发病率迅速上升，死亡率很高，然而其早期诊断甚为困难。聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术的问世为此提供了一个颇有前途的工具。本文就ＰＣＲ检测曲霉核酸的引物设计、标本处理、扩增程序、扩增产物的分析及临床应用效果予以综述。     

红曲霉的抑菌活性物质与桔青霉素

综述红曲霉产生抑菌物质和桔青霉等方面的研究现状和新的进展。在红曲霉的次级代谢产物中，红曲色素、橙色素、ａｎｋａｌａｃｔｏｎｅ、ｍｏｎａｓｃｉｄｉｎＡ具有抑菌作用，而且ｍｏｎａｓｃｉｄｉｎＡ的化学结构与桔青霉素的化学结构类似。有必要对抑菌物质与桔青霉素之间的关系进行探讨研究     

四川省部分地区主粮中杂色曲霉菌及其毒素的污染调查

通过对四川省部分地区大米和小麦两种主粮中杂色曲霉菌（Ａ．ｖ）和杂色曲霉素（ＳＴ）污染调查，结果表明在大米和小麦中，Ａ．ｖ污染率分别为５．５％和１０．５％；ＳＴ污染率为５３．４％和６５．８％；ＳＴ平均含量为１５．５μｇ／ｋｇ和５８．６μｇ／ｋｇ。对不同地区和不同贮藏期粮食进行分析，Ａ．ｖ检出率越高，粮食中ＳＴ污染率和含量越高；贮藏期延长，Ａ．ｖ和ＳＴ检出率及ＳＴ含量增高。实验产毒表明所有Ａ．ｖ菌株均能产生ＳＴ，平均产毒量达７１９０．２μｇ／ｋｇ，证实Ａ．ｖ是ＳＴ形成的主要菌种     

浙江省三个区域的粮食中杂色曲霉素污染情况分析

对浙江省三个地区的２１４份粮食用抗体酶标法进行了杂色曲霉素污染量测定分析，发现杂色曲霉素平均污染量达３６６．５ｍｇ／ｋｇ，三个地区中宁波地区粮食的杂色曲霉素污染量最高，台州地区的最低。小麦的杂色曲霉素污染量最高，地区间粮食杂色曲霉素污染量差异，主要是小麦的杂色曲霉素污染量差异引起的。玉米的杂色曲霉素污染量居中，并且在三个地区中差异不明显。大米的杂色曲霉素污染量最低，在三个地区间差异也不明显。本次测定分析提示必须加强对粮食特别是小麦的杂色曲霉素污染卫生监督和管理