独活饮片中4种化学成分的含量测定

目的:用HPLC测定独活饮片中的异虎耳草素、二氢欧山芹醇醋酸酯、蛇床子素、二氢欧山芹醇当归酸酯的含量,为独活的质量控制提供依据。方法:采用资深堂CAPCELL PAK C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^-1,柱温为25℃,检测波长为330 nm。结果:异虎耳草素、二氢欧山芹醇醋酸酯、蛇床子素、二氢欧山芹醇当归酸酯对照品回归方程r和线性范围均符合要求,其线性关系良好;重复性试验中上述4种成分的RSD分别为1.87%、1.01%、1.00%、1.06%,表明重复性良好。平均回收率分别为90.94%、99.08%、100.01%、102.44%。结论:该方法敏感度、重复性较好、结果分离度高,可以应用于独活含量测定。     

蛇床子现代药理学作用及临床应用的研究进展

蛇床子是伞形科植物蛇床的干燥成熟果实，是一种传统的中药材，在古代史书中均有对其的记载，临床 上主要以外用为主，多用于治疗妇科，外科，皮肤科等疾病。 蛇床子含有多种化学成分，主要含有香豆素类，挥发 油类，糖类以及多种微量元素。 蛇床子素是蛇床子发挥药效的主要成分之一，现代药理学研究发现，蛇床子素在 心脑血管系统，中枢神经系统，内分泌系统，免疫系统等方面的疾病均有具有的治疗效果。     

蛇床子素应用于骨质疏松治疗的研究进展

骨质疏松是一种以骨量减低,骨微结构破坏,导致骨脆性增加,易发生骨折为特征的全身性骨病。骨质疏松症的发生越来越多,迫切需要研究开发更为安全有效的防治骨质疏松的药物,利用天然中草药及其制剂治疗该病已成为医药界研究热点。本文将综述近年以来应用蛇床子素进行抗骨质疏松治疗的实验研究及进展,为进一步探究临床应用蛇床子素提供相关理论依据。     

蛇床子素对人舌鳞癌Tca8113细胞凋亡和自噬的影响

目的 研究蛇床子素对人舌鳞癌Tca8113细胞增殖、凋亡和自噬的影响,并探讨其可能的作用机制。方法 体外培养Tca8113细胞,并将细胞分为不加药的对照组和分别加入40、80、120、160 μmol/L蛇床子素的实验组。用四甲基偶氮唑盐实验和集落形成实验检测蛇床子素对Tca8113细胞的增殖作用,通过Hoechst33342染色法和流式细胞仪检测蛇床子素对人舌鳞癌Tca8113细胞24 h凋亡情况,Western blot检测Bcl-2、Bax、活化的半胱氨酸蛋白酶3及LC3、P62的表达情况。结果 蛇床子素可以明显抑制Tca8113细胞增殖,且药物对细胞的抑制率呈浓度依赖性;细胞集落形成能力降低;Hoechst33342染色和流式细胞术结果显示,蛇床子素呈浓度依赖性诱导细胞死亡;Western blot结果显示,蛇床子素能上调Bax和活化的半胱氨酸蛋白酶-3蛋白表达,下调Bcl-2蛋白表达。同时增加LC3Ⅱ、P62的表达,降低LC3Ⅰ的表达。结论 蛇床子素能抑制人舌鳞癌Tca8113细胞增殖,其机制可能与促进细胞凋亡并抑制细胞自噬流、自噬途径损伤而抑制细胞自噬有关。     

蛇床子素诱导人肺腺癌细胞进入G2/M阻滞并引起凋亡性死亡

目的 探讨蛇床子素(osthole)对人肺癌细胞A549的杀伤作用及其机制。方法 将人肺癌细胞A549用不同浓度的蛇床子素治疗后,采用MTT法检测蛇床子素对A549细胞增殖的抑制作用;通过流式细胞术检测A549细胞内DNA的含量测定蛇床子素对A549细胞周期的影响、蛇床子素处理后A549细胞凋亡情况;Western blot检测蛇床子素处理后A549细胞周期相关蛋白p-Cdc2和Cyclin B1及凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达。结果 蛇床子素对A549细胞增殖的抑制效应呈剂量依赖性,50μM、100μM、150μM的蛇床子素组增殖抑制率分别为(25.4±3.2)%、(40.2±3.7)%、(63.7±4.5)%。蛇床子素对A549细胞的凋亡诱导效应也呈剂量依赖性,50μM、100μM、150μM的蛇床子素组凋亡率分别为(9.4±1.4)%、(17.3±2.5)%、(22.9±3.3)%。蛇床子素处理后A549细胞周期相关蛋白p-Cdc2、Cyclin B1及抗凋亡蛋白Bcl-2表达显著下降,Bax表达显著增高。结论 蛇床子素可诱导人肺腺癌细胞进入G2/M阻滞,并引起肿瘤细胞凋亡性死亡。     

Osthole attenuates mouse atopic dermatitis by inhibiting thymic stromal lymphopoietin production from keratinocytes

Atopic dermatitis is one of the most common skin diseases. Dysregulation of immune system and chronic inflammation were believed to be associated with atopic dermatitis. Osthole was reported to play important roles in antitumor and anti‐inflammation. However, whether osthole has effects on atopic dermatitis remains unclear. In this present study, we explored the biological role of osthole in atopic dermatitis and the molecular mechanism. Atopic dermatitis was induced by 2,4‐dinitrochlorobenzene. Pathological damage of ear was detected by H&E staining. IgE level in serum or thymic stromal lymphopoietin (TSLP) level in supernatant was detected by ELISA. Interleukin (IL)‐4 expression and IL‐13 expression in CD4⁺ T cells were detected using flow cytometry. The expression levels of mRNA or protein levels were detected by RT‐PCR or Western blot. Osthole attenuated atopic dermatitis development in mouse model. Osthole inhibits Th2 cell response, but have on influence on Th1 or Th17 cell response in the skin. In mouse model, osthole treatment significantly inhibited atopic dermatitis via directly inhibiting TLSP expression levels in keratinocytes. Osthole treatment alleviates atopic dermatitis through directly down‐regulating TSLP production from keratinocytes. Osthole may serve as a potential choice for atopic dermatitis treatment in clinic.     

蛇床子素对脑缺血/再灌注大鼠海马LTP及氨基酸含量的影响

目的研究蛇床子素对脑缺血/再灌注大鼠海马齿状回突触传递活动及海马内氨基酸含量的影响。方法 SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、蛇床子素组(25.0、12.5 mg.kg-1)和尼莫地平组(1.0 mg.kg-1),腔内线栓法制作右侧大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,缺血后2 h再灌。采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法记录大鼠脑梗死体积、Morris水迷宫法观察大鼠空间学习记忆能力、电生理学方法记录中枢突触传递长时程增强(long-term potentiation,LTP)现象、高效液相色谱法记录大鼠海马内氨基酸含量的变化。结果蛇床子素(25.0、12.5 mg.kg-1,ip)可减少大鼠脑梗死体积,剂量依赖性地缩短大鼠寻找站台的时间,增强大鼠海马齿状回高频刺激(high frequency stimulation,HFS)诱导的LTP,降低再灌后72 h内海马内谷氨酸含量,蛇床子素(25.0 mg.kg-1)对于γ-氨基丁酸产生先降低后升高的调节作用,与尼莫地平组作用结果一致。结论蛇床子素改善学习记忆障碍、增强脑缺血/再灌注大鼠海马齿状回HFS诱导的LTP的作用,与调节海马内谷氨酸、γ-氨基丁酸水平有关。     

康之健洗液质量标准研究

目的建立康之健洗液的质量标准。方法采用薄层色谱法(TLC)对处方中苦参、黄柏进行定性鉴别;采用高效液相色谱法(HPLC)测定蛇床子素含量。结果在TLC色谱中检出苦参、黄柏;蛇床子素进样量在0.24~1.44μg范围内呈良好的线性关系,r=0.999 0;平均回收率103.80%,RSD为0.37%。结论所建立的方法简便可行,重现性好,可用于康之健洗液质量控制。     

蛇床子药材特征成分谱的RP-HPLC分析

目的：采用反相高效液相色谱（RP—HPLC）法对10批不同来源蛇床子药材活性成分进行分离分析。建立评价其质量的特征成分谱。方法：采用十八烷基硅烷键合硅胶柱Diamonsil^TM C18色谱柱（150mm×4．6mm,5μm）,流动相为乙腈-10mM醋酸铵水溶液（用醋酸调节pH至4．0,体积比为50：50）;紫外检测波长320nm。结果：以安定为内标,佛手柑内酯、欧前胡素、蛇床子素的回归方程分别为Y=0．0685X-0．0522,Y=0．0204X＋0．0232,Y=0．0579X-0．1058;线性范围分别是4～100μg／mL,4～100μg／mL,10～200μg／mL;平均回收率和RSD分别为98．1％、92．5％、98．4％和4．58％、5．73％、4．51％。结论：本方法简便快速,回收率及重现性良好,适用于蛇床子药材中香豆素类化合物的优化分离及佛手柑内酯、欧前胡素和蛇床子素的定量分析,并为蛇床子药材的质量控制与道地性研究提供了简便的方法。     

蛇床子素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的 研究蛇床子素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法 利用大鼠大脑中动脉短暂阻塞 (MCAO) 造成局灶性脑缺血 (2 h) 再灌注 (24 h) 损伤模型,缺血后 1 h 舌下 iv 给予蛇床子素 5、10 mg/kg,再灌注 24 h,检测大鼠神经功能行为缺陷评分、脑水肿和脑梗死范围,测定脑组织中 Na⁺, K⁺-ATP 酶、Ca²⁺-ATP 酶的活性和髓过氧化物酶 (MPO) 的活性及用放免法测定脑组织中白细胞介素-8 (IL-8) 的量。结果 蛇床子素能改善大鼠脑缺血再灌注后神经功能行为缺陷评分,减轻脑水肿和降低脑梗死范围,增强 Na⁺, K⁺-ATP 酶和Ca²⁺-ATP 酶活性,降低脑组织中 MPO 的活性和 IL-8 的量。结论 蛇床子素对脑缺血再灌注损伤有保护作用,其机制可能与蛇床子素抑制大鼠脑缺血再灌注后炎症反应和减轻脑水肿有关。