PD-L1疫苗中引入不同免疫原性氨基酸对T细胞亚群分化的影响

为了比较内源性的3-硝基酪氨酸与非天然的4-硝基苯丙氨酸在PD-L1疫苗中的引入对T细胞亚群分化的影响，利用遗传密码扩充技术，将这两种免疫原性氨基酸分别引入到PD-L1疫苗的相同位点，获得具有3-硝基酪氨酸以及4-硝基苯丙氨酸的两种PD-L1突变体。用这两种突变体免疫小鼠，分析对小鼠脾脏T细胞亚群分化的影响。流式细胞术检测结果显示，4-硝基苯丙氨酸在PD-L1疫苗中的引入可促进Th1细胞的极化，同时降低Treg细胞的比例，3-硝基酪氨酸的引入对Th1细胞的极化无影响，同时能显著提高Treg和Th17细胞的比例。二者在PD-L1疫苗中的引入均能促进脾脏CD8⁺ T细胞的应答，其中含有4-硝基苯丙氨酸的PD-L1突变体应答效果更强。实验结果表明，与内源性的3-硝基酪氨酸在PD-L1疫苗中的引入相比，非天然的4-硝基苯丙氨酸更适合用于肿瘤疫苗的设计。     

宫颈鳞状细胞癌对DDP和DDP+5-FU的体外药敏检测及与耐药蛋白表达的关系研究

目的通过对宫颈鳞状细胞癌进行顺铂(DDP)和DDP+5-氟尿嘧啶(5-FU)体外药敏检测,比较两种化疗方案的体外有效率。同时检测其耐药蛋白P糖蛋白(P-gp)、谷胱甘肽S-转移酶-π(GST-π)、DNA拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)、胸苷酸合成酶(TS)的表达,探讨DDP和DDP+5-FU体外药敏与耐药蛋白表达的关系。方法收集35例宫颈鳞状细胞癌患者的新鲜肿瘤组织,采用三磷酸腺苷生物荧光法(ATP-TCA)对DDP和DDP+5-FU进行体外药敏检测,同时采用EnVision二步法检测宫颈鳞状细胞癌组织中耐药蛋白P-gp、GST-π、TopoⅡ、TS的表达,并分析DDP和DDP+5-FU的体外药敏与耐药蛋白P-gp、GST-π、TopoⅡ、TS表达的关系。结果 35例标本均进行药敏试验,DDP的体外有效率为37.14%,与DDP+5-FU的51.43%比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。经多因素分析发现,患者年龄、临床分期、分化程度均不为DDP、DDP+5-FU药物敏感性的影响因素(P> 0.05)。P-gp、GST-π、TopoⅡ、TS蛋白阳性表达率分别为57.14%(20/35)、51.43%(18/35)、71.43%(25/35)、57.14%(20/35)。GST-π蛋白阳性表达是宫颈鳞状细胞癌对DDP耐药的影响因素(P=0.002);TS蛋白阳性表达是宫颈鳞状细胞癌对DDP+5-FU耐药的影响因素(P=0.001)。结论 宫颈鳞状细胞癌ATP-TCA法检测DDP+5-FU与单药DDP相比,体外有效率无显著差异。GST-π、TS蛋白阳性表达可用于临床宫颈癌患者对DDP、5-FU化疗耐药的预测指标。     

精索静脉曲张对精子DNA碎片、活力、形态和体外受精结局的影响

目的:探讨精索静脉曲张对精子DNA碎片、活力、形态和体外受精结局的影响。方法:选取医院2017年1月—2019年7月收治的60例精索静脉曲张所致的男性不育患者作为观察组,另选取同期的60例行IVF治疗精液正常患者作为对照组。检测两组的精子DNA碎片率、精液量、正常精子形态率、精子浓度、圆形细胞数、前向精子活力等参数;并对精子形态学及观察组的体外受精结局进行分析。结果:观察组患者的精液量、正常精子形态率、精子浓度、圆形细胞数、前向精子活力均明显低于对照组,比较差异显著(P均<0.05);精子DNA碎片率、无光晕、小光晕、中光晕、大光晕、退化精子率均明显高于对照组,比较差异显著(P均<0.05);观察组患者的体外受精率、卵裂率明显低于同期组,比较差异显著(P均<0.05)。结论:精索静脉曲张会增加男性不育患者的精子DNA碎片率,使得精子的活力、形态发生改变,降低体外受精率及卵裂率,严重影响了患者的受精结局。     

云南省2016—2018年入托入学儿童预防接种证查验及疫苗补种情况分析

目的 分析2016—2018年云南省入托、入学儿童预防接种证查验情况,为提高入托、入学儿童疫苗接种率、补种率和加强学校传染病预防控制提供科学依据。 方法 收集本省2016—2018年的入托、入学儿童预防接种证查验、疫苗补种和督导资料,运用描述流行病学统计方法进行分析。 结果 云南省入托、入学机构和儿童接种证查验率分别为99.83%、99.44%,持证率为97.78%,补证率为91.92%,平均全程接种率为71.28%,需补种率为28.72%,平均每人有2.12剂次遗漏;免疫规划10种疫苗补种率总体为60.94%,其中,卡介苗(24.02%)补种率最低,3年来,含麻疹成分、百白破和A群流脑疫苗补种率呈降低趋势,差异有统计学意义(χ²=4 297.718、39.827、665.308;P＜0.01);3年间查验率、持证率、补证率总体呈现逐年升高的趋势(r=0.052,P=0.00 ) ;全省16个州、市之间全程接种率保山市最高,为86.68%,最低版纳州,为50.66%,红河州儿童疫苗补种率最低,仅为25.42%;持证率、补种率幼儿园高于小学,补种率小学逐年呈上升趋势,而幼儿园有下降趋势,差异均有统计学意义(P＜0.01)。 结论 云南省入托、入学儿童接种证查验工作的薄弱环节为补种率低,学校和社区卫生院应督促、追踪补种工作,尤其要做好插班生、转班生和流动儿童的补种工作。     

不孕症患者子宫内膜细胞线粒体DNA缺失研究

目的女性受孕期间子宫内膜能量代谢正常与否,直接决定受精卵的种植成功率及胚胎正常发育。本研究拟探讨子宫内膜细胞线粒体DNA(mtDNA)缺失及能量变化与不孕症发生的关系。方法收集原发性不孕症(n=30)、继发性不孕症(n=27)及对照组(n=26)的子宫内膜组织,采用巢式多聚酶链反应(PCR)检测各组子宫内膜细胞中mtDNA缺失差异;采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测各组mtDNA拷贝数变化;最后,比较各组子宫内膜组织的ATP含量差异。结果巢式PCR检测显示,原发和继发性不孕症患者子宫内膜细胞mtDNA 4 977bp缺失率分别为86.67%和78.78%,均显著高于对照组(38.46%)(P0.05);原发和继发性不孕症子宫内膜细胞mtDNA拷贝数明显增加,分别比对照组高48.49%和51.01%(P0.01),而ATP含量显著下降,分别比对照组低57.00%和61.29%(P0.01)。结论子宫内膜mtDNA缺失率增加,mtDNA拷贝数增加,引起子宫内膜能量代谢失调进而参与不孕症的发生。     

全自动测序仪PCR产物测序影响因素研究

目的对影响ABI3500xl全自动测序仪测序过程的因素进行研究,以提高测序的准确度和成功率并降低成本。方法对PCR反应体系、产物纯化方法进行优化。将Big Dye分别稀释8、16和32倍进行测序PCR反应,比较不同的Big Dye稀释倍数对PCR产物测序结果的影响;使用CENTRI-SEP柱纯化法、Big Dye Cleaning Beads磁珠法和乙醇乙酸钠EDTA法对测序PCR产物进行纯化,比较不同纯化方法对测序结果的影响。结果 Big Dye稀释8倍和16倍时,PCR反应体系的测序结果正常,而稀释32倍时测序结果出现碱基误读;3种不同的测序PCR产物纯化方法均可得到满意的测序结果。相比之下,CENTRI-SEP Kit纯化方法所需时间最短(0.5 h),但是成本较高;乙醇乙酸钠EDTA纯化方法成本最低,但耗时较长(2 h);磁珠纯化法所需时间(1 h)和成本介于CENTRI-SEP Kit法和乙醇乙酸钠EDTA法之间,但不适于高通量操作。结论 ABI3500xl全自动测序仪测序过程中,Big Dye稀释16倍时所得测序结果准确且成本较低;3种测序PCR产物纯化方法均可得到准确的测序结果 ,实际工作中应根据操作者具备的实验条件选择最适纯化方法 ,以减少测序时间和成本。     

大学女生对人类乳头瘤病毒及其疫苗认知研究现状

防癌疫苗是一个相对较新的概念,对疫苗及相关知识的认知和教育在疫苗接种实施战略中意义重大。研究发现我国大学女生对人类乳头瘤病毒(HPV)及疫苗的知晓率不高且缺乏正确的全面的认知。大学女生对HPV及其疫苗认知等相关研究在我国大陆地区较少报道,需对其进行深入全面的研究。医疗机构、学校及政府部门应对大学女生加强有关HPV及宫颈癌等知识的宣传教育。该文就大学女生对HPV及其疫苗的认知研究现状进行综述。     

肠道菌群组成对轮状病毒疫苗免疫原性的影响

轮状病毒是引起儿童腹泻病的最常见原因,接种轮状病毒疫苗是减轻疾病负担的重要方式。目前全球已经有多个国家将轮状病毒疫苗列入国家的免疫计划,但是其免疫效果有较大差异。近期的研究指出肠道菌群组成会对轮状病毒疫苗的免疫原性产生影响,现就该领域的研究进展进行综述。