治疗型HBV DNA疫苗肌注-电转染法免疫恒河猴的效果及安全性观察

为观察肌注—电转染法接种治疗型HBVDNA疫苗对恒河猴的免疫效果，对健康恒河猴采用肌注—电转染法接种治疗型HBV DNA疫苗，剂量分别为0．2mg／只、1mg／只和2mg／只；前3次给药时间间隔1个月，主要观察免疫效果；此后6次给药为每天1次，观察重复给药的安全性。结果显示肌注—电转染法接种疫苗后，不同剂量组均可有效诱导恒河猴产生HBsAg特异性抗体(抗—HBs)；重复给药未见明显的各系统毒副反应及血液学和血生化异常，血清抗核抗体(ANA)阴性。表明治疗型HBV DNA疫苗用肌注—电转染法免疫可显著增强恒河猴的免疫效果；多次重复接种该疫苗未见恒河猴的毒性反应，疫苗具有安全性。     

治疗型HBV DNA疫苗在小鼠组织中的分布和长期毒性研究

为研究治疗型HBV DNA疫苗使用的安全性，观察质粒在小鼠组织中的分布和其长期毒性，采取给小鼠肌注—电转染治疗型HBV DNA疫苗10μg和50μg后，用PCR法检测外源基因在小鼠组织的分布和存留时间；另用小鼠肌注—电转染治疗型HBV DNA疫苗30、60和120μg，每周2次，连续4周，共8次，于末次给药后48h，各组活杀1／2，留下1／2继续观察4周，进行血液学、血生化、病理组织学及抗核抗体检查。结果单次肌注—电转染疫苗后，质粒DNA主要分布于注射部位肌肉组织，可存留8周，其他组织也有散在低水平分布，但持续时间较短；未发现动物有异常表现，血液学、血生化和病理组织学检查未见异常；未观察到抗核抗体的产生和自身免疫病理损害。上述结果表明，治疗型HBV DNA疫苗安全性良好。     

HBV DNA疫苗阳离子脂质体复合物转染小鼠实验研究

目的:评价阳离子脂质体作为基因输送载体的效果及初步探讨其作用机理。方法:将二油酰基磷脂酰乙醇胺(DOPE)与1,2-二油酰基-3-三甲基氨基内烷(DOTAP)用超声法或挤压法制成阳离子脂质体多片层囊泡(MLV)或小单层囊泡(SLV)。MLV或SLV与DNA(pS2.S/pFP,1∶1)直接混合形成正负电荷比为3∶1或1∶3的阳离子脂质体/DNA复合物MLV-DNA或SLV-DNA。25只BALB/c平均小鼠分成五组:A,B,C,D,E。分别用4种阳离子脂质体/DNA复合物(A,B,D,E组)和10μg裸DNA(C组)一次性肌肉注射免疫接种小鼠。裸DNA、MLV-DNA(3∶1)和SLV-DNA(3∶1)分别与DNase I反应30 min后,1％琼脂糖凝胶110V电泳2 h分离鉴定DNA。结果:免疫接种后第2周,A组和B组血清转阳率均为40％;免疫接种后第4周,A组和B组血清转阳率均达到100％,并保持至第8周以后。免疫接种后第4周,A组血清平均抗-HBs滴度比对照的C组血清平均抗-HBs滴度高27倍(2.3706,0.9370,P<0.02)。免疫接种8周后,A组和B组小鼠血清抗-HBs水平仍呈上升趋势,平均抗体滴度分别是2.5687,1.9533。D组与E组小鼠血清未见转阳。与DNase温育30 min后,裸DNA(C组)被完全降解,而MLV-DNA(3∶1)和SLV-DNA(3∶1)中DNA基本保持完整。结论:阳离子脂质体是一种高效的非病毒基因输送介质;免疫接种后抗体持续高水平,可能是阳     

负压引流在撕脱头皮伤中的应用

本院自1995年1月至2002年11月,共收治头皮撕脱伤17例。采用自体头皮再植后弹性加压包扎及利用一次性输液器改成负压引流管,取得满意效果。现总结如下。1临床资料1.1一般资料:本文17例头皮撕脱伤患者中,13例为女性,4例男性;年龄18～42岁。其中12例为机器卷入所致,5例为撕打和刀砍伤;2例为全头皮撕脱,15例为片状或条索状头皮撕脱。同时合并有不同程度面部及其他部位损伤。上述患者创面及撕脱头皮均有不同程度污染。受伤至就诊时间1～8小时不等。1.2手术方法:本文17例患者中采用显微外科吻合双侧或单侧颞浅动静脉血管6例;11例制成全、中厚头皮…     

CpG基序对HBV DNA疫苗诱导小鼠产生抗-HBs的影响

为研究CpG基序克隆入质粒载体后对乙型肝炎病毒 (HBV)DNA疫苗诱导小鼠产生抗 HBs的影响。构建编码乙肝表面抗原中蛋白的卡那霉素抗性真核表达质粒pVAX CpGS2 S ,其中通过PCR克隆了若干个CpG基序到质粒载体中 ,按不同剂量一次性肌内注射免疫小鼠 ,ELISA法检测小鼠血清抗 HBs。结果发现与不含CpG基序的对照组相比较 ,克隆了CpG基序的实验组一次性免疫BALB/c小鼠后诱导产生的抗体效价比对照组免疫效果好 ,但两者差异不显著     

LSP抗原种属和器官特异性的研究

本文应用抗人—LSPMcAb通过ABC—免疫组织化学法和活细胞免疫吸附试验,探讨了人LSP抗原的种属和器官特异性.结果发现.人、兔、大鼠、豚鼠4种动物的肝、肾、大肠以及牛的肝、肾组织中均存在着能与抗人—LSPMcAb产生不同程度结合反应的种属非特异性和器官非特异性的抗原决定簇.本研究为进一步探讨LSP的种属和器官特异性提供了可靠的方法,同时也为应用动物LSP复制自身免疫性肝病模型提供了理论依据。     

分泌抗-LSP单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立(摘要)

应用成人肝提取的肝脏特异性膜脂蛋白(LSP)免疫BALB/c小鼠,小鼠免疫脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞在PEG1000介导下融合,采用ABC-ELISA筛选抗-LSP阳性孔,细胞融合率为305/384(79.2％),抗体阳性孔数为8/305(2.62％),经过三次克隆化后筛选出5株杂交瘤细胞系(1A3、2E5、2D7、3G8、4F1).培养上清抗体效价在1∶100～1∶     

李乃庚运用"护阳益阴"理论治疗儿科疾病临证心悟

李乃庚擅长运用"护阳益阴"理论治疗儿科疾病,认为单依"用药立足祛邪"原则不够全面,需注重"护阳益阴"以更好地扶正祛邪。临证运用"护阳益阴"理论时需审证求因,灵活应用,在临床实践中,运用"护阳益阴"理论遣方用药治疗儿科久咳、紫癜、汗症、厌食、鼻鼽等疾病均取得较好的临床疗效。附验案1则以佐证。     

37例巨大头皮血肿治疗体会

我科2003年1月-2005年1月共收治巨大头皮血肿37例,在无菌操作下,利用静脉留置针穿刺行负压引流治疗,取得满意效果.现报道如下.     

先天性心脏病患儿血清甲状旁腺素水平观察

目的探讨先天性心脏病(CHD)患儿甲状旁腺功能。方法用放射免疫法(IRMA)测定18例学龄前期CHD患儿血清甲状旁腺素(parathyrin,PTH)水平,并测定其血清Ca2 、Mg2 浓度;17例门诊体检的健康儿童作为对照。结果CHD患儿血清PTH水平(14.87±6.02ng/L)较对照组(19.68±5.76ng/L)明显降低,两者比较差异有显著性(P<0.05),CHD组中有8例(44.4%)患儿血清PTH<10ng/L,而对照组均高于10ng/L;CHD患儿血清Ca2 和Mg2 较对照组略低,但无统计学意义(P>0.05)。结论CHD患儿甲状旁腺素分泌不足,存在亚临床甲状旁腺功能低下。