单纯后路经椎弓根椎体次全切除内固定联合人工椎体置换治疗胸腰椎转移瘤

目的 探讨单纯后路经椎弓根椎体次全切除内固定联合人工椎体置换治疗胸腰椎转移瘤的临床疗效.方法 2007年1月至2010年3月,对21例胸腰椎转移瘤进行单纯后路经椎弓根椎体次全切除、人工椎体置换及内固定术.男9例,女12例;平均年龄58岁(39～77岁).病变位于胸椎16例,腰椎5例.术前VAS评分平均7.4分(5～10分);术前Frankel脊髓功能分级:C级3例,D级6例,E级12例;术前ECOG功能分级2级1例,3级18例,4级2例.结果 所有患者无术中死亡,平均手术时间3.5h(2-5h).术中出血平均2150ml(800～5000ml).1例转移瘤患者术后2周死于多器官功能衰竭,20例患者术后VAS评分平均降至3.1分(1～4.5分),1例Frankel C级没有改变,1例C级改善为D级,6例D级均改善为E级.3例患者(14.3%)于术后半年至1年复发再次手术.最后一次随访时,20例患者平均随访13个月(3-24个月),其中13例患者死于原发疾病(平均生存10个月),其余存活患者ECOG功能分级为1～3级.结论 单纯后路经椎弓根椎体次全切除内固定联合人工椎体置换术减压充分,症状改善明显,可有效纠正脊柱后凸畸形,重建脊椎前后柱稳定性,改善骨转移瘤患者的生活质量.     

RNA干扰COPS3基因抑制骨肉瘤细胞HOS增殖和迁移能力的实验研究

目的 探讨COPS3基因的表达对骨肉瘤细胞系HOS增殖和迁移能力的影响.方法 构建针对COPS3 mRNA的慢病毒表达载体(Lenti-COPS3si)和阴性对照载体(Lenti-NC),并将其感染高表达COPS3基因的人骨肉瘤细胞系HOS.实时定量PCR检测COPS3 mRNA的表达;Western blot测定COPS3的蛋白表达;噻唑蓝(MTT)比色法检测HOS细胞的增殖能力;迁移实验检测HOS细胞迁移能力的改变.结果 与空白对照组和转染Lenti-NC的阴性对照组相比,转染48h后Lenti-COPS3si组COPS3 mRNA和蛋白的表达均明显降低,转染48h后,Lenti-COPS3si组HOS细胞的增殖能力明显下降(P＜0.05).迁移实验结果显示,与空白对照组和阴性对照组相比,细胞的迁移能力下降(P＜0.05).结论 慢病毒载体Lenti-COPS3si可以特异性抑制骨肉瘤细胞系HOS中COPS3的表达,并显著降低细胞的增殖和迁移能力,此技术有望成为抑制骨肉瘤生长和转移的新途径.     

茶碱对单个核细胞IL-12分泌的影响

目的 :了解茶碱在体外对人脐带血单个核细胞 (CBMC)分泌IL 12和IL 12p4 0的影响 ,以及健康人服用茶碱后全血中IL 12及IL 12p4 0水平的变化 ,了解茶碱是否可能在抗原呈递细胞水平上参与细胞免疫的调节。方法 :30份新生儿脐带血随机分为 3组 :对照组 ,IL 12抗体组 ,茶碱组 ,分离出单个核细胞体外培养。比较每组产生IL 12和IL 12p4 0量的差异。 12名健康人随机分为两组 ,一组不服药作对照 ,另一组口服舒弗美片 (2 0 0mg) ,取全血作体外培养 ,收集上清液测IL 12及IL 12p4 0的含量。结果 :加用无水茶碱组的脐带血单个核细胞产生IL 12及IL 12p4 0水平 [(2 8.36± 5 .86 )pg·ml- 1 ,(87.91± 33.84 )pg·ml- 1 ]比对照组 [(5 6 .86± 14 .2 2 )pg·ml- 1 ,(2 13.71± 81.78)pg·ml- 1 ]显著降低 (P <0 .0 1)。服用舒弗美片 (2 0 0mg)组IL 12及IL 12p4 0水平 [(19.34± 11.0 2 )pg·ml- 1 ,(92 .2 2± 12 .94 )pg·ml- 1 ]比对照组 [(32 .39± 15 .71)pg·ml- 1 ,(2 0 4 .5 3± 2 4 .70 )pg·ml- 1 ]显著降低 (P <0 .0 1)。结论 :茶碱对CBMC及健康人血液中IL 12的分泌有抑制作用 ,可能对原始CD4 + T细胞极化有潜在调控性作用     

天丁颗粒提取工艺的实验研究

目的:寻找天丁颗粒最佳提取工艺.方法:以总黄酮苷含量和浸膏得率为指标,采用正交试验设计,考察乙醇浓度(A)、溶剂用量(B)、提取时间(C)和提取次数(D)4个因素对提取的影响.结果:因素A和因素D对浸膏得率、总黄酮含量有显著影响(P＜0.05和P＜0.01),因素B和因素C对浸膏得率和总黄酮含量无显著影响(P＞0.05).结论:最佳工艺A3B2C2D2,即用10倍量的60%乙醇浸泡1 h,提取1.5 h,第二次用8倍量的60%乙醇提取1h.     

树突状细胞与尤文肉瘤细胞融合诱导肿瘤免疫应答的体外研究

目的检测尤文肉瘤细胞A673和树突细胞(DC)融合构建的肿瘤疫苗对尤文肉瘤细胞株A673 的杀伤作用.方法应用促融合剂PEG对尤文肉瘤A673细胞和从外周血单个核细胞(PBMC)诱生的树突细胞进行融合.利用细胞因子hGM-CSF和hIL-4从 PBMC诱生DC,并对其表型进行流式细胞仪(FCM) 分析,红色荧光染料PKH-26标记A673细胞,绿色荧光染料PKH-67标记DC,应用促融合剂PEG融合后光镜及电镜观察DC细胞和融合细胞形态,FCM检测融合效率,通过同种混合淋巴细胞反应检测其免疫刺激活性.通过IFN-γ ELISA法产生细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的量,通过51Cr细胞杀伤试验检测融合细胞对A673 细胞的杀伤作用.结果 FCM检测出从PBMC 成功诱生出CD83、CD80、CD86 及HLA-DR 高表达的成熟DC.DCs/A673融合细胞的融合效率达到23%,同种混合淋巴细胞反应显示DCs/A673融合细胞有很强的免疫刺激活性.IFN-γ分泌检测显示DCs/A673融合细胞组较对照组产生CTL水平显著增高.51Cr释放法检测融合细胞体外诱导抗原特异的CTL, 融合细胞激活的CTL对肿瘤细胞系A673细胞的杀伤作用强于DC-A673混合组、DC组、A673组的CTL(P<0.05),作用较对照各组显著增强.结论 DC与A673细胞融合体外致敏自体T 淋巴细胞能生成抗原特异CTL 对尤文肉瘤细胞A673 有一定的杀伤作用.     

脊柱原发软骨肉瘤的外科治疗

目的：探讨脊柱原发软骨肉瘤的治疗方法及预后。方法：对1993年-2005年收治的16例脊柱原发软骨肉瘤进行回顾性分析。男9例，女7例；年龄19—69岁，平均44岁。累及胸椎7例，腰椎2例，胸腰椎多发1例，骶椎6例。8例伴神经损伤症状，Frankel分级C级3例，D级5例。1例骶骨巨大软骨肉瘤因去分化改变采取化疗，因化疗无效患者放弃治疗出院；其余15例均行手术治疗，根据肿瘤部位不同采取前路、后路或前后路联合肿瘤切除术，并予以相应重建方式。结果：15例手术患者术后随访1—13年，平均6．2年。1例死于术后肺栓塞。术前有神经症状者中1例Frankel C级患者术后无改变，其余7例（87．5％）术后Frankel分级均改善1个等级。2例出现去分化改变，于术后12个月内死亡。术后复发7例，占47％（7／15），复发1次者4例（4／15，27％），复发2次以上者3例（3／15，20％）。除1例去分化软骨肉瘤外，其余6例每次复发后均行手术再次切除。至今存活12例，生存时间1-19年，平均7．5年。结论：对于脊柱原发软骨肉瘤，首选广泛性切除，对难以达到广泛切除者．应尽量争取彻底切除；对复发肿瘤，仍应争取再次手术并尽可能彻底切除，可达到一定的生存时间及功能保留。     

脊柱原发性肿瘤的手术治疗策略

目的 回顾性研究对脊柱原发性肿瘤患者应用多种入路实施手术治疗的效果及并发症。探讨脊柱原发性肿瘤的手术治疗策略。方法 自1998年7月至2005年7月，共收治脊柱原发性肿瘤患者135例。其中，骨髓瘤25例，神经纤维瘤、神经鞘瘤23例，巨细胞瘤17例，血管瘤15例，淋巴瘤9例，软骨肉瘤7例，骨母细胞瘤6例，嗜酸性肉芽肿6例，尤文肉瘤5例，动脉瘤样骨囊肿4例，粒细胞肉瘤4例，骨肉瘤3例，恶性纤维组织细胞瘤3例i血管内皮瘤2例，骨纤维异样增殖症2例，骨软骨瘤2例，脊索瘤2例。病变累及颈椎13例，胸椎79例，腰椎43例。出现神经系统受累者92例，其中Frankel分级A、B级9例，C、D级83例；无神经系统受累者43例。前后路联合手术切除肿瘤18例，经后路侧前方手术13例，经前路切除肿瘤73例，经后路切除肿瘤31例。结果 135例患者中，126例（93.3％）术后疼痛得到不同程度的缓解，9例术后疼痛无明显减轻。92例术前有神经系统受累的患者中，86例术后麻痹症状得到不同程度的缓解。在随访期内未见严重并发症。11例患者术后出现脑脊液漏，经应用抗生素及抬高床尾治疗后愈合。3例应急性溃疡患者，经输血及抗酸药治疗溃疡愈合。皮下气肿3例，伤口浅表感染3例，神经根损伤2例，内固定物松脱2例，瘫痪加重1例。结论 对于脊柱巨细胞瘤或软骨肉瘤等恶性肿瘤破坏单个或相邻的两个脊椎时，应采用前后路联合手术切除肿瘤。术前根据肿瘤的Tomita或WBB分期设计手术方案，合理切除肿瘤，降低术后复发率。     

多中心成骨肉瘤的治疗

目的探讨多中心成骨肉瘤的治疗方法。方法1998年1月至2005年6月治疗多中心成骨肉瘤患者9例，男7例，女2例。9例患者的临床特征、影像学表现、病理学检查均证实多中心成骨肉瘤的诊断。其中6例患者初诊时即存在多发骨肉瘤病灶；3例初诊时为单一骨肉瘤病灶，而后分别在确诊6、8、11个月出现第二处骨肉瘤病灶。1例患者因经济原因放弃治疗，其余8例患者接受阿霉素60mg／m^2,顺铂100mg／m^2,氨甲蝶呤8-12g／m^2长春新碱1．4mg／m^2、异环磷酰胺12．5g／m^2化疗1周期。化疗后根据病灶数目、部位以及对化疗的反应等决定包括手术、化疗在内的进一步治疗方案。对病灶数目较少、病灶可广泛切除的患者，如果化疗反应好，则在化疗的基础上广泛切除肿瘤，手术原则同单发性骨肉瘤；如果全身病灶数目多、部分病灶位于中轴骨等不易广泛切除的部位，则根据病情采取适当的姑息手术。对上述化疗反应差的患者，应用三氧化二砷、紫杉醇、VP-16化疗。结果放弃治疗的1例患者于确诊5个月后死于肿瘤引起的全身衰竭，5例初诊存在多发骨肉瘤病灶的患者平均生存时间9．8个月，其中2例对化疗反应好且完成4周期以上化疗的患者平均生存时间为15个月，对化疗反应差以及未能完成化疗的3例患者平均生存时间仅为7．1个月。3例病灶不同时出现的多中心成骨肉瘤患者平均随访2年，2例带瘤生存，无肺转移；1例无瘤生存。结论多中心成骨肉瘤预后较差，经积极的化疗，能够延长患者生命，改善预后。     

骨肉瘤成骨细胞表型与临床因素的相关性研究

目的采集手术切除未经培养的骨肉瘤标本,研究肿瘤中成骨细胞的分化及其与临床因素的关系。方法观察骨肉瘤中成骨细胞相关基因表达的频率、特异性,以及骨肉瘤成骨细胞表型与生物学行为的关系。应用RT-PCR方法研究48例骨肉瘤标本的碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OC)和骨桥蛋白(ON)的mRNA转录。磷酸甘油酸激酶(PGK)被用于内参照。结果在大多数骨肉瘤标本中可以发现ALP或OC的mRNA转录(分别为93.75%,79.17%)。在所有的肉瘤检测中均可发现ON的mRNA转录。在骨肉瘤的成骨细胞亚型中可见到ALP和OC的高水平表达。肺转移瘤OC的mRNA表达弱于原发灶。肿瘤细胞有高水平OC表达的病例组有较高的生存率(P=0.045)。结论OC是目前最好的成骨细胞特异性标记物,将来可能用于检测骨肉瘤患者外周血中循环的肿瘤细胞。