肝纤维化形成过程中瘦素的表达变化

目的：观察二甲基亚硝胺(DMN)诱导实验性肝纤维化模型大鼠肝纤维化形成过程中瘦素(Leptin)的表达变化。方法：模型组大鼠腹腔注射10 mg/kg体质量的DMN生理盐水溶液,于注射后的1、2、3周末处死动物,分别采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫组化法检测瘦素mRNA和蛋白质的表达。结果：正常肝脏无瘦素蛋白表达,给药后第1周仅见少数中央静脉的内皮细胞以及极少量的窦周细胞表达阳性。第2周,则见瘦素表达明显增强,主要分布在纤维增生区域。第3周,瘦素表达进一步增强。正常肝脏组织未检测到mR- NA的表达。而注射DMN 1、2、3周,可见清晰的346 bp瘦素mRNA的条带,表达随时间逐渐增强。结论：瘦素与肝纤维化的进展有关,在肝纤维化的中晚期起重要作用。     

质谱技术研究进展

质谱技术具有高灵敏度、高精确度等特点,已广泛应用于生物学、生物医学、生物化学等学科的研究,特别是在蛋白质等生物大分子的研究中作用越来越重要。对质谱技术的研究现状及新技术的研究进展作一综述,并对未来予以展望。     

经泼尼松和干扰素治疗的慢性乙肝患者外周血T淋巴细胞亚群分析

1　材料和方法1.1　对象　慢性乙型肝炎缓解期患者 2 0例 ,男 16例 ,女 4例 ,平均年龄 41.3(2 7～ 5 8)岁 ,AL T<5 0 U/ L,口服泼尼松 30mg/ d3周 ,15 mg/ d1周 ,此后停服泼尼松 1周 ,用干扰素 - 2 α30 0万 U/ 2 d,持续 6个月。泼尼松及干扰素治疗前测定 Hbs Ag、Hbe Ag、Hbc Ab及周围血白细胞 GR结合容量、血浆皮质醇浓度 ,周围血 T淋巴细胞 CD3、CD4、CD8;疾病对照组为慢性乙型肝炎活动期患者 2 0例 ,男 18例 ,女 8例 ,平均年龄 40 .5 (2 5～ 5 9)岁 ,AL T>5 0 U/ L,用干扰素 - 2 α30 0万 U/ 2 d持续 6个月 ;正常对照组 2 0…     

标准化病人在诊断学教学中的应用探索

诊断学是一门实践性和技能性很强的学科,采用标准化病人模拟临床场景对学生进行问诊、体格检查训练,在一定程度上缓解了临床教学资源不足的矛盾;提高了学生的各项临床技能;促进了医患沟通;有助于学生早期建立以病人为中心的临床思维方法,收到了较好的教学效果。     

原发性胆汁性肝硬化和原发性硬化性胆管炎的研究现状

一、原发性胆汁性肝硬化 (PBC)PBC是一种主要以肝内中小胆管的非化脓性进行性损伤为特征的自身免疫性疾病 ,本病进展缓慢 ,早期无症状 ,晚期可出现肝硬化及肝功能衰竭。随着对该病认识的加深及线粒体抗体检测的普及 ,目前该病在我国发现越来越多。(一 )流行病学　本病的发病年龄大约在 4 0～ 5 0岁 ,男女之比为 1∶9,不发生于儿童 ,西方国家人群发病率为 30 / 10万 ,30岁以上妇女的发病率为 90 / 10万 ,近年有日益增多的趋势。在亚洲 ,日本的发病率也较高。过去一直以为此病在我国罕见 ,近年来由于对此病认识的不断加深 ,该病在我国并非罕见。我院自20 0 1年底常规开展线粒体抗体 (AMA)及亚型 (M 2 )检测以来 ,每周均可发现 1～ 3例M 2阳性病例 ,至今已有 15 0余例 ,绝大多数符合PBC诊断。国内解放军第三○二医院也报道 15 3例PBC病例 ,其他大的医院也有病例报道 ,特别是发现有许多乙型肝炎病毒感染者可能合并PBC。由于目前只有少数几家综合性医院能准确检测AMA及AMA M 2 ,因此许多PBC患者至今可能被当作普通肝病 (特别是肝炎 )而未被诊断。(二 )免疫遗...     

抗Ⅲ型前胶原肽单克隆抗体的制备及初步应用

制备出两株分泌抗ＰⅢＰ（Ⅲ型前胶原肽）单克隆抗体的杂交瘤细胞株。竞争抑制ＥＬＩＳＡ试验表明：两株单抗与ＰＣＩ（Ⅰ型前胶原）及ＣⅢ（Ⅲ型胶原）无交叉反应。Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ示两株单抗钧针对ＰⅢＰ构象决定簇。应用所制备的单抗对人肝细胞癌组织及大鼠、小鼠成纤维母细胞进行免疫定位。结果显示两种成纤维母细胞呈明显膜阳性；肝癌细胞浆内呈粗颗粒状染色，提示肝癌细胞具有合成Ⅲ型前胶原的能力。     

细菌内快速构建两种用于肝纤维化基因治疗的重组复制缺陷型腺病毒

目的 :在大肠杆菌内快速构建两种分别含有人肝细胞生长因子 (hepatic growth factor,HGF)和非分泌型人尿激酶型纤溶酶原激活剂 (urokinase- type plasm inogen activator,u PA) c DNA片段的重组复制缺陷型腺病毒。方法 :分别将人 HGF和 u PA c DNA片段与穿梭载体 p Track- CMV连接 ,线性化后与骨架载体 Ad Easy- 1在大肠杆菌 BJ5 183内同源重组获得腺病毒载体 p Ad HGF和 p Adu PA,经 2 93细胞包装后得到复制缺陷型重组腺病毒 Ad HGF和 Adu PA;将 Ad HGF和 Adu PA分别体外感染肝细胞株 L0 2 ,以 Northern印迹法和 Western印迹法检测两种病毒在肝细胞中的表达。 结果 :连接、重组后通过酶切和测序法筛选出病毒质粒 p Ad HGF和 p Adu PA;经 2 93细胞包装 ,3d后均观察到绿色荧光蛋白明显表达 ,Cs Cl梯度离心纯化最终分别获得 4× 10 1 0 efu/ m l滴度的重组病毒 Ad HGF和 6× 10 1 0 efu/ ml Adu PA;两种病毒体外感染肝细胞 3d后 ,HGF和u PA表达均明显增加。结论 :细菌内同源重组制备复制缺陷型腺病毒 ,纯化过程简单 ,重组腺病毒在肝细胞中均高效表达 ,为肝细胞移植基因治疗肝纤维化提供了新的手段     

以深部淋巴结肿大为主要特征的艾滋病一例

患者男，42岁，因腹痛、恶心、呕吐10d在当地医院诊治。胃镜检查示：浅表性胃炎。上腹部CT示：后腹膜及后纵隔多发肿大淋巴结，部分融合成团，中心液化，考虑恶性可能，不排除淋巴结结核。于2006年7月18日转入我院。体检：体温37．6℃，浅表淋巴结未及肿大，心肺听诊正常，腹平软，未及包块，中上腹有深压痛，无反跳痛，肝脾肋下未及，移动性浊音阴性，肠鸣音活跃，双下肢无水肿，病理征阴性。