葫芦素抗肿瘤作用研究进展

癌症是全球主要的公共卫生问题，中国国家癌症中心的统计数据也表明癌症以逐年提升的发病率和死亡率成为威胁人类健康的重大疾病。癌症的发生发展机制复杂，涉及多阶段、多个基因及多条信号通路的异常，常规的放化疗及新兴的靶向治疗方法是肿瘤治疗的主要方式，但由于其毒副作用和耐药性的产生严重影响了患者的生活质量和持续有效的治疗效果，因此寻找安全有效的抗癌药物是全球关注的焦点。抗肿瘤植物药紫杉醇类、长春碱类、鬼臼素类、人参皂苷和多糖等的研发与应用给肿瘤治疗带来了新的希望。葫芦素是一种来源于中药葫芦科植物的高度氧化的四环三萜类化合物，药理作用广泛且机制复杂，在葫芦素家族中，目前针对葫芦素B，D，E，I抗肿瘤作用研究最多，已有大量研究证实，葫芦素B，D，E，I在治疗消化系统、呼吸系统、生殖系统、血液系统、泌尿系统等肿瘤疾病中发挥了重要作用，能够显著抑制肿瘤细胞增殖，而且在阻滞细胞周期、诱导细胞凋亡和自噬性死亡、抑制细胞迁移和侵袭、抑制肿瘤血管生成、调节活性氧的水平、调节免疫等方面作用显著，有望开发成为抗癌新药。基于当前国内外针对葫芦素抗多种肿瘤的作用及机制研究成果，笔者对葫芦素抗肿瘤作用研究进展进行了全方面综述，以期为葫芦素类抗肿瘤药物新药研发提供参考。     

能谱智能匹配联合双低技术在CT门静脉成像中的可行性研究

目的 探索单能量成像结合自适应统计迭代重建（adaptive statistical iterative reconstruction，ASIR）及自动能谱协议选择（automatic spectral imaging mode selection，ASIS）技术在个体化降低患者门静脉造影辐射剂量、对比剂剂量中的应用价值。方法 回顾性收集华中科技大学同济医学院附属协和医院2017年1月至2017年4月120例临床需进行上腹部增强检查的受检者资料（男80例，女40例），按扫描方案分为3组，每组各40例。A组采用常规120 kVp扫描，噪声指数（NI）=10，对比剂用量为450 mgI/kg，图像采用50% ASIR重建；B、C两组采用能谱成像模式，NI=10（B组），NI=13（C组），对比剂用量均为300 mgI/kg，图像采用60 keV+50% ASIR重建。采用单因素方差分析比较3组图像中门静脉、肝实质的平均CT值及其差值、图像噪声、信噪比（SNR）及对比噪声比（CNR）。由两位高年资放射科医师对3组图像进行主观图像质量评分。记录患者的容积CT剂量指数（CTDI_vol）、剂量长度乘积（DLP）并计算有效剂量（E）。结果 B、C两组对比剂用量较A组降低了约30%。A、B、C组图像的门静脉CT值分别为168.22±17.82、209.06±20.07、211.03±25.60，B、C组与A比较，差异有统计学意义（t=-9.625、-8.680，P<0.05）。A、B、C 3组门静脉与肝实质CT差值分别为60.01±17.01、106.63±25.83、107.72±25.39，B、C组与A组比较，差异有统计学意义（t=-9.536、-9.857，P<0.05）。SNR分别为8.48±1.41、12.64±2.94、10.77±1.94，CNR分别为5.16±1.80、8.13±2.54、7.32±1.84，图像质量评分分别为（3.53±0.68）、（4.75±0.54）和（4.53±0.64）分，B、C组的SNR、CNR和图像质量评分与A组比较，差异有统计学意义（t=-8.082、-6.064、-6.050、-5.308、-8.912、-6.779，P<0.05）。A、B、C组CTDI_vol分别为（12.15±5.02）、（12.34±4.18）、（10.03±3.13）mGy，DLP分别为（348.62±155.99）、（355.56±131.07）、（287.10±92.25）mGy·cm，E分别为（5.23±2.34）、（5.33±1.97）、（4.31±1.38）mSv，相对于A、B两组，C组的CTDI_vol、DLP和E差异均有统计学意义（t=2.274、2.147、2.147、2.812、2.702、2.702，P<0.05），分别降低了19%。结论 CT门静脉成像时，选择NI=13，60 keV结合50%ASIR重建及ASIS技术可以个体化降低患者的对比剂剂量和辐射剂量，并提供满足诊断要求的图像。     

注射用血栓通中三七元素迁移的规律

目的:分析注射用血栓通中三七从原料到成品全过程的元素迁移规律,以便更好地控制成品中元素杂质。方法:采用ICP-MS法全面分析三七药材、三七总皂苷(中间体)和注射用血栓通中21种元素的含量。结果:21种元素的标准曲线相关系数r均在0. 999以上,回收率在92. 71%～107. 07%之间,RSD均在5%以内。三七药材中铝、铁含量较高,铅、砷、汞、镉、铜符合中华人民共和国药典的相关规定,三七总皂苷(中间体)和注射用血栓通中多数元素均未检出或含量极低。结论:注射用血栓通的提取工艺可有效去除三七中大部分元素,重金属及有害元素也降到较低水平。     

基于Akt/ERK探讨丹蒌片对主动脉平滑肌细胞增殖、迁移和凋亡的影响＊

目的 观察丹蒌片对同型半胱氨酸（homocysteine，Hcy）诱导的兔主动脉血管平滑肌细胞（rabbit aortic smooth muscle cell，RASMC）增殖、迁移和凋亡的影响，并探讨其与Akt及ERK信号通路的关系。方法 培养RASMC，建立Hcy诱导RASMC增殖模型，实验分为空白组、Hcy组、丹蒌片组、瑞舒伐他汀组（即可定组）、丹蒌片联合瑞舒伐他汀组（即混合组），后三组分别给于丹蒌片、瑞舒伐他汀及丹蒌片联合瑞舒伐他汀含药血清。作用24 h后，Cell Titer-Glo法测细胞增殖，Transwell法测细胞迁移，流式细胞仪Annexin V/PI双染法测细胞凋亡率，蛋白印迹法（Western blot）测信号通路相关蛋白Akt和ERK总蛋白及磷酸化蛋白表达量。结果 ①与空白组相比，Hcy组细胞增殖和迁移显著增加（P < 0.01），凋亡率显著降低（P < 0.01）；与Hcy组相比，三种含药血清组细胞增殖和迁移明显减少（P < 0.01），凋亡率明显增加（P < 0.01）；其中混合组增殖和迁移较丹蒌片组和可定组明显降低（P < 0.01），凋亡率更高（P < 0.01）；与可定组比，丹蒌片组增殖略高，但差异均无统计学意义（P > 0.05），丹蒌片组细胞迁移数明显多于可定组（P < 0.05），凋亡率明显低于可定组（P < 0.05）。②各组Akt及ERK总蛋白表达水平无明显变化（P > 0.05）；与空白组比较，Hcy组p-Akt及p-ERK蛋白表达量均显著上调（P < 0.01）；与Hcy组相比，三种含药血清组p-Akt及p-ERK蛋白表达量明显下调（P < 0.01）；其中混合组的p-Akt及p-ERK蛋白表达较丹蒌片组和可定组进一步下降（P < 0.01）；与可定组比，丹蒌片组p-Akt及p-ERK蛋白表达量增加，但差异无统计学意义（P > 0.05）。结论 丹蒌片可拮抗Hcy诱导的兔动脉血管平滑肌细胞增殖和迁移，促进其凋亡，其作用可能与上调p-Akt及p-ERK信号通路蛋白有关。     

雷火灸配合口服雷公藤多苷片治疗IgA肾病的疗效观察

目的观察雷火灸配合口服雷公藤多苷片治疗IgA肾病(IGAN)的临床疗效。方法将60例IGAN患者随机分为治疗组和对照组,每组30例。治疗组采用雷火灸配合口服雷公藤多苷片,对照组采用单纯口服雷公藤多苷片治疗。观察两组治疗前后尿红细胞相位计数、24 h尿蛋白定量、血肌酐、肾小球滤过率及血清转化生长因子-b1(TGF-β1)、巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)水平的变化情况。结果治疗组总有效率为93.3%,对照组为70.0%,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。两组治疗后尿红细胞相位计数、24 h尿蛋白定量及血清TGF-β1、MIF水平与同组治疗前比较,差异均具有统计学意义(P0.05)。治疗组治疗后血肌酐及肾小球滤过率与同组治疗前比较,差异均具有统计学意义(P0.05)。对照组治疗后血肌酐与同组治疗前比较,差异有统计学意义(P0.05)。治疗组治疗后尿红细胞相位计数、24 h尿蛋白定量、血肌酐、肾小球滤过率及血清TGF-β1、MIF水平与对照组比较,差异均具有统计学意义(P0.05)。结论雷火灸配合口服雷公藤多苷片治疗IGAN疗效确切,可明显减少尿红细胞计数及24 h尿蛋白定量,降低血肌酐水平,改善肾小球滤过率,这可能与其下调患者血清TGF-β1、MIF水平有关。     

LPS对骨肉瘤细胞迁移、侵袭及TLR4/HOTAIR通路的影响

目的探讨脂多糖(LPS)对骨肉瘤细胞迁移和侵袭的影响及其潜在的作用机制。方法将人MG-63骨肉瘤细胞随机分为2组:对照组和LPS组。LPS组细胞用10 g/ml的LPS干预24 h,对照组用生理盐水干预。ELISA检测干预后培养基中促炎因子的水平,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,Western Blot检测相关蛋白的表达。结果与对照组相比,LPS组培养基中促炎因子TNF-α、IL-1和IL-6的释放水平均显著增高(P<0.05),LPS组迁移细胞数和侵袭细胞数均显著增高(P<0.05),LPS组中E-cadherin的表达显著降低(P<0.05),而N-cadherin、α-SMA、波形蛋白、TLR4和HOTAIR的表达均显著增高(P<0.05)。结论LPS诱导的肿瘤微环境可促进骨肉瘤细胞的迁移和侵袭,其机制与TLR4/HOTAIR途径介导的EMT过程的发生有密切关系。     

miR-142-5p通过影响上皮间质转化抑制肺腺癌H1650细胞的侵袭与迁移

目的：探讨肺腺癌组织中miR-142-5p的表达及其对H1650细胞增殖、侵袭、迁移及上皮间质转化（epithelieal-mesenchymal transition，EMT）的影响及其作用机制。方法：收集2014年1月至2015年1月在河北医科大学第四医院胸外科行肿瘤切 除并经病理证实的107例肺腺癌患者的癌组织及其癌旁组织标本，以及人肺腺癌细胞系H1650、HCC827、 A549、 H1975、PC9和人 支气管上皮细胞BEAS-2B， 用qPCR实验检测肺腺癌组织及细胞中miR-142-5p的表达水平及其与患者临床特征的关系。分别用 miR-142-5p模拟物（mimics）、miR-阴性对照质粒（miR-NC）转染H1650细胞后， 用CCK8、细胞划痕愈合和Transwell侵袭实验分 别检测H1650细胞的增殖、侵袭和迁移能力。使用生物信息学工具预测miR-142-5p的靶基因，通过双荧光素酶报告基因实验验 证miR-142-5p对靶基因的调控作用，Western blotting检测细胞周期蛋白依赖性激酶5（cyclin-dependent kinase 5，CDK5）及EMT 相关蛋白的表达水平。结果：肺腺癌组织及细胞系中miR-142-5p表达水平显著低于癌旁组织及BEAS-2B细胞（均P<0.01）；107 例肺腺癌组织中， 61例（57.01%）低表达miR-142-5p，其表达水平与患者的TNM分期、淋巴结转移密切相关（均P<0.01）。转染 miR-142-5p模拟物后， H1650细胞中miR-142-5p高表达，细胞的增殖、侵袭和迁移能力显著降低（均P<0.05或P<0.01）。生物信息 学工具预测CDK5是miR-142-5p的靶基因，经双荧光素酶报告基因验证，miR-142-5p可显著降低H1650细胞中CDK5的表达水 平，显著提高E-cadherin表达，降低N-cadherin和Snail的表达水平（均P<0.01）。结论：miR-142-5p在肺腺癌组织和细胞中呈低表 达状态，其通过下调CDK5表达影响EMT抑制H1650细胞的侵袭与迁移能力。