miR-194靶向EZH2抑制甲状腺癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的:研究miR-194、EZH2对甲状腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响，并探讨其作用机制。方法:采用qRT-PCR法检测甲状腺癌组织、癌旁正常组织及甲状腺癌细胞和正常甲状腺上皮细胞中miR-194和EZH2的mRNA表达；将miR-194（转染miR-194 mimics）、miR-NC（未转染细胞）、inhibitor-NC（转染空inhibitor）、miR-194 inhibitor（转染miR-194 inhibitor）、si-EZH2（转染si-EZH2）、miR-194+Vector（miR-194 mimics和pcDNA 3.1共转染）、miR-194+EZH2（miR-194 mimics和pcDNA 3.1-EZH2共转染）均以脂质体法转染到SW579、IHH-4细胞；Western blot检测细胞中EZH2的蛋白表达；MTT法检测细胞的增殖；Transwell检测细胞的迁移和侵袭；双荧光素酶报告基因检测实验检测细胞荧光素酶活性。结果:与正常组相比，甲状腺癌组EZH2的表达显著升高，miR-194的表达显著降低；与人正常甲状腺上皮细胞相比，甲状腺癌细胞中EZH2表达显著升高，miR-194的表达显著降低，且过表达miR-194和沉默EZH2均可抑制甲状腺癌细胞增殖、迁移和侵袭。EZH2为miR-194的靶标，且EZH2可逆转过表达miR-194对甲状腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用。结论:miR-194可抑制甲状腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭，可能与靶向EZH2有关，将可为miR-194靶向治疗甲状腺癌提供依据。     

原肌球蛋白4在胃癌细胞迁移、侵袭和转移中的作用

目的:探索原肌球蛋白4（Tropomyosin4,TPM4）在胃癌细胞的迁移、侵袭和转移中的作用。方法:利用Real-time PCR、Western Blot及免疫荧光，检测原肌球蛋白4在不同胃癌细胞系及正常胃上皮细胞中的表达情况；利用免疫组化，检测原肌球蛋白4在胃癌组织及癌旁正常组织中的表达情况；利用慢病毒技术，在GC9811-P细胞中，分别转染LV-TPM4、shRNA-TPM4及对照空载体；通过Transwell和体内实验，检测胃癌细胞迁移、侵袭和转移。结果:Real-time PCR、Western Blot及免疫组化结果显示，原肌球蛋白4在胃癌细胞系及胃癌组织中的表达降低；上调原肌球蛋白4的表达后，抑制胃癌细胞的迁移、侵袭和转移；下调原肌球蛋白4的表达后，促进胃癌细胞的迁移、侵袭和转移（P<0.05）。结论:原肌球蛋白4抑制胃癌细胞的迁移、侵袭和转移。     

蒿甲醚对胃癌细胞增殖、侵袭和迁移的抑制作用研究

目的:研究蒿甲醚对胃癌细胞（AGS和SGC-7901）的增殖、侵袭以及迁移的影响并探讨其分子机制。方法:分别利用MTT、集落形成试验检测胃癌细胞的活力和生长；流式细胞技术检测胃癌细胞的凋亡率；利用细胞侵袭和划痕愈合试验检测胃癌细胞的侵袭和迁移；Western blot检测相关蛋白的表达水平。结果:蒿甲醚（0~800 μmol/L）能够浓度和时间依赖性的抑制 AGS和SGC-7901细胞的增殖（P＜0.05）。集落形成试验以及流式细胞术结果显示蒿甲醚（400 和 600 μmol/L）能够抑制AGS和SGC-7901细胞的生长以及促进细胞凋亡（P＜0.05）。细胞侵袭和划痕愈合试验发现蒿甲醚（400 和 600 μmol/L）能够抑制AGS和SGC-7901细胞的侵袭和迁移（P＜0.05）。Western blot结果显示蒿甲醚(400 和 600 μmol/L)能够增加AGS和SGC-7901细胞的cleaved caspase-3,cleaved caspase-9以及Bax的蛋白水平（P＜0.05）；同时能够抑制N-cadherin 和vimentin的蛋白表达并促进E-cadherin蛋白的表达。结论:蒿甲醚可以显著抑制胃癌细胞的增殖、侵袭以及迁移，其机制可能是与促进细胞凋亡以及抑制上皮间质转化有关。     

细胞分裂周期蛋白42在肿瘤中的作用及其分子机制研究进展

细胞分裂周期蛋白42（CDC42）是小G蛋白Rho家族的核心成员，在与GTP结合/活化状态和与GDP结合/失活状态之间循环切换，在复杂的细胞信号转导网络中，发挥开关作用，调控细胞的微丝骨架结构，与细胞的生长、迁移和黏附等重要生物学行为事件关系密切。已有研究发现，CDC42在肺癌、结直肠癌和乳腺癌等多种恶性肿瘤中明显上调表达，与肿瘤细胞的恶性演进密切相关，是肿瘤治疗的潜在靶点。围绕着CDC42在肿瘤细胞的分裂增殖、侵袭迁移，以及代谢中的作用及其分子机制，近年来取得了许多新的研究进展，是肿瘤学的热点研究领域之一，对此本文进行了系统综述。     

miR-138介导ERK和AKT对NSCLC细胞株A549增殖和迁移的作用机制研究

目的探讨miR-138介导ERK和AKT对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株A549增殖和迁移的作用机制。方法选取NSCLC细胞株A549分成Az组、Am组和Ay组,Az组A549细胞转染空载体,Am组转染miR-138-mimics,Ay组转染miR-138-inhibitions,采用RT-PCR法检测miR-138、ERK和AKT mRNA水平变化,Westernblot法检测ERK和AKT蛋白,分别用Transwell法和MTT法检测A459细胞的迁移和增殖情况,流式细胞仪检测A549细胞凋亡程度。结果 RT-PCR检测三组miR-138、ERK和AKT mRNA水平变化:Ay组ERK和AKT mRNA水平变化最高,Az组其次,Am组最低; Am组miR-138水平变化最高,Az组其次,Ay组最低(均P <0. 05)。Westernblot法检测三组ERK和AKT蛋白表达:Ay组ERK和AKT蛋白表达最高,Az组其次,Am组最低(均P <0. 05)。流式细胞仪检测三组A549细胞凋亡程度:Am组A549细胞凋亡最多,Az组其次,Ay组最低,Am组A549细胞凋亡数量较Ay组多,说明A549细胞凋亡随miR-138水平增加而上升(均P <0. 05)。Transwell检测三组A549细胞迁移能力:Ay组癌细胞迁移能力强,显微镜下细胞数量多,Am组癌细胞数量较Az组少,迁移能力较弱(均P <0. 05)。MTT检测三组A549细胞增殖能力:Ay组细胞增殖能力最高,Az组其次,Am组最弱(均P <0. 05)。结论 miR-138在NSCLC细胞株A549的迁移和增殖中发挥重要作用,其过表达可调控ERK和AKT信号,抑制细胞迁移和增殖,促进细胞凋亡。     

ADH1B对鼻咽癌细胞的增殖及迁移能力的影响

目的：鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma，NPC）已成为我国头颈肿瘤患者的主要病死因素之一，局部治疗失败和远处转移是晚期NPC患者不良预后的主要原因。大量研究证明，ADH1B是多种癌症的风险基因，本研究探讨ADH1B在鼻咽癌细胞中的表达差异以及对鼻咽癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法：利用生物信息学方法分析ADH1B在头颈鳞状细胞癌（Head and neck squamous cell carcinoma，HNSC）与正常组织中的相对表达量，应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测正常永生化鼻咽上皮细胞NP69及鼻咽癌细胞CNE-1、CNE-2、5-8F、6-10B中ADH1B的mRNA表达水平，对比两种研究结果的一致性。在此基础上建立稳转ADH1B高表达鼻咽癌细胞系，pCDH作为空载体对照。利用生长曲线实验来检验鼻咽癌细胞的增殖能力，利用划痕实验来检验鼻咽癌细胞的迁移能力。结果：生物信息学分析结果显示ADH1B在头颈鳞状细胞癌中表达量低于正常组织。qRT-PCR检测发现，ADH1B在鼻咽癌细胞CNE-1、CNE-2、5-8F、6-10B中均比NP69细胞表达低，过表达ADH1B组鼻咽癌细胞的生长曲线低于pCDH组（P<0.05），划痕愈合速度也低于正常表达组pCDH组（P<0.05）。结论：鼻咽癌细胞中ADH1B基因表达异常，明显低于正常鼻咽上皮细胞，且与生物信息学分析结果一致。ADH1B基因在鼻咽癌中高表达影响鼻咽癌细胞的增殖和迁移，这与NPC的发生发展密切相关，可能是参与调控NPC发生发展的一个重要靶标。     

低表达S100钙离子结合蛋白A6促进食管腺癌SK-GT-4细胞的增殖和迁移

目的 探讨S100钙离子结合蛋白A6（S100A6）对食管腺癌SK-GT-4细胞增殖和迁移的影响。 方法 慢病毒转染，构建稳定细胞系shNC和shS100A6，Real-time PCR检测S100A6 mRNA表达情况；倒置显微镜和MTT检测细胞的增殖能力，Transwell检测细胞的迁移能力及U0126（MER1/2的抑制剂）、LY294002（PI3K抑制剂）对细胞增殖、迁移的影响；Western blotting检测细胞中S100A6、p-ERK、p-Akt及其下游参与增殖、迁移的相关蛋白的表达情况，检测U0126、LY294002对p-ERK、p-Akt及其下游参与增殖、迁移的相关蛋白表达的影响。 结果 构建了敲低S100A6的稳定细胞系，敲低S100A6促进了细胞的增殖和迁移，p-ERK、p-Akt水平升高，细胞周期抑制蛋白p21表达量下降、细胞周期蛋白D1(cyclinD1）表达升高，间质细胞标志蛋白——波形蛋白（vimentin）、β-连环蛋白（β-catenin）表达升高；U0126处理shS100A6细胞后，对细胞的增殖无影响，抑制细胞的迁移，p-ERK、β-catenin表达下降；LY294002处理shS100A6细胞后，抑制细胞的增殖和迁移，p-Akt表达下降，p21表达量升高，cyclinD1表达量下降，β-catenin表达下降。 结论 低表达S100A6促进细胞的增殖和迁移，其可能机制是通过p-Akt调控细胞周期的进程促进细胞增殖，通过激活p-Akt/p-ERK调控β-catenin促进细胞的迁移。     

基于胸部CT分析基线骨骼肌含量对ICU患者预后的影响

目的 探讨危重患者入ICU时基线骨骼肌含量与病情危重程度及预后的相关性。方法 纳入在ICU治疗时间≥48 h的危重患者79例,测量其入ICU时胸部CT第七胸椎（T7）水平横断面胸肌面积（PMA）,分析PMA与90 d病死率、90 d内生存率、28 d内非ICU生存日数、28 d内无机械通气生存日数、ICU病死率、院内病死率等指标的相关性。结果 在校正性别、危重症营养风险评分、 Charlson共病指数、血红蛋白等因素后,基线PMA较大患者90 d病死率更低,90 d内生存率更高,28 d内非ICU生存日数更多,院内病死率也更低,与基线PMA较小患者比较差异均具有统计学意义（P均< 0.05）。结论 危重患者入ICU时的基线骨骼肌含量可用于预测病情严重程度、需要体外生命支持和ICU治疗的时间和临床预后。