药物临床前安全评价机构计算机化系统的验证

近年来计算机化系统在药物临床前安全评价中发挥越来越重要的作用,如直接或间接地用于试验数据的采集、处理、报告以及原始数据的存储等。但目前计算机化系统在我国药物临床前安全评价机构中应用尚未普及,或仅使用了计算机化系统部分模块功能。基于计算机化系统在我国药物临床前安全性评价机构的应用现状,简要介绍计算机化系统验证的GLP法规要求、计算机化系统验证的流程、计算机化系统验证状态的保持、计算机化系统运行需注意的安全事项以及电子记录和电子签名等内容,以期为药物临床前安全评价机构开展并加快计算机化系统验证提供一定参考,进一步提高我国药物临床前安全评价机构计算机化系统的使用效率并与国际接轨。     

SD大鼠使用舒泰®50和盐酸塞拉嗪麻醉比较研究

目的：比较SD大鼠经肌肉注射和腹腔注射舒泰^® 50或盐酸塞拉嗪后的麻醉效果,并比较腹腔注射后对血液学、血清生化指标及主要脏器的病理学影响。方法：以腹腔注射给予戊巴比妥钠作为对照,设置低、中、高3个剂量的舒泰^® 50或盐酸塞拉嗪肌肉注射和腹腔注射麻醉SD大鼠,观察其麻醉诱导时间、 维持时间和苏醒时间。大鼠腹腔注射舒泰^® 50(50 mg·kg^-1)和盐酸塞拉嗪(25 mg·kg^-1)麻醉后约 20 min采血并分离主要脏器,比较血液学、血清生化指标及组织病理学检查结果。结果：舒泰^® 50的2种给予方式的麻醉效果无明显差异,且诱导时间较盐酸塞拉嗪短而维持时间更长;腹腔注射舒泰^® 50或盐酸塞拉嗪对血液学、血清生化指标及组织病理学均无明显影响。结论：与盐酸塞拉嗪相比,舒泰^® 50对SD 大鼠的麻醉效果更好,可应用于大鼠的毒理学评价研究。     

BALB/c小鼠单次经口灌胃瑞格列汀的安全药理学研究

目的 评价ig瑞格列汀对小鼠自主活动及协同睡眠的影响,以发现潜在非期望药理作用。方法 将小鼠随机分为4组,包括对照组和瑞格列汀10、20、40 mg/kg组,单次ig给予溶媒或供试品,进行小鼠自主活动次数测定和协同睡眠影响分析。结果 ig给药后,各组动物均未见异常,未出现行动迟缓、活动不协调等反应。不同剂量组之间动物自主活动次数无明显差异。在接受戊巴比妥钠注射后,与对照组动物相比较,供试品给药组动物的入睡率无显著性差异。结论 ig瑞格列汀在40 mg/kg及其剂量以下对小鼠自主活动无显著性影响,与阈下催眠剂量的戊巴比妥钠合用无明显协同催眠作用。研究结果为临床进一步评价其安全性奠定了基础。     

非临床药物安全性评价中毒性病理学评价基本要素

毒性病理学是结合病理学和毒理学原理的科学,关注化合物潜在的毒性作用。毒理学研究中的组织病理学评价经毒性病理学家的长期实践已形成标准技术规程,在药物风险评估过程中起重要作用。本文针对非临床药物安全性评价中毒性病理学评价中病理学家的资质和职责、镜检前病理学家应获取的资料和信息、毒性病理学评价的一般流程、影响毒性病理学评价准确性和一致性因素等国际公认的基本要素进行了简要的阐述,同时说明按照标准技术规程进行非临床药物毒理学试验组织病理学评价可以减少诊断偏差,获得高质量的病理学报告,为病理学家、毒理学家以及监管机构的审查人员提供重要的数据和信息。     

药物发育毒性体外替代方法研究进展及组合策略

随着3Rs原则的实施,药物非临床生殖发育毒性研究中的整体动物试验面临严重挑战,体外替代研究逐步成为研究热点。生殖发育毒性周期长,涵盖面广,现有的任何一种体外方法无法全面模拟药物在体内作用的全过程,无法全面反映其对于生殖发育周期中性成熟、受精、配子发生、合子发育、出生后发育及性功能等方面的影响。形成一套完整的生殖发育毒性体外替代法评价是解决体外替代法预测结果接近体内检测结果的关键,在整合体外替代研究时,应考虑体细胞与生殖细胞,不同进化阶段的物种,多个生殖毒性周期,体内外代谢活化差异等因素。根据受试物特性、分布、用途、适用范围,其他毒理学实验及毒代动力学资料,技术水平,管理部门的要求等特点进行实验设计,通过一系列反应不同试验终点的组合实验(Integrated testing strategy,ITS)综合评定药物体外生殖发育毒性,但目前尚无最合理的组合方案。对生殖发育毒性体外试验研究进展及应用策略需考虑要点进行综述,以推动替代技术在药物非临床安全性评价中的应用。     

符合中药特点的致癌风险评价方法

如何对中药的致癌性风险作出科学而合理的评价是毒理学研究的难点之一。因中药成分和配伍的复杂性,现有的常规遗传毒性评价方法在评价中药方面有所局限。在原有试验原理基础上开发高通量筛选方法,以及利用新型生物标志物和基于新原理的试验技术已在中药毒性预测和评价领域显露一定的应用价值。本文聚焦适合大量成分毒性筛选及靶器官毒性评价的试验方法,包括改良的传统试验方法、自动化检测手段、生物标志物、三维组织培养技术和计算机毒理学的引入等,为中药致癌性评价提供借鉴思路。     

临床前毒理学研究Beagle犬中枢神经系统一致性制片方法

目的 建立临床前毒理学研究中Beagle犬中枢神经系统一致性制片方法。方法 以Beagle犬脑组织肉眼可见的解剖部位，如额极、视交叉、动眼神经、脑桥、前庭耳蜗神经为标志，对Beagle犬脑组织（腹侧面向上）进行冠状水平单侧取材。并且对Beagle犬脊髓的颅颈段（C1~C2）、胸中段（T6~T8）和腰膨大处（L4~L5）进行横切面及倾斜横向面取材，并经常规脱水、包埋、切片、HE染色处理。结果 通过这种方法制作的Beagle犬中枢神经系统组织学切片一致性高、质量好，包括了Beagle犬中枢神经系统主要结构，例如尾状核、基底核、大脑皮质（额叶、顶叶、枕叶、颞叶）、脉络丛、海马、下丘脑、延髓、中脑、脑桥、丘脑、小脑和脊髓。结论 该制片方法简单易行且一致性高，可用于临床前毒理学研究中Beagle犬中枢神经系统组织病理学检查的一致性制片。     

人脐带间充质干细胞多次输注食蟹猴安全性研究

目的 评估人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)多次输注食蟹猴的安全性,为hUC-MSCs临床应用的安全性提供支持.方法 取第5代(P5)hUC-MSCs进行形态学、三向分化及免疫表型鉴定后静脉输注食蟹猴,分为低剂量组和高剂量组,每组3只,共输注5次,1次/周.在规定的时间点测量体温、体重、血压、血常规、血生化、血清I...     

基于拟胚体面积的体外胚胎毒性模型的建立和验证

目的 利用小鼠胚胎干细胞,以拟胚体面积为分化抑制终点,构建体外胚胎毒性模型。方法 模型建立：分别用训练集10个化合物青霉素G、异烟肼、5-氟尿嘧啶、羟基脲、阿司匹林、氟康唑、地塞米松、丙戊酸钠、洛伐他汀、苯海拉明处理小鼠胚胎干细胞ES-D3和小鼠胚胎成纤维细胞NIH/3T3 5 d,用细胞活力检测试剂盒检测细胞活性,得到相应的半数抑制浓度（IC_{50 3T3}、IC_{50 D3}）;同时用10种化合物处理ES-D3细胞,用悬浮-悬滴培养的途径制备拟胚体,于第5天对拟胚体进行拍照,用 Image J 软件测量拟胚体的横截面积,并计算半数抑制细胞分化的浓度（ID₅₀）。根据得到的 IC_{50 3T3}、IC_{50 D3}、ID₅₀,用Python软件采用线性判别分析（LDA）拟合得到线性二分类判别式。模型验证：以上述同样的方法测定测试集3个化合物维生素C、布洛芬、顺铂的IC_{50 3T3}、IC_{50 D3}、ID₅₀,将其代入得到的判别式,并预测化合物的胚胎毒性。结果 通过训练集 10个化合物拟合出线性预测判别式为：判别值＝21.550 926 58×lg IC_{50 3T3}－7.600 241 83×lg IC_{50 D3}－14.007 571 16×lg ID₅₀＋6.675 517 2,判别值＜0,归为无胚胎毒性;判别值≥0,归为胚胎毒性。将测试集化合物的 IC_{50 3T3}、IC_{50 D3}、ID₅₀代入判别式,得到维生素C判别值＜0,为无胚胎毒性药物;顺铂和布洛芬判别值＞0,为胚胎毒性药物,均与文献中体内试验结果一致,预测正确。结论 基于拟胚体面积成功建立体外胚胎毒性模型。     

细胞治疗产品示踪技术研究进展

细胞治疗给许多疾病带来希望,已经成为业界关注的热点之一。尽管细胞治疗在治疗效力方面取得了快速发展,但移植细胞在体内的生物分布及机制尚不清楚。细胞体内示踪技术的不足严重影响了细胞治疗的临床转化应用。目前,多种细胞体内示踪技术已经应用于临床前研究,如染料标记追踪、放射性同位素追踪、纳米颗粒标记技术、报告基因技术、实时定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）技术、组织学技术等,但缺乏完美可靠的示踪技术。为比较不同的示踪技术,对目前研究中应用的细胞示踪技术进行综述。