健脾养正方通过抑制PKM2调控的有氧糖酵解对大肠癌HCT116细胞凋亡和EMT的影响

目的:观察健脾养正方通过下调丙酮酸激酶同工酶M2(PKM2)蛋白表达而抑制有氧糖酵解过程,从而对大肠癌HCT116细胞的促凋亡和抑制上皮间质转化(EMT)的作用机制。方法:采用噻唑蓝(MTT)比色法检测健脾养正方对大肠癌HCT116细胞增殖的影响;通过流式细胞术检测健脾养正方(2. 0,4. 0,8. 0 g·L-1)对HCT116细胞诱导凋亡的影响;通过细胞划痕和细胞侵袭实验(Transwell)观察健脾养正方(2. 0,4. 0,8. 0 g·L-1)对HCT116细胞的迁移和侵袭能力的影响;通过乳酸(LD)测试盒和葡萄糖测定试剂盒分别检测健脾养正方(2. 0,4. 0,8. 0 g·L-1)对HCT116细胞糖酵解代谢的影响;通过蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组细胞凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)和EMT相关蛋白上皮型钙黏蛋白(E-cadherin),神经型钙黏蛋白(N-cadherin),波形蛋白(Vimentin)及糖酵解关键蛋白PKM2的表达;结果:MTT比色法显示,与空白组比较,健脾养正方作用HCT116细胞48 h,随着药物浓度增加,健脾养正方对HCT116细胞增殖抑制效应也增加,且在质量浓度为4. 0 g·L-1时,HCT116细胞抑制率在53. 87%左右,从而选取健脾养正方2. 0,4. 0,8. 0 g·L-1作为低、中、高剂量组进行研究;细胞流式结果显示,与空白组比较,健脾养正方低、中、高剂量组均明显诱导HCT116细胞凋亡(P0. 05),且随给药浓度增加,诱导细胞凋亡作用更明显(P0. 05);细胞划痕和Transwell显示,与空白组比较,健脾养正方低、中、高剂量组均具有抑制HCT116细胞迁移和侵袭作用(P0. 05),随给药浓度增加,作用更明显(P0. 05);乳酸和葡萄糖的测定显示,与空白组比较,随给药浓度增加,健脾养正方低、中、高剂量组细胞产生的乳酸量逐渐减少(P0. 05),葡萄糖利用量亦逐渐降低(P0. 05);Western blot显示,与空白组比较,健脾养正方低、中、高剂量组E-cadherin,Bax蛋白表达量上调(P0. 05),N-cadherin,Vimentin,Bcl-2及PKM2蛋白表达量下调(P0. 05)。结论:健脾养正方可有效诱导大肠癌HCT116细胞凋亡及抑制EMT,其机制可能与其通过下调PKM2蛋白表达而抑制HCT116细胞的有氧糖酵解途径有关。     

肠道菌群与亚健康状态关系的研究进展

亚健康状态是从健康到疾病的过渡状态,处于亚健康状态者多伴有消化道症状,在此过程中,很可能是肠道内某些特殊菌群的异常变化促使疾病的发生。近年来,国内外已有开展关于亚健康状态与肠道菌群关联的研究。本文从肠道菌群与亚健康状态的机制、消化道微生态调节剂在改善亚健康状态中的运用等方面进行综述,总结近年来的研究进展及热点,为亚健康状态的菌群治疗、靶点研究奠定基础。     

β-细辛醚对胃癌裸鼠上皮间质转化的影响

目的观察β-细辛醚对人胃癌MGC-803细胞BALB/c裸鼠皮下移植瘤上皮间质转化(epithelialmesenchymal transition,EMT)的影响并探讨其分子机制。方法将胃癌MGC-803细胞接种于裸鼠皮下制备移植瘤模型。随机分为阴性对照组(模型组)、阳性对照组(5-FU组,25 mg/kg)、β-细辛醚高剂量组(100mg/kg)、低剂量组(50 mg/kg),每组8只,各组灌胃给药,每日1次,连续用药10日。干预结束后处死小鼠,计算抑瘤率;通过实时定量PCR及Western Blot法检测移植瘤中EMT上皮型标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)、间质型标志物N-钙黏蛋白(N-cadherin)、转录因子Snail以及磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol3-kinase,PI3K)、磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(phosphorylation of phosphatidylinositol 3-kinase,p-PI3K)、丝氨酸-苏氨酸激酶(serine/threonine kinase,AKT)、磷酸化丝氨酸-苏氨酸激酶(phosphorylation of serine/threonine kinase,p-AKT)的表达。结果与模型组比较,5-FU组、β-细辛醚高、低剂量组第7~11日移植瘤体积明显缩小(P0.05),N-cadherin、Snail、p-AKT、p-PI3K蛋白及m RNA表达降低(P0.05),E-cadherin蛋白及m RNA表达升高(P0.05)。结论β-细辛醚对胃癌细胞增殖能力有抑制作用,其机制可能与下调胃癌细胞的PI3K/AKT信号通路,抑制胃癌细胞EMT有关。     

益气化痰祛瘀法对慢性阻塞性肺疾病气道重构及血管内皮生长因子影响的研究

慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)属"本虚标实"之证,气虚为"本",痰饮、瘀血为"标",气道重构是COPD的病理关键,而血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)是COPD气道重构发生、发展的重要因素,通过就益气化痰祛瘀法对COPD气道重构及VEGF影响的研究进行论述,为COPD的防治提供新的治疗思路。     

特发性矮小患儿生长激素受体基因突变检测

对特发性矮小症(ISS)患儿生长激素受体(GHR)基因进行PCR-SSCP及DNA测序,发现1例ISS患儿外显子2上编码GHR信号肽的第16密码子发生纯合子AGT-GGT碱基转换,提示ISS患儿存在GHR基因Ser16Gly新的点突变.并发现中国人群GHR基因存在Arg43Gln多态性.     

心脏侧群细胞的研究进展

研究证实心脏中有干细胞的存在,并分离出一组特异的亚细胞群,称为"侧群"细胞。该细胞群具有增殖、分化为心肌细胞的能力。本文对心脏侧群细胞的分选、表面标记、功能及其分子调节作一综述。     

人工合成大麻素HU210对啮齿类动物空间学习记忆的影响

人工合成大麻素HU210影响啮齿类动物在Morris水迷宫实验中的表现,使动物的逃逸潜伏期增长。目前对这一现象的解释是：适当剂量的HU210对实验动物的活动能力和应激水平并没有显著影响,而是通过受体介导机制,作用于大麻一型受体,影响海马区神经元的放电活动以及海马区的突触可塑性,进而影响了动物的空间学习记忆能力。这些研究结果有助于进一步了解学习记忆的发生机理及其强化机制。     

基于结构-过程-结果模型构建结肠镜检查患者护理敏感性质量指标体系

目的 构建结肠镜检查患者护理敏感性质量指标,为结肠镜检查护理质量评价及管理提供参考依据。方法 参考结构-过程-结果模型理论为框架依据,采用循证方法、Delphi法及层次分析法构建结肠镜检查护理敏感性质量指标体系及计算各级指标权重。结果 2轮Delphi专家函询问卷有效回收率分别为89%、92%,专家权威系数为0.890、0.904,专家协调系数为0.160、0.299(P<0.001),指标体系一致性检验达到标准（CR<0.1）。最终指标体系包含一级指标3项,二级指标6项,三级指标20项。结论结肠镜检查患者护理敏感性质量指标体系具有科学性与实用性,可为结肠镜检查护理质量持续改进提供指导。     

近5年新安名医创方研究进展

新安医家注重临床实践,在临床实践中依据临床经验和学术思想自创了大量的原创方剂,为后世留下了丰富的宝贵财富。从对5位名医具有代表性的创方在现代临床各科以及实验研究的成果总结中,作者认为,较为全面系统地挖掘整理新安医家具有原创性的方剂文献是十分必要的研究工作。这些方剂对于当今中医临床实践具有极高的指导意义,也为现代药方实验研究提供了有力的文献基础。     

半夏泻心汤对功能性消化不良大鼠胃排空率和胃窦组织Ghrelin的影响

目的:观察半夏泻心汤对功能性消化不良大鼠胃排空率和胃窦组织Ghrelin的影响。方法:40只SD大鼠,随机分为4组:空白组、模型组、半夏泻心汤组和多潘立酮组。空白组不给予任何干预措施。其余各组采用不规则进食加稀盐酸喂养制作大鼠功能性消化不良(FD)模型。灌胃2周后,测定各组大鼠胃排空率、胃窦黏膜情况及胃窦组织Ghrelin水平。结果:(1)各组大鼠胃窦黏膜均未见明显损伤。(2)与模型组相比,给药组大鼠胃排空和胃窦组织Ghrelin水平升高(P0.05),但仍低于空白组(P0.05)。结论:半夏泻心汤具有促进胃排空作用和提高Ghrelin水平的作用,这可能是辛开苦降法治疗功能性消化不良的机制之一。