与雪旺细胞共培养诱导脂肪来源干细胞向神经元样细胞分化的实验研究

目的探讨非接触共培养条件下,大鼠SCs对脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)的诱导分化效应,为神经组织工程寻找理想种子细胞提供参考。方法取新生1~2 d SD大鼠双侧坐骨神经,酶消化法分离培养SCs,并行S-100免疫荧光染色鉴定。取成年雄性SD大鼠腹股沟和腹膜后脂肪组织,差速贴壁法纯化获得ADSCs并传代,流式细胞仪检测第3代细胞表型CD29、CD34、CD45、CD73、CD90和CD105。取原代SCs和第3代ADSCs按2∶1比例于Transwell共培养系统共培养(实验组),以单纯培养ADSCs作为对照组。倒置相差显微镜下观察细胞形态学改变,培养14 d流式细胞仪检测神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)表达,免疫荧光染色观察微管相关蛋白2(microtubule-associated protein 2,MAP2)、神经元核蛋白(neuronal nuclei protein,Neu N)和胶质原纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)神经元特异性标志物表达情况,并计算阳性细胞率。结果成功分离培养ADSCs并能连续传代,流式细胞仪检测示其高表达CD29、CD90、CD73和CD105,低表达CD34和CD45。倒置相差显微镜下见,实验组共培养后原本呈梭形的ADSCs以胞核为中心收缩,胞体折光性增强,胞体伸出多个长而粗的突起;对照组ADSCs形态无显著变化。流式细胞仪及免疫荧光染色示,共培养后14 d实验组均表达神经元特异性标志物NSE、MAP2、Neu N、GFAP,且阳性细胞率显著高于对照组(P0.01)。结论 SCs与ADSCs非接触共培养,两者不仅能够共生,且SCs能显著促进ADSCs向神经元样细胞分化。     

160例肺癌患者射频消融术后并发症分析

目的探讨射频消融术治疗晚期非小细胞肺癌并发症的发生情况,并分析其防治方法。方法收集2004年6月~2013年12月间住院的晚期非小细胞肺癌患者160例,均行射频消融术治疗,观察患者并发症发生情况并分析降低其发生率的方法。结果 160例晚期非小细胞肺癌患者均顺利完成射频消融治疗,无术中死亡患者。术后并发症包括发热、胸痛、气胸、胸腔积液、出血、咯血、肺炎、膈神经损伤和空洞等,经对症处理后均好转,患者可耐受。结论射频消融术治疗晚期非小细胞肺癌安全、有效,但也会引起并发症。预防并发的发生症对提高晚期非小细胞肺癌患者生活质量有临床意义。     

甲状旁腺腺瘤合并甲状腺结节34例临床分析

目的探讨甲状旁腺腺瘤合并甲状腺结节的诊断及外科治疗方法。方法回顾性分析我院收治的34例甲状旁腺腺瘤合并甲状腺结节的临床诊治经验。结果甲状旁腺腺瘤单侧单发多见(3l/34),单侧甲状旁腺腺瘤合并同侧甲状腺结节多见(25/31)。甲状腺结节病变性质主要为结节性甲状腺肿(27/34)。34例均行外科手术治疗。术后早期有8例患者出现短时的低钙血症,余无明显并发症。术后随访26例,全部患者甲状旁腺腺瘤均无明显复发迹象,结节性甲状腺肿患者有2例术后复查再次发现甲状腺结节,均予以动态观察,未行进一步手术切除,其余病例甲状腺结节均无复发。结论手术切除是治疗甲状旁腺腺瘤合并甲状腺结节的最有效的方法,最常用手术方式为单侧颈部探查术,术前定性及定位诊断结合术中诊断是手术成功的关键。     

大豆异黄酮对去势大鼠骨质疏松性骨折愈合的影响

目的研究大豆异黄酮在大鼠骨质疏松性骨折愈合过程中的干预效果。方法将50只6月龄雌性SD大鼠随机分成5组:正常对照组、骨折组、骨质疏松组、骨质疏松性骨折组、骨质疏松性骨折治疗组,每组10只。正常对照组、骨折组只进行手术入路而不切除卵巢。骨质疏松组、骨质疏松性骨折组、骨质疏松性骨折治疗组摘除双侧卵巢制备骨质疏松模型。8周后,骨折组、骨质疏松性骨折组、骨质疏松性骨折治疗组制备右侧股骨干中段横行骨折模型。骨质疏松性骨折治疗组每日灌胃大豆异黄酮50 mg/kg(剂量1.5 ml/kg),骨折组、骨质疏松性骨折组灌胃等量生理盐水,连续8周。结果去卵巢后8周,骨质疏松组的骨密度显著低于正常对照组(P0.05),说明骨质疏松模型制作成功。灌胃8周后,骨质疏松性骨折组骨痂组织骨小梁数量及致密度、骨密度、血管内皮细胞生长因子的表达均显著低于骨折组和骨质疏松性骨折治疗组(P0.05)。结论大豆异黄酮在大鼠骨质疏松性骨折愈合过程中具有积极促进作用。     

马钱子碱固体脂质纳米粒的细胞毒性及细胞摄取试验

目的:研究马钱子碱固体脂质纳米粒(brucine-loaded solid lipid nanoparticles,B-SLN)对Hep G2的细胞毒性和细胞摄取情况。方法:采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测B-SLN对Hep G2细胞的毒性,利用荧光显微镜定性观察细胞摄取情况,运用流式细胞仪定量检测不同条件下的细胞摄取情况。结果:马钱子碱组和B-SLN组对Hep G2细胞增殖具有抑制作用,且抑制率随时间延长和药物质量浓度增加而上升。马钱子碱组48,72 h的半抑制浓度(IC_(50))分别为208.5,78.5 mg·L~(-1),B-SLN组48,72 h的IC50分别为563.3,114.9 mg·L~(-1);药物质量浓度在125~500 mg·L~(-1)时,随药物质量浓度的增加,细胞摄取量由50.2%增加到71.2%;温度在4℃和37℃条件下,细胞摄取量由43%增加到55.2%;摄取时间在30~240 min时,随孵育时间的增加,细胞摄取量由9.7%增加到56.4%。结论:SLN给药系统能显著提高马钱子碱对抗癌细胞的活性,且B-SLN具有增加药物被细胞摄取的能力。     

俞红五“补虚固本”针刺法治疗老年性腰腿痛经验※

总结俞红五主任运用“补虚固本”针刺法治疗老年性腰腿痛的临床经验。俞红五主任认为,老年性腰腿痛的病因病机与先后天之本有着密切关系。在诊治老年性腰腿痛方面以“补虚固本”为主要治法,主穴为气海、关元、足三里（双侧）、灵骨（健侧）、大白（健侧）,若双侧腰部疼痛,灵骨、大白取双侧的穴位。本法重视益肾补虚以补先天之本,健脾益气以补后天之本,补虚固本,经络气血得以通畅,腰痛可愈,临床疗效满意。     

口腔癌患者外周血树突状细胞的体外培养及表型分析

目的：研究口腔癌患者外周血单核细胞来源的树突状细胞（dendritic cell，DC）形态、表型，与正常人进行比较并分析其临床意义。方法：15例口腔癌患者（实验组）及正常人（对照组）外周血单核细胞经GMCSF，IL4及TNF-α诱导培养，获取成熟树突状细胞，光镜和电镜观察细胞形态，流式细胞仪检测细胞表型CD1a、CD83、CD80、CD86和HLA-DR的表达变化。结果：培养7d后，2组均诱导出典型形态和表型的树突状细胞，实验组CD83、CD1a的表达率较对照组低，差异有统计学意义（均P〈0．001），但CD86、CD80、HLADR表达率2组差异无统计学意义（均P〉0．05）。结论：口腔鳞癌患者外周血单核细胞来源的DC经细胞因子诱导培养，能扩增出较大量高纯度并保持功能活性的成熟DC，为进一步开展以DC为基础的生物治疗和研究打下了基础。     

心脏磁共振纵向弛豫时间定量在肥厚型心肌病和扩张型心肌病中的应用价值

采用磁共振纵向弛豫时间定量(T1 mapping)成像技术评价23例肥厚型心肌病(HCM)和18例扩张型心肌病(DCM)纤维化的价值,研究初始T1值与心功能指标的相关性.结果 显示初始T1值在HCM组、DCM组及对照组分别为[(1 318.4±44.7)、(1 353.7±56.9)、(1 267.0 ±24.3)ms,P＜0.05],HCM患者、DCM患者左心室心肌初始T1值均与左室射血分数负相关(r=-0.488,P＜0.05;r=-0.659,P＜0.01).研究表明T1 mapping技术可以评价HCM及DCM心肌纤维化情况,HCM及DCM患者中左室心肌初始T1值所示心肌纤维化与心功能负相关.     

临床衰弱评分与老年冠心病病人短期预后的关系

目的探讨临床衰弱评分（CFS）与老年冠心病（CAD）病人短期预后的关系。方法选取老年CAD病人120例,均接受介入治疗,治疗前行CFS评分。根据病人的短期预后情况,分成预后良好组和预后不良组,将死亡者、出现严重不良事件者纳入预后不良组,将无事件生存者纳入预后良好组。比较2组CFS评分,绘制受试者工作特征曲线（ROC）分析CFS评分对老年CAD病人短期预后不良的预测价值,确定曲线下面积（AUC）、最佳界值。根据CFS评分,将病人分成衰弱组和无衰弱组,分析衰弱与病人临床特征的关系。结果在120例病人中,有28例（23.33%）预后不良,92例（76.67%）预后良好。在28例预后不良者中,院内死亡4例（14.29%）（其中心力衰弱3例,心源性休克1例）,泌尿系感染9例（32.14%）,严重出血5例（17.86%）、上呼吸道感染10例（35.71%）。预后良好组CFS评分为（4.13±0.56）分低于预后不良组的（6.02±1.61）分,差异有统计学意义（P < 0.01）。CFS评分预测老年CAD短期预后不良的AUC为0.704（标准误=0.055,P < 0.01,95% CI=0.597~0.811）,最佳界值为5.475分。衰弱组和无衰弱组疾病类型和病变数量分布差异有统计学意义,其中衰弱组不稳定型心绞痛、双支病变与三支病变占比高于无衰弱组（P < 0.01）。衰弱组和无衰弱组的病变部位以及高脂血症率、糖尿病率、高血压率、吸烟率差异均无统计学意义（P>0.05）。结论与短期预后良好者相比,预后不良者的CFS评分明显增高,CFS评分对老年冠心病病人的短期预后具有一定预测价值,且CFS评分可能受冠心病类型、病变数量的影响。