肝脏细胞自噬对肝纤维化的影响研究进展

细胞自噬对于维持细胞、组织及器官的稳态具有重要作用,并与多种病理生理过程密切相关。肝脏接受着肝门静脉的灌注,容易受到各种有害物质的损伤,而细胞自噬在降低肝脏损伤、调节肝脏内环境稳态中发挥重要作用[1]。肝纤维化是由慢性肝损伤导致的细胞外基质(extracellular matrix,ECM)蓄积的过程,造成这一病理改变的常见诱因有病毒性肝炎、酒精性肝病、非酒精性脂肪性肝炎和自身免疫性疾病等[2],多种细胞包括肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)、浸润的免疫细胞、肝实质细胞等都参与了肝纤维化过程。     

股骨头缺血性坏死患者血小板微颗粒及血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa、P-选择素表达的相关性研究

[目的]检测股骨头缺血性坏死患者血小板微颗粒(PMP)数量的变化,研究其与血小板表面膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa(PAC-1)、P-选择素(CD62P)活化比率的关系,探讨其在股骨头缺血性坏死患者中的临床意义.[方法]采用流式细胞仪分别对INFH及健康对照组(各40例)富含血小板血浆进行检测,分析各组PMP的表达状况,PAC-1及CD62P的活化比率;全自动生化仪检测血脂指标,包括总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、载脂蛋白A1、载脂蛋白B;凝血功能指标,包括血浆凝血酶原时间、活化部分凝血酶时间、凝血酶原国际标准化比值以及C反应蛋白水平.[结果]INFH患者中PMP的表达,PAC-1及CD62P的活化率[分别为130.4±58.6/Plt,(47.5±17.4)%,(25.8±7.1)%]明显高于健康对照组[分别为67.7±14.8/Pit,(9.2±2.4)%,(4.1±1.2)%](P<0.01);相关分析显示PMP与INFH存在相关(r=0.34,P<0.01),PMP与PAC-1、CD62P及CRP存在明显的正相关(分别为r=0.28,P=0.03,r=0.61,P<0.01及r=0.15,P=0.04).[结论]PMP数量及PAC-1、CD62P活化率等可作为INFH重要的实验室诊断依据,对诊疗INFH具有重要的参考价值.     

健脾理气化痰法针刺对高脂饲养胰岛素抵抗大鼠骨骼肌葡萄糖转运体4蛋白表达的影响

[目的]探讨健脾理气化痰法针刺对高脂饲养胰岛素抵抗大鼠骨骼肌葡萄糖转运体4（GLuT4）蛋白表达及胰岛素敏感性的影响。[方法]40只Wistar大鼠分别用高脂饲料、普通饲料喂养。经高胰岛素-正常葡萄糖钳夹术确定高脂饲养制备IR模型成功后,将模型大鼠随机分为模型组和电针组（取足三里、中脘、丰隆、关元穴）,普通饲料喂养组为正常组。治疗6周后,行腹腔糖耐量、腹腔胰岛素耐量实验测量各组大鼠血糖水平;治疗8周后,采用免疫组化法检测各组大鼠股四头肌GLUT4蛋白的表达。[结果]与模型组比较,电针组胰岛素降低血糖的效果显著增强（P〈o．01）;与模型组比较,电针组股四头肌GLUT4蛋白的表达水平增加（P〈o．05）。[结论]健脾理气化痰法针刺具有提高胰岛素敏感性的作用,并能显著提高股四头肌GLUT4蛋白的表达水平。     

针灸防治胰岛素抵抗及其相关性疾病的临床研究思路探讨

在分析针灸对胰岛素抵抗及其相关性疾病——肥胖、2型糖尿病、高血压、多囊卵巢综合征等临床研究现状的基础上,提出临床研究思路:采用针灸国际和国家标准,结合临床实践确立规范化的临床研究方案;确立有效的配穴组方,注重扶助正气在防治胰岛素抵抗及其相关性疾病中的作用;发挥中医针灸学的优势,选择合适的治疗时机以早期防治为主;设立合适的对照组,把握针灸学科和临床特点,为针灸防治胰岛素抵抗及其相关性疾病的临床研究提供借鉴.     

NHE-1与肝星状细胞增殖的关系及姜黄素对其的影响

目的:研究NHE-1与肝星状细胞增殖的关系及姜黄素对其的影响, 初步探讨肝纤维化的形成机制.方法:选择肝星状细胞系作为体外研究对象,用不同浓度(1、10、20 μmol/L)的姜黄素处理大鼠肝星状细胞; 以MTT比色法测定肝星状细胞的增殖; 酶联免疫吸附法(ELISA)测定Ⅰ型胶原含量, RT-PCR法检测肝星状细胞Na+/H-泵(NHE-1 mRNA)的表达.结果:各浓度姜黄素可明显下调肝星状细胞NHE-1 mRNA表达(0.6401±0.0063, 0.2391±0.0039, 0.1437±0.0044 vs 0.7214±0.0155,P <0.05), 降低培养上清液中Ⅰ型胶原的水平(199.40±16.22, 182.37±14.72, 169.91±15.80 ng/mg pro vs 216.35±17.19 ng/mg pro,P <0.05), 抑制肝星状细胞的增殖, 并呈剂量依赖性.结论:姜黄素可能通过调控肝星状细胞NHE-1mRNA的表达来抑制HSC的增殖及Ⅰ型胶原的合成等机制, 从而抑制肝纤维化的形成.     

乌梅丸对溃疡性结肠炎大鼠组织细胞因子的干预效应

目的:观察中草药乌梅丸对溃疡性结肠炎大鼠组织促炎细胞因子肿瘤坏死因子α、白细胞介素6,8和抗炎细胞因子白细胞介素10的影响,并比较乌梅丸与柳氮磺胺吡啶治疗效果。方法:实验于2002-10/2003-03在湖北中医学院中心实验室完成。①选用健康SD大鼠56只,雌雄各半。按雌雄随机分4组:正常组、乌梅丸组、柳氮磺胺吡啶组、模型组,每组14只(雌雄各半)。应用2,4-二硝基氯苯免疫加醋酸局部灌肠法建立溃疡性结肠炎大鼠模型,除正常组外,其余组均造模。②乌梅丸组:给予配制的乌梅丸液(中草药乌梅丸为本院自制,成分:乌梅16g,细辛6g,干姜10g,黄连16g,当归4g,附子6g,蜀椒4g,桂枝6g,生晒参6g,黄檗6g。按传统方法配制成含生药浓度分别为515g/L的水煎剂)3mL灌胃,1次/d;柳氮磺胺吡啶组:给予柳氮磺胺吡啶混悬液3mL在造模后灌胃,1次/d;模型组和正常组:均以蒸馏水3mL灌胃,1次/d。各组均给药15d。③然后于第16天,采用酶联免疫吸附法检测结肠组织白细胞介素6,8,10,肿瘤坏死因子α含量。④计量结果差异比较采用t检验、方差分析(q检验)。结果:由于每组大鼠在灌胃前随机抽取2只进行病理检查以及部分标本采集不合格,正常组、模型组、柳氮磺胺吡啶组、乌梅丸组分别脱失2,4,5,3只,最终进入结果分析以上各组大鼠分别为12,10,9,11只。①大鼠结肠组织白细胞介素6,8,肿瘤坏死因子α含量:模型组均明显高于正常组(P<0.01),柳氮磺胺吡啶组和乌梅丸组明显低于模型组(P<0.01),乌梅丸组明显低于柳氮磺胺吡啶组(P<0.01)。②大鼠结肠组织白细胞介素10含量:模型组明显低于正常组(P<0.01),柳氮磺胺吡啶组和乌梅丸组明显高于模型组(P<0.01),乌梅丸组明显高于柳氮磺胺吡啶组(P<0.05)。结论:乌梅丸有上调抗炎细胞因子白细胞介素10,下调促炎细胞因子肿瘤坏死因子α、白细胞介素6,8的作用,使溃疡性结肠炎大鼠免疫功能恢复正常,达到治疗的目的;乌梅丸对溃疡性结肠炎干预效果优于柳氮磺胺吡啶。     

Sphk1在胰腺癌中的临床意义及其对胰腺 癌细胞增殖和迁移能力的影响

摘要:目的 探讨鞘氨醇激酶1(sphingosinekinase1,Sphk1)在胰腺癌与正常胰腺及临近癌旁组织间的表达差异, 及其表达与临床预后和免疫细胞浸润水平的相关性,并在体外探索其对胰腺癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法 利 用 TCGA、GEO 数据库分析胰腺癌、正常胰腺组织及胰腺癌旁组织中Sphk1的转录水平;Kaplan-MeierPlotter数据库分 析Sphk1表达量与胰腺癌患者预后的相关性;Cibersort数据库分析 Sphk1与胰腺癌组织免疫细胞浸润水平的关系; GSEA 软件分析挖掘Sphk1发挥功能的潜在机制。利用过表达质粒构建 Sphk1过表达的胰腺癌细胞系,应用 CCK8法 和平板克隆实验检测细胞增殖能力;Transwell实验检测细胞迁移能力。结果 Sphk1在胰腺癌组织中表达量显著高于 正常胰腺组织(P<0.05)和胰腺癌癌旁组织(P<0.01);与 Sphk1高表达组患者相比,低表达组具有更长的总生存期 [HR=1.91(1.13~3.22),Log-rankP=0.013]和无复发生存期[HR=2.88(1.26~6.58),Log-rankP=0.009];Sphk1 表达与肿瘤大小、临床分期及病理学分级相关;GSEA 分析显示:Sphk1显著富集于血管新生、上皮间质转化、缺氧、炎症 反应、NF-κB及代谢等通路;免疫浸润分析提示:Sphk1促进滤泡辅助性 T 细胞、调节性 T 细胞、未分化巨噬细胞和树突 状细胞浸润,抑制静息记忆 CD4+ T细胞、M1型巨噬细胞、静息态肥大细胞及单核细胞浸润;体外细胞实验显示:过表达 Sphk1可以显著增强 BxPC-3胰腺癌细胞的增殖和迁移能力。结论 过表达 Sphk1可以增强人胰腺癌细胞 BxPC-3的 增殖和迁移能力,其潜在机制可能是影响胰腺癌肿瘤免疫微环境。     

玉屏风散加味治疗难治性汗证患者1例报告

<正> 汗证是指汗出异常的证候,当汗出而无汗、不当 汗出而多汗,或身体局部汗出异常者,均属于病理现 象,可归属于中医学“汗证”范畴[1]。汗证一般多见于甲状腺功能亢进、风湿热、植物神经功能紊乱、肺结核等疾病。中医学认为,汗证多由于阴阳失调、腠理不固而致汗液外泄失常导致,既可单独出现又可作为伴随症状出现在其他疾病中。难治性汗证主要是指通过常规治疗方法无法缓解的出汗症状[2],在晚期肿瘤患者中极为常见,部分肿瘤患者在术后或化疗后容易出现自汗、盗汗等多汗症状,表现程度也相对较重[3]。 本病发病机制复杂,病情容易反复,影响患者生命质 量,西医治疗目前尚无特效方法。     

早期接触临床对医学生培养的意义探讨

“早期接触临床”是西方国家医学生规范化培养的必要手段,也是医学高等教育的课程改革趋势。以美国哈佛大学为例,经过2015年的改革后,哈佛医学院在第一学年就开设医学实践课,医学生每周有1天的时间在指导老师的带领下参与病人的沟通、诊查工作,并进入诊所见习[1]。我国医学生传统培养模式分 成3个阶段,分别为基础通识教育、医学专业课程教育、临床见习教育,但3个阶段大多彼此分开、互相割裂,从而形成教育壁垒,对医学生培养产生负面影响。 基于此,本文着重讨论早期接触临床对于医学生培养的必要性与积极意义,并提出在中国医学院实行早期临床见习的建议,借此希望早期接触临床能帮助我国培养更多的医学人才。     

大鼠神经干细胞生长及增殖规律的体外研究

目的:体外无血清条件下培养胚鼠神经干细胞,观察其生长及分化情况.方法:取孕16～18 d SD系大鼠的胚胎海马组织,在含EGF、bFGF和B27的DMEM/F12培养基中培养,电子显微镜下观察其增殖分化过程,并通过免疫荧光方法鉴定分化后的细胞类型.结果:神经干细胞在无血清培养基中生长旺盛,8 d左右就可以形成胞体透亮、折光性好的干细胞球,分化后的细胞显示NSE、GFAP免疫阳性.结论:无血清培养条件下神经干细胞生长良好,而在含血清的培养基中可以分化为神经元和星形胶质细胞.