支气管哮喘、慢性阻塞性肺疾病血清内皮素、一氧化氮含量昼夜变化的特点及临床意义

采用双抗体夹心法和硝酸还原酶法测定 18例支气管哮喘患者、 38例慢性阻塞性肺疾病 (COPD)急性期患者血清内皮素 (ET)及一氧化氮 (NO)含量 ,观察两组间及其昼夜变化 ,并与 5 8例正常对照组比较。结果显示哮喘患者血清 NO、 ET及 NO/ ET水平均明显高于正常对照组 ,差异非常显著 P<0 .0 1;COPD急性期患者 NO、 NO/ ET水平高于正常对照组 ,差异显著 ,P<0 .0 5。提示 ET和 NO是参与支气管哮喘、 COPD急性期发病过程的重要因素 ,测定其血清水平及其动态变化是判断哮喘、 COPD急性发作期病情变化的重要实验室依据     

53例胸腔积液病因临床分析

胸腔积液是临床常见综合征 ,由于其病因多样化 ,鉴别诊断比较困难。本文对 1997年 5月～ 2 0 0 0年 5月收治的 5 3例胸腔积液患者的病因及鉴别诊断进行分析如下。1　临床资料5 3例胸腔积液患者均为住院确诊患者 ,其中男性 30例 ,女性 2 3例 ;年龄 15～ 87岁 ,平均 42 .1岁 ,>6 0岁 2 2例。右侧胸液 2 5例 (4 2 .2 % ) ,左侧胸液 18例 (33.9% ) ,双侧胸液10例 (18.9% ) ;大量胸液 16例 (30 .2 % ) ,中等量胸液 2 7例(5 0 .9% ) ,少量胸液 10例 (18.9% )。经常规实验室检查确定为漏出液 9例 ,渗出液 38例 ,血胸 2例 ,乳糜胸 1例 ,脓胸 3例。胸…     

转γ-干扰素基因大鼠肝细胞模型的建立

目的：使用多聚阳离子脂质体载体（ｌｉｐｏｆｅｃｔＡＭＩＮＥ）在体外建立转γ干扰素（ＩＦＮγ） 基因的大鼠肝细胞模型。方法：利用ｌｉｐｏｆｅｃｔＡＭＩＮＥ在体外将ＩＦＮγ基因转染大鼠肝细胞。分别以ＲＴＰＣＲ 和ＥＬＩＳＡ方法检测所转ＩＦＮγ基因在大鼠肝细胞的转录和表达情况。结果：以ｌｉｐｏｆｅｃｔＡＭＩＮＥ为载体的ＩＦＮγ基因转染大鼠肝细胞后,可被有效的转录并产生具有生物活性的ＩＦＮγ。结论：ＩＦＮγ基因可被成功转染入大鼠肝细胞并可有效表达。这可能为细胞因子的免疫治疗提供一种新途径。     

嗅神经髓鞘细胞移植促进大鼠横断脊髓轴突再生的研究

目的;观察嗅神经髓鞘细胞（OECs)对脊髓轴突再生的促进作用。方法：将分离,纯化与体外培养2周的SD大鼠OECs,移植于12只成年SD大鼠第10胸椎横断模型的脊髓两断端;8只对照动物注入DMEM／F12培养基,移植后2周和8周进行神经嗜银染色与髓磷脂碱性蛋白（MBP）组织化学和神经生长因子受体（NGFR）免疫组织化学研究。结果：OECs移植组2周后脊髓两端在形态学上呈现初步愈合现象,组织学观察显示,移植OECs与损伤脊髓组织整合良好,再生轴突长入断端组织,8周时再生轴安全检查明显增多,OECs与再生轴突均呈MBP和NGFR阳性表达。对照组两断端液化坏死,未见再生轴突。结论：OECs移植可保护损伤的脊髓并促进宿主脊髓轴突再生。     

肝细胞生长因子诱导小鼠胚胎干细胞分化的实验研究

目的探讨肝细胞生长因子（HGF）诱导小鼠胚胎干细胞（ESC）体外定向分化为肝细胞的能力。方法对ESC体外悬浮培养5～7天形成的拟胚体,观察ESC自主分化、HGF诱导分化的情况。观察和检测经诱导4周的细胞的HE染色,糖原染色,尿素氮及甘油三酯合成,心肌MHC、白蛋白、AFP、CK18的表达,以及吲哚氰绿（ICG）染色情况。结果ESC自主分化难以控制。HGF可促进ESC向内胚层进一步分化,但更可能诱导其向心肌分化。表达白蛋白、AFP、CK18、ICG和FDA染色阳性。结论HGF可诱导ESC分化出肝细胞,但HGF的单一作用能力有限,提示肝细胞的诱导分化可能需要多种因素共同作用。     

中西医结合治疗慢性肺心病82例临床分析

1998年 10月～ 2 0 0 0年 1月 ,我们采用中西医结合方法治疗慢性肺源性心脏病急性发作期患者 82例 ,中医辨证属于心脾肾阳虚水泛型 ,取得了较满意的效果 ,现报告如下。1　临床资料 :慢性肺心病急性发作期患者 152例均符合 1977年全国第 2次肺心病专业会议诊断标准 (均已排除冠心病、高血压病、糖尿病、白血病及肾病等 ) ,随机分为治疗组 82例和对照组 70例。1.1　一般资料 :152例患者均为住院病人 ,其中治疗组 82例 ,男 4 9例 ,女 33例。年龄 51～ 83岁 ,平均年龄6 2 .5岁。病程最短 8a,最长 34a,平均 2 9a。合并 型呼衰 9例 , 型呼衰 6 4…     

胚胎干细胞体外分化为功能性肝细胞过程中肝细胞生长因子诱导系统中瘀胆血清的促进作用

背景:目前各种诱导胚胎干细胞(ESC)分化为肝细胞的方法中,大多忽略了对分化细胞功能的诱导与鉴定。是否表达肝细胞功能应作为ESC向肝细胞分化的鉴定指标之一。目的:观察在肝细胞生长因子(HGF)体外诱导小鼠胚胎干细胞向肝细胞分化的体系中,瘀胆血清病理环境对分化细胞表达肝细胞功能的作用。设计:观察对比,体外细胞学实验。单位:中山大学附属第二医院肝胆外科。材料:实验于2004-10/2007-02在中山大学附属第二医院医学研究中心完成。小鼠E14ESC系由中山大学干细胞与组织工程中心提供;SD大鼠20只,鼠龄2周,购自中山大学动物实验中心。实验过程中对动物的处置符合动物伦理学要求。方法:对SD大鼠施以胆总管结扎切断手术,制作瘀胆模型,饲养10d后取全血制备瘀胆血清。用悬滴培养ESC发育5～7d的拟胚体,将其离散细胞种植于不同的分化体系,分别进行自主分化、20μg/L肝细胞生长因子、5%瘀胆血清 20μg/L肝细胞生长因子诱导分化。主要观察指标:①倒置显微镜下动态观察细胞形态变化。②分化4周时进行白蛋白、甲胎蛋白、CK18/19、糖原及吲哚氰绿和荧光二乙酯染色。③采用相应试剂盒每3天检测细胞合成白蛋白、三酰甘油及尿素氮功能。结果:①ESC自主分化难以控制,分化为3个胚层的细胞。肝细胞生长因子促进ESC向内脏内胚层和中胚层(心肌)分化,但两者仅能表达低水平的肝细胞特异性功能。②引入瘀胆血清的肝细胞生长因子诱导体系中ESC能分化为较为形态均一的多角形细胞,其糖原、吲哚氰绿和荧光二乙酯染色均为阳性;白蛋白、三酰甘油和尿素氮合成能力显著高于自发分化和肝细胞生长因子诱导结果(P<0.05～0.01)。结论:采用瘀胆血清体外模拟病理性微环境可促进HGF诱导的ESC源性肝细胞表达高水平的肝特异性代谢功能。     

移植肝细胞在倒千里光碱处理大鼠肝脏中增殖状态的研究

目的探讨移植肝细胞在倒千里光碱（RS）处理的大鼠肝脏中的增殖情况。方法将5-溴脱氧尿苷（BrdU）标记的肝细胞通过门静脉途径移植至RS或肝切除处理的大鼠肝脏中，通过免疫组织化学方法检测移植肝细胞数量及流式细胞仪检测S期细胞比率，从而了解供肝细胞在受体内的增殖。结果在接受RS和肝切除处理的大鼠肝脏中，移植的肝细胞数术后3、7、14、28d分别是41±4、67±4、154±10、248±23／1000个细胞，S期细胞比率分别是（4．37±0．21）％、（5．33±0．32）％、（9．55±0．72）％、（17．65±1．76）％，呈上升趋势。结论RS能够为移植肝细胞在受体内的增殖制造足够的增殖空间，在肝损伤造成的肝再生环境中，移植肝细胞的增殖更加显著。     

大蒜素对大鼠NK细胞肿瘤杀伤活性的影响

目的: 研究大蒜素对体外培养的大鼠NK细胞肿瘤杀伤活性的影响,并初步分析其可能机制。方法: 免疫磁珠分选法分离大鼠脾脏NK细胞,流式细胞仪检测不同浓度的大蒜素对NK细胞的增殖和凋亡的影响,ELISA检测大鼠脾脏NK细胞IFN-γ的分泌水平,乳酸脱氢酶(LDH)法检测大鼠脾脏NK细胞对小鼠淋巴瘤Yac-1细胞的杀伤活性。结果: 大蒜素对体外培养的NK细胞有明显的促进增殖和抑制NK细胞自然凋亡的作用,并能提高NK细胞分泌IFN-γ的水平和增强对Yac-1细胞的杀伤毒性,且在一定的浓度范围内呈剂量依赖性,其中30 mg/L是大蒜素的相对适宜浓度。结论: 大蒜素可能通过上调NK细胞分泌IFN-γ的水平,增强其体外肿瘤杀伤能力。     

氟尿嘧啶免疫聚乳酸纳米微粒抗肿瘤效应的研究

目的利用载氟尿嘧啶（5-FU）免疫聚乳酸（PEA）纳米微粒（NPs），观察其对严重联合免疫缺陷病（SCID）鼠人胃癌移植模型的治疗效应。方法超声乳化法合成的载5-FU的抗血管内皮生长因子（VEGF）单克隆抗体纳米微粒，建立SCID鼠人胃癌移植肿瘤模型，观察药物对高表达VEGF胃癌移植肿瘤模型的治疗效应及其不良反应。结果空白对照组、未载药空纳米微粒组、5-FU组（20mg／kg）、抗VEGF单克隆抗体-未载药空纳米微粒组、抗VEGF单克隆抗体组、载5-FU纳米微粒组、5-FU（20mg／kg）加抗VEGF单克隆抗体组及抗VEGF单克隆抗体-载5-FU纳米微粒组（20mg／kg）的抑瘤率分别为0、6．61％、24．26％、27．94％、35．29％、37．50％、39．71％和52．21％，且载5-FU的抗VEGF单克隆抗体纳米微粒组和未载药纳米微粒组的血白细胞数量及肝肾功能与空白对照组相比，差异无统计学意义（P〈0.05）；而含5-FU原药组血白细胞数量较空白对照组和抗VEGF单克隆抗体-载5-FU纳米微粒组下降34．43％和37．38％（P〈0.05）：而肝转氨酶升高93．17％和66．56％。治疗组与对照组癌细胞凋亡指数相比，以抗VEGF单克隆抗体．载5-FU纳米微粒组更为明显，差异有统计学意义（P〈0.05）；含抗VEGF抗体的实验组微血管密度明显低于含5-FU药组和对照组（P〈0.05）。结论载5-FU抗VEGF单克隆抗体纳米微粒可提高5-FU的抑瘤率，并通过抑制肿瘤的血管生成，诱导肿瘤细胞凋亡，增加疗效，有效降低5-FU的骨髓抑制和肝肾功能损害作用．是一种安全的新型药物纳米级靶向制剂。