大鼠肝移植急性排斥反应时T淋巴细胞免疫相关基因表达的基因芯片研究

目的 从基因水平了解T淋巴细胞在急性排斥反应中作用的分子机制。方法 建立大鼠肝移植急性排斥反应模型，并设对照组，利用4096条大鼠cDNA克隆的基因芯片从来自排斥组和对照组的T淋巴细胞中抽提、纯化mRNA，逆转录成cDNA，荧光标记后与芯片杂交，扫描后筛选出差异表达的基因。结果 在4096个基因中共发现差异表达基因190条，其中10条差异表达明显、已知功能的免疫相关基因为：主要组织相容性复合物(3条)和CD3抗原(1条)相关基因；干扰素调节因子1、上皮生长因子受体、转化生长因子相关基因各1条；白细胞蛋白酶抑制因子、急性期蛋白抑制因子3相关基因各1条；补体因子1基因1条。结论 T淋巴细胞在肝移植术后急性排斥反应中的作用机制涉及多个基因；基因芯片技术是一种高效、稳定的方法。     

产前应用地塞米松对早产儿肺透明膜病的预防作用

目的 探讨产前应用地塞米松对早产儿肺透明膜病的预防作用。方法 分段(36—35周；34—28周)比较产前用药组与未用药组早产儿HMD发生情况；比较产前用药组用药时间HMD的发生情况；比较用药组与未用药组HMD肺氧合功能的差异及HMD病死率。结果 (1)≤34周中，产前用药组发生HMD情况高于未用药组，差异有高度统计学意义；-36周中，两组比较，差异无显著性。(2)产前24小时内用药组发生HMD比产前24小时以上用药组多，差异有显著性。(3)用药组HMD发病患儿肺泡-动脉氧压差明显低于未用药组，差异有显著性。(4)用药组的HMD病死率比未用药组低，但差异无显著性。结论 产前应用地塞米松预防HMD的最佳阶段为孕28-34周，最佳时间为产前24小时以上，能降低HND的发生率,减轻HMD的病情，对降低死亡率具有一定的作用。     

新生儿游泳与新生儿行为神经测评相关性的临床研究

目的探讨新生儿游泳与新生儿行为神经发育的相关性。方法选剖宫产、顺产的正常足月儿,分为游泳组和非游泳组。通过新生儿行为神经测评(NBNA),比较游泳组与非游泳组间的差异。结果新生儿在生后第1、7、14、28天的比较中,NBNA总分游泳组均高于非游泳组,P均<0.01,有显著性差异;在NBNA附加分(非生物视定向反应、生物视定向反应)评估项目中游泳组均高于非游泳组,P<0.01,有显著性差异。结论新生儿游泳在新生儿行为神经发育方面起积极促进作用,给新生儿带来了更健康、更安全的成长道路。     

siRNA沉默肝癌细胞报告基因瞬时表达效应的定量分析

目的研究小分子干扰RNA(siRNA)特异性抑制肝癌细胞基因瞬时表达的可行性和基因沉默效率。方法凝胶电泳成像观察siRNA体外孵育后的降解性,利用Cy3示踪观察其转染HepG2细胞后动力学变化。将报告基因(GFP)和siRNA共同瞬时转染至HepG2细胞,流式细胞仪、Western blot RT-PCR等分析特异性siRNA抑制报告基因瞬时表达的效应。结果siRNA在空白培养液中和转染细胞内可较长时间保持相对稳定。与空白和非特异siRNA相比,GFPsiR-NA明显抑制GFP蛋白产物和mRNA的表达(P<0·05)。结论特异性siRNA能高效沉默人肝癌细胞转染基因的瞬时表达,为基因治疗提供了一种新的治疗策略。     

肝移植术后应用重组生长激素对急性排斥反应的影响

目的　探讨临床肝移植术后早期应用rhGH对排斥反应的影响。方法　对 30例肝移植患者随机抽取其中 15例作为观察组 ,15例作为对照组 ,观察组于术后第 1天开始连续 7d每天 1次皮下注射重组人生长激素10u ,其他治疗与对照组相同。术后 1,4 ,8,14d测定免疫学指标及临床观察。结果　观察组血清GH及IGF - 1水平较对照组显著升高 (n=15 ,P <0 0 5 ) ,同时两组血清IgG ,IgM ,IgA ,IL - 2水平CD4 /CD8值及急性排斥发生率差异均无显著性 (n=15 ,P >0 0 5 )。结论　观察组与对照组的细胞免疫与体液免疫指标及急性排斥发生率差异无显著性。     

老年大鼠供肝应用的实验研究

目的 研究老年大鼠供肝的应用,并探讨老年大鼠肝移植供体年龄限制.方法 采用肝动脉重建二袖套原位肝移植技术,建立大鼠原位肝移植模型,供受体均为雄性Wistar大鼠,受体鼠龄均为5月,根据供体鼠龄分组,A～E组供体鼠龄分别为5、17、20、23、26月,每组12例.检测术后第1、3、7天血清丙氨酸转氨酶(ALT)水平,并观察组织病理学变化和术后3月存活率.结果 B、C和D组肝移植术后第1天和第3天ALT与A组比较差异均有显著性(P<0.05),第7天差异无显著性(P>0.05),肝功能恢复延迟,肝功能于术后第7天趋于稳定.老年大鼠移植肝植入前组织病理学表现存在轻度肝纤维化,老年大鼠肝细胞数目减少,脂褐素数量增加.E组术后ALT增高(P<0.05),肝功能损伤不可恢复,3月存活率为0.结论 供体年龄是影响老年供肝移植疗效的重要因素之一,鼠龄低于23月的老年大鼠移植肝可恢复功能.

Abstract：

Objective To investigate the application of donor livers from aging rats, and discuss the age limit of the donor rats liver transplantation. Methods Arterialized, two-cuff technique orthotopic liver transplantation was performed in male Wistar rats. All the recipient rats were 5 months old, and the ages of the donor rats were 5 (group A), 17 (group B), 20 (group C), 23 (group D), and 26 (group E) months (n=12). The postoperative function recovery and pathological changes of the liver grafts were evaluated by serum alanine aminotransferase (ALT) detection and histopathological examination, and the 3-month survival rate of the rats was observed. Results Aging liver grafts in groups B, C, and D caused early elevation of ALT peak level and aggravation of liver tissue damage, and the liver graft recovery was delayed until postoperative day 7. Mild liver fibrosis, reduced hepatocytes and pigment deposition were observed in the liver grafts before the transplantation. Compared with the other groups, the rats in group E showed significantly increased ALT levels after the transplantation (P<0.05), with failure of liver graft function recovery and significantly reduced 3-month survival rate (0%, P<0.05). Conclusion The donor age of the rats is a crucial factor to affect the outcome of the liver grafts. Grafts obtained from rats younger than 23 months allow better functional recovery of the liver.     

YMDD变异受体肝移植术后乙型肝炎病毒再感染的预防

目的 探讨YMDD变异受体肝移植术后乙型肝炎病毒(HBV)再感染的预防方法.方法 2004年3月～2006年5月本中心20例术前合并YMDD变异的肝移植受体给予口服阿德福韦酯(ADV)联合肌肉注射乙肝免疫球蛋白(HBIG)作为预防方案,持续监测术前及术后的移植肝功能、血清HBV标志物、HBV-DNA定量、血肌酐等.结果 患者术后平均随访33.5个月,除1例死于肝癌复发外,其余患者均存活.术前HBV-DNA≥106copies/m1患者YMDD变异率为12.4%,HBV-DNA<106copies/ml患者为2.5%,两组间差异有统计学意义(P<0.05).95.0%(19/20)的患者于肝移植术后4周内HBV-DNA转阴性,5.0%(1/20)于术后6个月转阴性.此后长期复查HBsAg、HBeAg、HBV-DNA均阴性.所有患者均未出现HBV再感染.1例患者在服用ADV 1年后出现血肌酐水平持续增高.结论 应用ADV可有效预防YMDD变异受体肝移植术后HBV再感染.ADV有较低的肾毒性,用药期间仍需定期监测肾功能.     

再次肝移植治疗移植肝缺血型胆道损伤15例报告

目的探讨再次肝移植治疗缺血型胆道损伤的临床经验。方法回顾性分析15例因缺血型胆道损伤施行再次肝移植受者的临床资料。结果 15例移植受者术前均接受过介入治疗,再次肝移植全组无手术死亡。术后1个月存活率为67%,1年存活率为60%,3年存活率为53%。截止至2012年3月,有8例存活并返院随诊,存活时间超过5年的5例,其余3例存活时间分别为47个月、58个月、35个月,肝功能及生活情况良好。术后严重感染导致的多器官功能衰竭是再次肝移植患者死亡的主要原因。结论再次肝移植是治疗缺血型胆道损伤唯一有效的方法。对于缺血性胆道损伤,预防的意义远大于治疗。从供肝切取与保存、胆道重建、术后免疫抑制方案的选择、长期随访等等环节加以重视,有利于减少缺血型胆道损伤。     

成人良性终末期肝病肝移植术后中远期生存分析

目的 了解成人良性终末期肝病肝移植术后中远期的生存情况和影响中远期生存率的因素.方法 回顾性地分析2003年10月至2006年5月203例良性终末期肝病肝移植术后生存期大于1年的165例受体的长期随访结果 ,包括各种并发症的发生率及相关死亡率.结果 肝移植术后1、2、3年的生存率分别为88.7%、85.5%、81.2%;乙肝相关性疾病受体2、3年生存率分别为88.4%和84.5%,非乙肝相关性疾病2、3年的生存率83.4%和77.0%,两组差异无统计学意义(P=0.144).存活大于1年的165例中,1年后死亡21例,平均死亡时间22.7±6.6月(12～48个月).1年后导致受体死亡的主要并发症及其病死率为:感染并发症4.8%(8/165)、胆道并发症3.6%(6/165)、乙肝病毒再感染1.8%(3/165)、慢性排斥反应1.2%(2/165)、肾功能损害0.6%(1/165)和肝动脉并发症0.6%(1/165)等.结论 良性终末期肝病肝移植术后中远期生存情况良好.影响患者术后中远期存活的主要原因是感染并发症、胆道并发症和HBV再感染.     

影响肝移植术后新发糖尿病逆转的相关因素

目的 探讨影响肝移植术后新发糖尿病(PTDM)逆转的相关因素.方法 回顾分析232例肝移植受者的临床资料,术后共有62例患者发生PTDM,发生率为26.7%.根据PTDM是否发生逆转,将62例患者分为暂时性PTDM组(34例)和持续性PTDM组(28例).对两组患者的性别、年龄、体重指数、糖尿病家族史、乙型肝炎病毒感染情况、术前空腹血糖水平、免疫抑制剂使用及其血药浓度、皮质激素的使用时间等相关因素进行分析.结果 两组间患者的性别、体重指数、糖尿病家族史、术前空腹血糖水平、免疫抑制方案中皮质激素的持续使用时间、术后血他克莫司浓度及使用环孢素A的患者比例等因素的差异均无统计学意义(P＞0.05).与持续性PTDM组相比,暂时性PTDM组患者移植时年龄较轻,分别为(54±8)岁和(42±6)岁(P＜0.05);发生PTDM的术后时间较晚,分别为术后(18±23)d和(35±42)d(P＜0.05);免疫抑制方案中联合运用吗替麦考酚酯(MMF)或西罗莫司(SRL)的患者比例较高,分别为0和8.9%(P＜0.05).经多因素Logistic回归分析显示,只有移植时年龄是PTDM逆转的独立预测因子(比值比为1.312,95%可信区间为1.005～1.743).结论 患者移植时年龄、发生PTDM时的术后时间及免疫抑制方案中使用MMF或SRL的患者比例等因素与肝移植术后PTDM逆转相关,但只有移植时年龄是PTDM逆转的独立预测因子.

Abstract：

Objective To study the related factors associated with the reversal of posttransplant diabetes mellitus (PTDM) following liver transplantation. Methods The clinical data of 62patients with PTDM in 232 patients receiving liver transplantation (26. 7 %) were retrospectively analyzed and the patients were divided into two groups: patients with transient PTDM (34 cases) and those with persistent PTDM (28 cases). Pre-operative and post-operative variables, including sex,age, body mass index, family history of diabetes, hepatitis B virus infection, pretransplantation fasting plasma glucose, the immunosuppressant regime, FK506 concentration and duration of steroid usage, were analyzed retrospectively. Results The variables, including sex, age, body mass index,family history of diabetes, hepatitis B virus infection, pretransplantation fasting plasma glucose,FK506 concentration at month 1, 3 and 6 after operation, rate of cyclosporine usage and duration of steroid usage had no significant difference between the two groups (P＞0. 05). Compared with the persistent PTDM patients, the transient PTDM patients were characterized by younger age at the time of transplantation (54 ± 8 vs. 42 ± 6 years, P＜0. 05), longer time before the development of PTDM (18 ± 23 vs. 35 ± 42 days, P＜0. 05), and higher rate of mycophenolate mofetil or sirolimus usage (0vs. 8. 9 %, P＜0. 05). Based on a multivariate analysis, age at the time of transplantation was determined as the single independent predictive factor associated with reversal of PTDM following liver transplantation (odds ratio: 1. 312, 95 % confidence interval: 1. 005 - 1. 743). Conclusion Age at the time of transplantation, duration before the development of PTDM and rate of mycophenolate mofetil or sirolimus usage are associated with reversal of PTDM following liver transplantation. Among these factors, age at the time of transplantation is only the single independent predictive factor.