基因芯片对大鼠肝移植急性排斥反应T淋巴细胞信号传导基因表达变化的研究

目的：从基因水平研究肝移植急性排斥反应中T淋巴细胞信号传导途径。方法：利用4096条大鼠cDNA克隆的基因芯片对从急性排斥组Wistar→SD(n=5)和对照组SD→SD(n=5)两组肝移植大鼠T细胞中抽提、纯化mRNA，扩增、逆转录成cDNA，荧光标记后与芯片杂交，扫描后筛选出差异表达的基因。结果：在4096个基因中共发现差异表达基因190条，其中ll条与细胞信号传导有关的基因差异表达明显：MHC(3条)、CD3抗原(1条)相关基因；蛋白酶类：蛋白激酶C结合蛋白、蛋白酪氨酸磷酸酯酶D型受体、磷脂酰肌醇二磷酸酶基因各l条；涉及核酸信号传导、激活、转录、翻译的基因3条。结论：T细胞在肝移植术后排斥反应中信号传导机制涉及多个基因，基因芯片技术的大规模筛选为进一步研究T细胞在排斥反应中的信号传导途径提供了客观依据和目标。     

产前应用地塞米松对早产儿肺透明膜病的预防作用

目的 探讨产前应用地塞米松对早产儿肺透明膜病的预防作用。方法 分段(36—35周；34—28周)比较产前用药组与未用药组早产儿HMD发生情况；比较产前用药组用药时间HMD的发生情况；比较用药组与未用药组HMD肺氧合功能的差异及HMD病死率。结果 (1)≤34周中，产前用药组发生HMD情况高于未用药组，差异有高度统计学意义；-36周中，两组比较，差异无显著性。(2)产前24小时内用药组发生HMD比产前24小时以上用药组多，差异有显著性。(3)用药组HMD发病患儿肺泡-动脉氧压差明显低于未用药组，差异有显著性。(4)用药组的HMD病死率比未用药组低，但差异无显著性。结论 产前应用地塞米松预防HMD的最佳阶段为孕28-34周，最佳时间为产前24小时以上，能降低HND的发生率,减轻HMD的病情，对降低死亡率具有一定的作用。     

siRNA沉默肝癌细胞报告基因瞬时表达效应的定量分析

目的研究小分子干扰RNA(siRNA)特异性抑制肝癌细胞基因瞬时表达的可行性和基因沉默效率。方法凝胶电泳成像观察siRNA体外孵育后的降解性,利用Cy3示踪观察其转染HepG2细胞后动力学变化。将报告基因(GFP)和siRNA共同瞬时转染至HepG2细胞,流式细胞仪、Western blot RT-PCR等分析特异性siRNA抑制报告基因瞬时表达的效应。结果siRNA在空白培养液中和转染细胞内可较长时间保持相对稳定。与空白和非特异siRNA相比,GFPsiR-NA明显抑制GFP蛋白产物和mRNA的表达(P<0·05)。结论特异性siRNA能高效沉默人肝癌细胞转染基因的瞬时表达,为基因治疗提供了一种新的治疗策略。     

YMDD变异受体肝移植术后乙型肝炎病毒再感染的预防

目的 探讨YMDD变异受体肝移植术后乙型肝炎病毒(HBV)再感染的预防方法.方法 2004年3月～2006年5月本中心20例术前合并YMDD变异的肝移植受体给予口服阿德福韦酯(ADV)联合肌肉注射乙肝免疫球蛋白(HBIG)作为预防方案,持续监测术前及术后的移植肝功能、血清HBV标志物、HBV-DNA定量、血肌酐等.结果 患者术后平均随访33.5个月,除1例死于肝癌复发外,其余患者均存活.术前HBV-DNA≥106copies/m1患者YMDD变异率为12.4%,HBV-DNA<106copies/ml患者为2.5%,两组间差异有统计学意义(P<0.05).95.0%(19/20)的患者于肝移植术后4周内HBV-DNA转阴性,5.0%(1/20)于术后6个月转阴性.此后长期复查HBsAg、HBeAg、HBV-DNA均阴性.所有患者均未出现HBV再感染.1例患者在服用ADV 1年后出现血肌酐水平持续增高.结论 应用ADV可有效预防YMDD变异受体肝移植术后HBV再感染.ADV有较低的肾毒性,用药期间仍需定期监测肾功能.     

肝移植术后应用重组生长激素对急性排斥反应的影响

目的　探讨临床肝移植术后早期应用rhGH对排斥反应的影响。方法　对 30例肝移植患者随机抽取其中 15例作为观察组 ,15例作为对照组 ,观察组于术后第 1天开始连续 7d每天 1次皮下注射重组人生长激素10u ,其他治疗与对照组相同。术后 1,4 ,8,14d测定免疫学指标及临床观察。结果　观察组血清GH及IGF - 1水平较对照组显著升高 (n=15 ,P <0 0 5 ) ,同时两组血清IgG ,IgM ,IgA ,IL - 2水平CD4 /CD8值及急性排斥发生率差异均无显著性 (n=15 ,P >0 0 5 )。结论　观察组与对照组的细胞免疫与体液免疫指标及急性排斥发生率差异无显著性。     

肝或肾移植术后受者再次行一期肝肾联合移植三例报告

目的 探讨肝或肾移植术后受者再次行一期肝肾联合移植的手术适应证、术后并发症及存活情况.方法 对2003年10月至2008年12月施行的3例肝或肾移植术后再次行一期肝肾联合移植的受者进行随访,并进行文献复习.对其围手术期死亡率、术后并发症及存活情况进行总结.结果 围手术期死亡率为33.3%(1/3).术后并发症:1例因腹腔出血术后第29天死于肺部感染、急性移植肾功能衰竭和多器官功能衰竭;3例患者均发生了肺部感染;无急性排斥反应发生.2例存活患者,从首次移植计算,已经分别存活56个月和228个月;从一期肝肾联合移植计算,已经分别存活40个月和48个月.结论 肝肾联合移植是治疗终末期肝肾疾病的有效方法.肝或肾移植术后受者再次行一期肝肾联合移植是可行的.     

肝移植术后胆管狭窄介入治疗的疗效评价

目的 评价原位肝移植（OLT）术后胆管狭窄（BS）介入治疗的疗效。方法 回顾分析2003年10月至2006年1月本中心53例OLT术后BS介入治疗的疗效。53例BS患者共接受经十二指肠镜逆行胆管造影（ERC）介入治疗107次，包括鼻胆管引流术68次、球囊扩张及胆管内支架术26次和胆管造影术13次。其中9例患者接受经皮肝穿刺胆管造影（PTC）介入治疗11次，包括PTC2次、PTCD7次、球囊扩张术3次及胆管内支架术1次。1例行经“T”管置管引流术。结果 ERC手术成功率为88、8％（95／107），鼻胆管引流术成功率为94％（64／68），胆管内支架术的成功率为88．5％（23／26）。PTC手术成功率为81．8％（9／11），PTCD成功率为100％（7／7），胆管支架术成功率为100％（1／1）。53例BS的介入治疗治愈率为28，3％（15／53），好转率为41、5％（22／53）。吻合口型、肝外型、肝内型、肝门型及弥漫型BS介入治疗的治愈率分别为66．7（4／6）、66．7％（10／15）、50％（1／2）、0（0／7）及0（0／22）。结论 目前OLT术后BS介入治疗的疗效尚不理想。介入治疗的疗效与BS类型密切相关，吻合口狭窄、肝外型和肝内单发型BS的疗效较好，肝门型和弥漫型BS的疗效较差。     

原位肝移植术后胆管狭窄的治疗(附43例报告)

目的探讨原位肝移植（0LT）术后胆管狭窄（BS）治疗方法和疗效。方法回顾性分析中山大学附属第三医院肝脏移植中心2003年10月至2005年10月收治的们例OLT术后BS的治疗方法及其疗效。们例BS的治疗方法主要包括经十二指肠镜逆行胆管造影（ERC）、经皮肝穿刺胆管造影（PTC）、经T管的胆管介入治疗、胆肠吻合术、肝动脉内支架术及再次肝移植术。结果们例BS总治愈率为48．8％（21／43），好转率为30．2％（13／43），总有效率为79．0％（34／43）。41例BS的介入治疗治愈率为34．1％（14／41），好转率为31．7％（13／41），总有效率为65．8％（27／41）。吻合口型、肝外型、肝内型及肝内外混舍型BS的总治愈率分别为100％（5／5）、64．3％（9／14）、50．O％（1／2）及28．6％（6／21），其介入治疗的治愈率分别为80．0％（4／5）、64．3％（9／14）、50．0％（1／2）及0。12例BS行再次肝移植术的治愈率为50．0％（6／12）。结论目前OLT术后BS总体疗效尚不理想。BS介入治疗效果与其类型密切相关，吻合口型疗效最好，肝外型和肝内型次之，肝内外混舍型疗效最盖。再次肝移植是治疗难治性BS的有效方法，但要选择好手术时机。     

大鼠肝移植急性排斥反应时T淋巴细胞免疫相关基因表达的基因芯片研究

目的 从基因水平了解T淋巴细胞在急性排斥反应中作用的分子机制。方法 建立大鼠肝移植急性排斥反应模型，并设对照组，利用4096条大鼠cDNA克隆的基因芯片从来自排斥组和对照组的T淋巴细胞中抽提、纯化mRNA，逆转录成cDNA，荧光标记后与芯片杂交，扫描后筛选出差异表达的基因。结果 在4096个基因中共发现差异表达基因190条，其中10条差异表达明显、已知功能的免疫相关基因为：主要组织相容性复合物(3条)和CD3抗原(1条)相关基因；干扰素调节因子1、上皮生长因子受体、转化生长因子相关基因各1条；白细胞蛋白酶抑制因子、急性期蛋白抑制因子3相关基因各1条；补体因子1基因1条。结论 T淋巴细胞在肝移植术后急性排斥反应中的作用机制涉及多个基因；基因芯片技术是一种高效、稳定的方法。     

再次肝移植治疗移植肝失功能22例报告

目的 总结再次肝移植治疗移植肝失功能的临床经验。方法 回顾分析2004年1月至2006年6月期间中山大学附属第三医院施行22例再次肝移植受者的临床资料，结合文献加以讨论。再次肝移植的原因分别为移植术后胆道并发症（12例）、移植术后肝癌复发（4例）、肝动脉栓塞（2例）、肝动脉狭窄（2例）以及乙肝复发（2例）。再次移植率为3．62％，供肝植入均采用改良背驮式肝移植技术。结果 全组无手术死亡，8例随访至今分别存活21、14、8、3个月各1例，12、1个月各2例；14例存活2周到28个月不等。首次肝移植术后8～30d行再次肝移植病人围手术期病死率最高，为66．7％；1年内死亡10例，主要死亡原因为感染（60％）。结论 再次肝移植是移植肝失功能的惟一有效的治疗方法，正确掌握手术时机及适应证，钻研手术技巧，合理的个体化免疫抑制方案以及围手术期有效的抗感染治疗是提高再次肝移植病人存活率的关键。