四妙丸联合非甾体抗炎药治疗湿热型强直性脊柱炎的临床研究

目的探讨四妙丸加减联合非甾体抗炎药治疗湿热型强直性脊柱炎的临床疗效,并观察其对血清基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)和组织金属蛋白酶抑制剂-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)的影响。方法选择100例于本院风湿科治疗的湿热型强直性脊柱炎患者,利用随机数字表法将其分为对照组和观察组,每组50例。对照组采用常规非甾体抗炎药物治疗,观察组在对照组治疗基础上采用四妙丸加减治疗。比较2组治疗前后的临床疗效、中医症状评分、炎性指标及特异性血清MMP-9、TIMP-1的水平变化。结果治疗后,观察组临床总有效率显著高于对照组(P0.05)。治疗后,观察组大便溏泄、口不渴、关节冷痛、四末不温、僵紧、僵痛等中医症状评分均较前明显下降(P0.05),对照组仅僵紧、僵痛评分较前下降(P0.05);与对照组比较,观察组大便溏泄、口不渴、四末不温、关节冷痛评分均显著下降(P0.05)。治疗后,2组炎性指标均较治疗前明显降低(P0.05),且观察组降低程度明显大于对照组(P0.05);治疗后,观察组血清MMP-9、TIMP-1水平较治疗前及对照组明显降低(P0.05)。结论四妙丸加减联合非甾体抗炎药能显著改善湿热型强直性脊柱炎患者临床症状,改善血清MMP-9、TIMP-1水平,提高临床疗效。     

中药酊剂临床外用技术规范(草案)

基于对中药酊剂外用技术的数据挖掘,结合临床实际应用研究,经外治学会专家多次论证,形成中药酊剂临床外用技术规范(草案),包括临床适用范围、操作步骤以及外用酊剂的方法、剂量、频率、时间、注意事项、不良反应及护理要点。以期规范中药外用酊剂的临床应用,提高其疗效并减少不良反应。     

南星骨痛凝胶贴膏对兔膝骨关节炎关节形态及血清IL-1、TNF-α、MMP-13、TIMP-1表达的影响

目的观察南星骨痛凝胶贴膏对兔膝骨关节炎关节形态及血清IL-1、TNF-α、MMP-13、TIMP-1表达的影响,探讨南星骨痛凝胶贴膏治疗兔膝骨关节炎可能的作用机制。方法 18只健康6月龄新西兰兔随机分成3组:空白组(A组)、模型组(B组)、骨痛膏治疗组(C组). BC组用3%木瓜蛋白酶关节腔内注射造模后C组给予南星骨痛凝胶贴膏外敷,给药4周后,用Aloka Latheta LCT-200观察兔膝骨关节影像学改变、用ELISA法检测血清IL-1、TNF-α、MMP-13、TIMP-1含量。结果 C组兔膝关节病变程度较B组轻,C组兔血清中IL-1、TNF-α、MMP-13含量较B组降低(P<0. 05),TIMP-1含量较B组升高(P <0. 05)。结论南星骨痛凝胶贴膏能减轻兔膝关节骨关节炎病变程度,对关节软骨有保护作用,其作用机制可能与抑制炎症因子IL-1、TNF-α及MMP-13表达,增加TIMP-1表达有关。     

荔枝核总黄酮对大鼠肝星状细胞增殖抑制作用及对PPARγ、C-ski表达的影响

目的:研究荔枝核总黄酮(total flavone from litchi,TFL)对大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)增殖的抑制作用及对过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome prolif-erator-activated receptor-γ,PPAR-γ)、C-ski表达的影响,探究荔枝核总黄酮抗肝纤维化的可能作用机制。方法:体外培养HSC,分为空白对照组、荔枝核总黄酮浓度20 mg·L~(-1)组、40 mg·L~(-1)组、80 mg·L~(-1)组、160 mg·L~(-1)组、200 mg·L~(-1)组,分别干预48 h后,通过CCK-8法检测每组细胞的增殖情况。再设置为空白组、PPARγ天然配体前列腺素J2(15-d-PGJ2)对照组(5μmol·L~(-1))、15-d-PGJ(2 5μmol·L~(-1))+TFL(100μmol·L~(-1))对照组、TFL组(100μmol·L~(-1)),ELISA法检测每组细胞中Smad3/4的含量;qPCR法检测每组细胞中PPAR-γ、C-ski mRNA的表达。结果:CCK-8结果显示,在作用时间相同的情况下,随着TFL作用剂量的增加,药物对细胞增殖的抑制率增高(P0.05);ELISA结果显示,TFL实验组中的Smad3/4含量明显降低(P0.05);qPCR结果显示,TFL实验组中PPARγ、C-ski mRNA的表达量均明显增加(P0.05)。结论:荔枝核总黄酮能够抑制HSC-T6细胞增殖,降低细胞外基质分泌,该机制可能与抑制HSC-T6细胞中的Smad3/4含量,上调PPAR-γ及C-ski mRNA表达相关。     

腰椎间盘突出症患者外周血及髓核组织CXCL10/CXCR3和TNF-α及MMP1表达临床意义研究

目的腰椎间盘突出症(lumbar disc herniation,LDH)是临床中常见骨科疾病,以腰腿疼痛为主要临床表现。本研究探讨外周血及髓核组织中干扰素诱导型蛋白-10(interferon-inducible protein-10,CXCL10)、CXCL10受体(CXCL10receptor,CXCR3)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、基质金属蛋白酶-1(matrix metalloproteinase1,MMP1)对LDH发病和术后复发风险的预测价值。方法选取2014-08-01-2017-8-31山东医专附属医院及沂水中心医院收治的80例行髓核摘除手术LDH患者为病例组,另选取40例行手术治疗的腰椎骨折患者为对照组。对比外周血和髓核组织中CXCL10、CXCR3、TNF-α和MMP1水平,并采用Pearson相关性分析法分析MMP1与CXCL10、CXCR3和TNF-α相关性。对比术后1年复发组与未复发组患者CXCL10、CXCR3、TNF-α和MMP1水平,并采用Logistic回归分析法确定术后复发的危险因素。结果病例组与对照组相比,外周血及髓核组织CXCL10、CXCR3、TNF-α和MMP1水平均较高,均P0.05;病例组外周血及髓核组织中MMP1与CXCL10、CXCR3、TNF-α均呈显著正相关,均P0.05;复发组与未复发组相比,外周血及髓核组织CXCL10、CXCR3、TNF-α和MMP1水平均显著较高,均P0.05;多因素分析结果显示,年龄≥60岁(OR=3.846,95%CI为2.379～5.313,P0.001)、病程≥4年(OR=2.433,95%CI为1.225～3.640,P0.001)、术后早期不适当运动(OR=2.547,95%CI为1.354～3.740,P0.001)、外周血CXCL10≥326.50pg/mL(OR=2.759,95%CI为1.153～4.366,P=0.005)、CXCR3≥283.61pg/mL(OR=2.319,95%CI为1.159～3.478,P=0.003)、TNF-α≥193.00pg/mL(OR=2.509,95%CI为1.260～3.759,P=0.001)、MMP1≥18.20ng/mL(OR=2.849,95%CI为1.567～4.131,P0.001)、髓核组织CXCL10≥852.40pg/mL(OR=3.476,95%CI为2.654～4.299,P0.001)、CXCR3≥423.22pg/mL(OR=3.885,95%CI为2.685～5.084,P0.001)、TNF-α≥17.21pg/mL(OR=2.575,95%CI为1.371～3.834,P0.001)、MMP1≥276.54ng/mL(OR=2.497,95%CI为1.117～3.877,P0.001)均是导致LDH患者术后复发的危险因素。结论 LDH患者外周血及髓核组织中CXCL10、CXCR3和TNF-α水平异常较高,与MMP-1正相关,可能导致术后复发。     

复肾功方对慢性肾衰竭大鼠Wnt/β-catenin信号途径的影响

目的:观察复肾功方对慢性肾衰竭(CRF)大鼠分泌型糖蛋白(Wnt)/β-连环蛋白(β-catenin)信号途径的影响,探讨其减少细胞外基质(ECM)的沉积,抗肾小管间质纤维化(TIF)及延缓CRF进展的作用机制。方法:将55只雄性SD大鼠随机将分为正常组,模型组,复肾功方低、中、高剂量组,每组11只。正常组常规饲养,其余4组大鼠则用腺嘌呤含量为0.5%的饲料建立CRF模型,连续喂养21 d。造模成功后所有大鼠改用常规饲料,正常组和模型组大鼠给予20 mL·kg~(-1)生理盐水灌胃;复肾功方低、中、高剂量组大鼠则按体质量分别灌胃4,8,16 g·kg~(-1)复肾功方水煎剂,1次/d,连续灌胃30 d。实验结束后,马松(Masson)染色观察大鼠肾组织病理形态学变化;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肾组织Wnt4,β-catenin mRNA的表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肾组织Wnt4,β-catenin,基质金属蛋白酶-7(MMP-7)蛋白的表达,免疫组化检测肾组织Wnt4,β-catenin蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠肾小管间质纤维化明显增多,肾组织Wnt4,β-catenin mRNA及Wnt4,β-catenin,MMP-7蛋白的表达均显著升高(P0.01);与模型组比较,复肾功方各组大鼠肾组织Wnt4,β-catenin mRNA及Wnt4,β-catenin,MMP-7蛋白表达均明显降低(P0.05)。结论:复肾功方减少ECM的沉积、抗肾小管间质纤维化、延缓CRF进展可能与抑制Wnt/β-catenin信号途径的激活有关。     

MMP-9基因rs17576位点多态性与汉族女性乳腺癌易感性的相关性

目的探讨基质金属蛋白酶-9 (MMP-9)基因rs17576位点多态性与汉族女性乳腺癌易感性的相关性。方法收集2013-2016年黑龙江省齐齐哈尔和大庆地区的282例乳腺癌患者和302例对照组女性,计算两组等位基因及基因型频率。结果两组MMP-9基因rs17576位点等位基因和基因型分布比较差异均有统计学意义(均P0. 05)。校正混杂因素后,基因型AA和显性模型下对乳腺癌的风险预测值分别为2. 869 (95%CI:1. 512～5. 447,P=0. 001)和2. 809 (95%CI:1. 513～5. 214,P=0. 001)。3组肿瘤分期和淋巴结转移阳性率比较差异均有统计学意义(均P0. 05),3组肿瘤大小、雌激素受体阳性率、孕激素受体阳性率和病理分型比较差异均无统计学意义(均P0. 05)。结论 MMP-9基因rs17576位点多态性与乳腺癌易感性存在一定相关性,AA基因型是乳腺癌发病的危险因素,rs17576位点多态性与乳腺癌淋巴结转移和肿瘤分级具有相关性。本研究所取得的阶段性数据可以为本地区女性群体乳腺癌易感基因的筛选及发病风险评估提供前期研究数据,为乳腺癌的个体化防治和诊断做出贡献。     

高血压性脑出血中医辨证分型与血清MMP-9、Hcy及GCS评分关系分析

目的:探讨高血压性脑出血患者中医辨证分型与血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、高同型半胱氨酸(Hcy)及格拉斯哥昏迷指数(GCS)评分关系。方法:选取2018年7月～2019年10月在我院接受治疗的104例高血压性脑出血患者为研究对象。选取同期在我院体检的100例健康人为对照组。检测两组患者血清Hcy、MMP-9、GCS评分及血脂指标,分析其与高血压性脑出血患者中医分型的关系。结果:高血压性脑出血患者各中医分型组的TC、TG及LDL-C水平高于对照组(P0.05);各组HDL-C水平比较无差异(P0.05);血清TC、TG及LDL-C水平在风痰淤阻、阴虚风动、痰热腑实、风痰火亢、风火上扰组中依次升高(P0.05)。高血压性脑出血患者各中医分型血清MMP-9、Hcy均高于对照组,而GCS评分均低于对照组(P0.05);血清MMP-9、Hcy在风痰淤阻、阴虚风动、痰热腑实、风痰火亢、风火上扰组中依次升高(P0.05)。结论:血清Hcy、MMP-9及血脂水平与高血压性脑出血患者中医分型存在相关性,可作为诊断的辅助指标,可在临床推广应用。     

放射性肺纤维化基质重构与肌成纤维细胞凋亡抵抗的相关性

目的肌成纤维细胞(MFB)凋亡抵抗是肺纤维化进行性发展的关键原因,但MFB发生凋亡抵抗的机制尚未明确。MFB的状态与微环境-细胞外基质密切相关,而纤维化时细胞外基质呈现硬化、重构的特征。前期研究发现,体外3D拟基质不能诱导MFB凋亡抵抗。本研究通过制作去细胞基质(DM)而真实呈现肺基质结构特征,以探讨放射性肺纤维化(RIPF)基质重构与MFB凋亡抵抗的相关性。方法 C57BL/6小鼠全肺照射(总剂量18 Gy)形成RIPF模型;照射后2个月收取肺组织,采用化学加酶学方法制备DM;将分离获得的肺原代纤维细胞分别培养于不同组的DM切片上,TUNEL法比较细胞凋亡情况,组学技术比较转录水平的差异,Western印迹和免疫荧光法检测FAK,AKT和Bcl-2水平。结果 (1)小鼠胸部照射后2个月收集肺组织样本,免疫荧光染色显示,MFB(α-SMA+)表达Bcl-2增强,表现抗凋亡特征。(2) HE染色、电镜检测显示肺组织DM在体外重现肺纤维化基质紊乱、重构的原貌。(3)分别收集培养在正常组DM切片(C-DM)和RIPF组DM切片(RIPF-DM)上的肺纤维细胞,发现RIPF-DM上的MFB凋亡比例低于C-DM,活化胱天蛋白酶3/胱天蛋白酶3下调;KEGG通路富集发现,RIPF-DM可诱导MFB中PI3K-AKT-CREB通路水平上调。(4) Western印迹结果证实,RIPF-DM可上调pFAK/FAK,p-AKT/AKT和Bcl-2水平。结论 RIPF基质重构可诱导MFB凋亡抵抗,其机制与AKT通路上调有关。