右美托咪啶复合帕瑞昔布对胆总管结扎大鼠术后血管新生相关因子表达的影响

目的:观察右美托咪啶复合帕瑞昔布对肝肺综合征动物模型胆总管结扎(CBDL)大鼠术后血管新生相关因子:VEGF、SDF-1、CX3CL1表达的影响。方法:选择200 g左右雄性SD大鼠,随机分为四组:Sham手术组(S组)、CBDL手术组(C组)、CBDL+右美托咪啶组(D组)、CBDL+右美托咪啶复合帕瑞昔布组(DP组)。CBDL术后,D组每日尾静脉注射10μg/kg右美托咪啶;DP组每日静脉注射10μg/kg右美托咪啶+10 mg/kg帕瑞昔布;C组及S组每日静脉注射等量生理盐水。分别于术后7、14、21 d采用ELISA检测血浆及匀浆肺组织上清液中VEGF、SDF-1、CX3CL1的表达水平。结果:与S组相比,C组血浆和肺组织SDF-1以及CX3CL1在各个时间点的表达均明显升高,而VEGF仅在术后21 d高于S组。C组和D组相比,血浆和肺组织中各时间点VEGF和CX3CL1的表达水平均无统计学差异(P>0.05),其中SDF-1的表达仅在术后7 d有统计学差异(P<0.05)。而DP组与C组相比,术后各时间点血浆及肺组织VEGF、SDF-1和CX3CL1表达均明显降低(P<0.05)。术后21 d动脉血气分析结果显示:与C组相比DP组动脉血氧分压(PO_2)明显升高,肺泡动脉氧分压差(AaPO_2)明显下降(P<0.05),而D组与C组相比无统计学差异(P>0.05)。病理结果同样显示DP组可明显减轻CBDL大鼠肺组织炎性细胞浸润和肺内新生血管数量,而C组无明显作用。结论:右美托咪啶复合帕瑞昔布能明显降低CBDL大鼠术后血浆及肺组织中血管新生相关因子的表达,并一定程度改善CBDL大鼠的动脉血氧合功能。     

萆苓祛痛方对糖尿病痛风大鼠骨骼肌组织SIRT3蛋白表达及URAT1 mRNA的影响

目的:探讨萆苓祛痛方对糖尿病痛风大鼠骨骼肌组织去乙酰化酶3(SIRT3)蛋白表达及尿酸盐转运体1(URAT1) mRNA的影响。方法:选择健康雄性大鼠40只,除正常组外,其余组予高脂饲料喂养并联合小剂量链脲佐菌素(STZ)溶液40 mg·kg-1腹腔注射1次,以血糖≥16. 7 mmol·L-1,为糖尿病模型。4 d后关节腔注射5%尿酸钠溶液1次,诱导痛风模型,模型成功后,分为萆苓祛痛方组(萆苓组,10 g·kg-1),吲哚美辛组(5 mg·kg-1),吡格列酮组(10 mg·kg-1),均连续给药21 d,正常组、模型组予等量生理盐水;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)测定骨骼肌组织SIRT3蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测骨骼肌组织URAT1 mRNA表达,并进行病理检查,取血测定血糖(GLU),血尿酸(UA)及C反应蛋白(CRP)含量。结果:与正常组比较,模型组GLU,UA及CRP明显升高(P 0. 01);与模型组比较,萆苓组、吡格列酮组血糖下降(P 0. 05);各药物组UA及CRP明显下降(P 0. 01)。与正常组比较,模型组骨骼肌SIRT3蛋白表达量显著降低(P 0. 01);与模型组比较,萆苓组骨骼肌SIRT3蛋白表达量显著提高(P 0. 01),与西药组比较无明显差异;条带图的结果同样显示,与正常组比较,模型组表达亮度明显减弱,药物组表达亮度明显增强;与正常组比较,模型组关节组织URAT1 mRNA相对表达量明显升高(P 0. 01);与模型组比较,各药物组URAT1 mRNA相对表达量显著下调(P 0. 01)。电泳图同样提示,正常组表达亮度减弱,模型组表达亮度显著增强,萆苓组、西药组表达亮度明显减弱。关节病理提示,与正常组比较,模型组大鼠关节病理损伤严重,可见大量炎细胞浸润及纤维增生,滑膜细胞变性、坏死。与模型组比较,萆苓祛痛方关节病变程度明显减低,见少量炎细胞浸润,滑膜上皮轻度增生。结论:具有泻浊解毒通络作用的萆苓祛痛方可显著提高糖尿病痛风大鼠骨骼肌组织SIRT3的蛋白表达量,下调URAT1 mRNA的表达量,减轻骨骼肌组织病理损伤,减低血清炎症因子CRP的含量,降低模型大鼠的血糖、血尿酸水平,有保护关节功能的作用。     

真武汤合苓桂术甘汤改善心肾综合征大鼠模型水钠潴留的作用机制研究

[目的]研究真武汤合苓桂术甘汤对心肾综合征大鼠模型水钠潴留的作用机制。[方法]将60只雄性SD大鼠随机分为两组,即空白组与手术组,空白组大鼠常规饲养,手术组大鼠经5/6肾切除联合异丙肾上腺素皮下注射制备心肾综合征模型,剔除死亡大鼠后,将手术组剩余成模大鼠按体质量分层随机分为空白组、中药组、常规治疗组。中药组给予真武汤合苓桂术甘汤灌胃,给药量为7.29 g生药/(kg·d);常规治疗组给予贝那普利(0.45 mg/kg)+呋塞米(1.8m g/kg);空白组予以等容积生理盐水灌胃,每日1次,连续6周。观察实验过程中各组大鼠的精神状态、活动情况、灵敏度、毛发情况、食欲、大小便等一般情况及死亡情况,比较各组灌胃前、灌胃6周后的血清脑钠肽(BNP)、血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)、尿水通道蛋白2(AQP2)的前后差值情况。[结果]灌胃6周后,中药组大鼠一般情况较灌胃前改善、喘息不明显,常规治疗组一般情况同样较灌胃前改善。通过比较治疗前后各组大鼠实验室指标差值发现,中药组与常规治疗组BNP均下降,中药改善大鼠心力衰竭情况接近常规治疗组水平,两组下降水平无统计学差异(P0.05);中药组Scr水平较前下降,常规治疗组Scr水平升高;中药组尿AQP2水平较前略增高,与空白组尿AQP2水平无统计学差异(P0.05),常规治疗组尿AQP2水平较前明显升高。[结论]心肾综合征大鼠尿AQP2的表达主要由肾脏调控,AQP2可作为心肾综合征水钠潴留状态的参考指标,真武汤合苓桂术甘汤改善心肾综合征大鼠水钠潴留状态的作用机制可能是通过抑制大鼠肾脏AQP2过度表达,减少水的重吸收,改善了水钠潴留状态。     

探讨线栓法建立大鼠局灶性脑缺血模型的影响因素

目的:为了提高线栓法制备大鼠局灶性脑缺血模型成功率,探讨大鼠局灶性脑缺血模型的有效方法及影响因素。方法:为观察高温外环境对造模的影响,将外环境温度控制在(25±1)℃和在夏季未控制外环境温度(30℃以上)分为温度控制组(n=15)和非温度控制组(n=15),其他制作过程一致;为观察栓线从颈总动脉和颈外动脉插入对造模的影响分为颈总动脉插入组(n=15)和颈外动脉插入组(n=15),其他制作过程一致;为观察术中术后2h内老鼠苏醒活跃状态对造模的影响分为麻醉状态组(n=15)和苏醒活跃状态组(n=15),其他制作过程一致。从造模24h后观察Zea-Longa评分在1～3分的大鼠且7d内观察大鼠未死亡视为造模成功。结果:在外环境温度控制在(25±1)℃组与夏季未控制外环境温度(30℃以上)比较,差异无统计学意义(P=0. 107> 0. 05);线栓从颈总动脉插入比从颈外动脉插入存活率高,具有统计学意义(P=0. 025 <0. 05);术后2h内大鼠处于苏醒活跃状态组死亡率高,与麻醉未清醒状态组比较差异具有统计学意义(P=0. 021 <0. 05)。结论:直接分离出颈总动脉(CCA)并从颈总动脉插入具有易操作、创伤性小、操作时间快、进线栓快、进线栓顺利以及模型稳定等优点,能降低造模的死亡数据;术中术后2h内大鼠处于苏醒活跃状态会对模型大鼠造成较大的刺激,造成死亡率增加。