K1和K2血清型肺炎克雷伯菌耐药性与可移动遗传元件研究

目的分析K1型肺炎克雷伯菌和K2型肺炎克雷伯菌的耐药基因和可移动遗传元件的分布。方法收集南昌大学第一附属医院2015年1月-2017年12月分离735株非重复肺炎克雷伯菌作为实验菌株,筛选出63株K1型肺炎克雷伯菌和29株K2型肺炎克雷伯菌,进行药物敏感性分析,PCR检测13种耐药基因和13种可移动遗传元件标记。结果 K1、K2血清型肺炎克雷伯菌对头孢唑林和头孢曲松耐药率较高,>20%,对其他抗菌药物都表现较高的敏感性,但出现耐碳青霉烯类药物的肺炎克雷伯菌;K1、K2血清型肺炎克雷伯菌acc6-Ib-cr和qnrS携带率较高,对其他耐药基因的携带率较低,但出现2株K1型和2株K2型携带KPC基因;除厄他培南和SHV基因外,K1型和K2型肺炎克雷伯菌对其它抗菌药物的耐药率和耐药基因的携带率差异无统计学意义,但K1型肺炎克雷伯菌对大部分抗菌药物的耐药率和耐药基因的携带率均低于K2型肺炎克雷伯菌;可移动遗传元件检出1种接合性质粒标记基因,1种整合子标记基因,4种插入序列标记基因,以traC基因和intI1基因阳性率最高。结论 K1、K2血清型肺炎克雷伯菌对大部分抗菌药物敏感性较高,耐药基因阳性率低,可移动遗传元件携带率较低;K1型和K2型高毒力肺炎克雷伯菌耐药表型的出现可能与携带可移动遗传元件相关。     

E-钙黏蛋白在人非小细胞肺癌细胞多西他赛耐药中的作用

目的:探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)A549、H1299、H358、H441多西他赛（docetaxel，DTX）耐药细胞株与上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）的关系，并初步研究逆转E-cadherin的表达对NSCLC细胞多西他赛耐药性的影响。方法:应用Real-time PCR 和Western blot 方法检测上皮间质转化相关标志物E-cadherin、Vimentin、N-cadherin、Snail在亲本细胞和多西他赛耐药细胞之间的表达差异；应用慢病毒载体介导构建稳定表达E-cadherin的NSCLC多西他赛耐药细胞；MTS法检测NSCLC细胞多西他赛耐药特性。结果:与A549、H1299、H358、H441四株亲本细胞相比，多西他赛耐药细胞（A549DTX，H1299DTX，H358DTX，H441DTX）形态呈长梭形，呈上皮间质转化（EMT）样改变。多西他赛耐药细胞中E-cadherin表达下调，Vimentin、N-cadherin、Snail表达上调。成功构建了过表达E-cadherin的NSCLC多西他赛耐药细胞。过表达E-cadherin细胞株细胞形态与空载对照细胞株以及亲本耐药细胞株相比呈间质上皮转化(MET)样改变。MTS结果显示四种不同E-cadherin过表达的NSCLC多西他赛耐药细胞对多西他赛的敏感性均强于其亲本耐药细胞和空载对照细胞。结论:NSCLC多西他赛耐药细胞发生EMT样改变，上调E-cadherin能增加NSCLC多西他赛耐药细胞对多西他赛的敏感性。     

血流感染肺炎克雷伯菌中CRISPR-Cas系统的分布及其与毒力基因和耐药的关系

的 了解血流感染肺炎克雷伯菌中CRISPR-Cas系统的分布特征并分析其与毒力基因和耐药的关系。方法 收集非重复血流感染肺炎克雷伯菌248株，使用Vitek2-Compact全自动微生物分析系统进行菌株鉴定及药物敏感性分析，PCR检测CRISPR-Cas系统3个相关基因(CRISPR1、CRISPR2和cas1)、筛查6种常见高毒力荚膜血清型(K1、K2、K5、 K20、K54和K57)、12种毒力基因及检测13种耐药基因，用χ2检验比较携带有CRISPR-Cas系统菌株与不携带CRISPR-Cas系统菌株毒力及耐药差异。结果 CRISPR-Cas系统的检出率为29.8%(74/248)；K1型是携带CRISPR-Cas系统肺炎克雷伯菌的主要荚膜血清型，占 28.4%(21/74)；除kpn基因外，携带CRISPR-Cas系统菌株的毒力基因检出率均大于不携带CRISPR-Cas系统菌株，其中7种差异有统计学意义；除对氨苄西林耐药率达100%外，携带有CRISPR-Cas系统菌株的其他抗菌药物耐药率均小于不携带有CRISPR-Cas系统菌株，其中13种差异有统计学意义；携带CRISPR-Cas系统菌株的耐药基因阳性率小于不携带CRISPR-Cas系统的菌株，且blaKPC、blaSHV、qnrS基因差异有统计学意义。结论 高毒力荚膜血清型肺炎克雷伯菌中主要为K1型携带CRISPR-Cas系统，携带CRISPR-Cas系统的肺炎克雷伯菌相对于不携带CRISPR-Cas系统菌株的毒力基因阳性率高，耐药率低，耐药基因的阳性率低。CRISPR-Cas系统可能能降低耐药基因在肺炎克雷伯菌中的水平传播，尤其是在K1型肺炎克雷伯菌。     

支气管肺泡灌洗痰热清注射液治疗危重患者多重耐药鲍曼不动杆菌肺炎的疗效分析

目的:观察经纤维支气管镜(纤支镜)支气管肺泡灌洗痰热清注射液治疗危重患者多重耐药鲍曼不动杆菌(MDRAB)肺炎的疗效。方法:将64例MDRAB肺炎患者随机分成治疗组(32例)和对照组(32例),两组患者均给予亚胺培南西司他丁钠联合头孢哌酮钠舒巴坦钠抗感染等常规治疗,治疗组患者在常规治疗基础上给予纤支镜支气管肺泡灌洗痰热清注射液治疗,两组患者连续治疗14 d。观察两组患者治疗前和治疗7 d、14 d的血白细胞计数(WBC)、C反应蛋白(CRP)、灌洗液IL-6水平及氧合指数水平,比较两组患者影像学检测的肺部病灶改善效果和细菌检测的MDRAB清除效果,观察不良反应情况。结果:两组患者治疗后血白细胞计数(WBC)、C反应蛋白(CRP)和灌洗液IL-6水平均降低(P0.05),且治疗组患者治疗后血白细胞计数(WBC)、C反应蛋白(CRP)和灌洗液IL-6水平均低于对照组(P0.05)。两组患者治疗后氧合指数均高于治疗前(P0.05),且治疗组患者治疗后氧合指数高于对照组(P0.05);治疗组影像学检测的肺部病灶改善有效率为78.13%,明显高于对照组(56.25%)(P0.05);治疗组细菌检测的MDRAB清除率为71.88%,明显高于对照组(43.75%)(P0.05);两组患者治疗过程中均未发生危及生命的严重并发症。结论:纤支镜支气管肺泡灌洗痰热清注射液能有效降低危重患者多重耐药鲍曼不动杆菌性肺炎的炎症指标水平,改善患者氧合功能,清除肺部鲍曼不动杆菌,促进肺部感染病灶吸收。     

某三甲医院临床分离多药耐药菌流行病学分布及耐药性分析

目的分析某三甲医院临床分离多药耐药菌的分布情况及耐药特点,为多药耐药菌的预防和治疗提供临床依据。方法采用回顾性分析方法,收集2015年1月-2017年12月医院排名前五位多药耐药菌患者的临床资料,了解医院多药耐药菌种类、科室分布,行细菌培养和耐药性分析。结果临床分离1 086株多药耐药菌,排名前五位的多药耐药菌分别为:MDR-AB、MRSA、MDR-PA、耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌、耐碳青霉烯类大肠埃希菌。多药耐药菌检出科室分布以ICU为主(34.99%);标本种类以痰液为主(73.48%)。药敏结果显示:MDR-AB对大多数抗菌药物耐药率均在90%以上,替加环素最低11.5%;MRSA对万古霉素、利奈唑胺、替考拉宁、奎奴普丁/达福普汀、呋喃妥因耐药率为0;MDR-PA对检测的15种抗菌药物耐药率均在65%以上;CRE包括耐碳青霉烯类的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌对大多数抗菌药物耐药率均很高,对阿米卡星耐药率最低,分别为23.8%和0。结论近年来医院多药耐药菌耐药率较高。