Ag85A和GM—CSF DNA疫苗对小鼠原位膀胱癌细胞免疫功能的影响。

【目的】探讨联合应用Ag85A与粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子（GM—CSF）DNA疫苗对原位膀胱癌小鼠的细胞免疫的影响。【方法】以N-甲基亚硝基脲（MNU）灌注小鼠膀胱,建立小鼠原位膀胱癌模型。50只荷瘤小鼠随机分为5组：生理盐水组、空载体组、A。g85A组、联合应用组和BCG组。模型确定后d,、d。t天和dzt各肌注1次,末次注射后d,检测各组小鼠脾脏的cD4’和cD8’T细胞亚群数量及cD4。。／CD8’比值和血清7一干扰素（IFN一7）。【结果】单独应用Ag85A和联合应用Ag85A与GM-CSFDNA疫苗均能够升高CD4^＋和CD8^＋T细胞的百分比及CD4^＋和CD8^＋T的比值,提高血清IFN-7,差异具有统计学意义（P〈0．05）。联合应用的效果明显优于单独应用,差异具有统计学意义（P〈0．05）,但尚不及单纯应用BCG的免疫治疗效果。【结论】联合应用Ag85A与GM—CSF DNA疫苗能够提高荷瘤小鼠的细胞免疫功能,其效果明显优于Ag85 ADNA疫苗。     

HLA-B对喉癌Hep2细胞生物学行为的影响

目的探讨人类白细胞组织相容抗原（HLA）-B在喉癌发生、发展中的作用。方法采用RNA干涉技术下调Hep2细胞中HLA-B基因表达。用干涉效应最明显、转染siRNA的细胞作为观察组,转染PBS及无义siRNA的细胞作为对照1组及对照2组。采用流式细胞仪、MTT和细胞体外侵袭力分析方法检测各组细胞凋亡率、增殖情况、细胞周期及局部侵袭能力。结果 RNA干涉7 d观察组细胞凋亡率明显高于两对照组,细胞周期阻滞于S期;细胞增殖能力及局部侵袭能力明显强于两对照组,P均〈0.05。结论 HLA-B表达降低或缺失在喉癌的发生、发展中起促进作用。     

Mst1基因对人喉癌Hep2细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨Mst1基因对人喉癌Hep2细胞增殖和凋亡的影响及机制。方法以Hep2细胞为对照组,转染pcDNA3.1-Mst1的Hep2细胞为转染组,SB203580处理的Mst1转染细胞为处理组。采用MTT法测定三组细胞的增殖抑制率,双标流式细胞法检测其凋亡率,用Western blot法检测三组细胞中Mst1蛋白、磷酸化p38（p-p38）和总p38蛋白（t-p38）的表达情况。结果与对照组相比,转染组Mst1和p-p38蛋白表达增强明显t,-p38的表达无明显变化,凋亡率由2.46%升高至7.37%,细胞增殖抑制率为41.8%。与转染组相比,处理组p-p38蛋白表达增强降低t,-p38表达无明显变化,细胞凋亡率由7.37%降低至2.65%,细胞抑制率为-10.1%,细胞增殖活力显著降低。结论 Mst1基因能够通过p38 MAPK通路参与喉癌细胞凋亡和增殖的调控。     

神经科学基础整合课程教学改革的总结与思考

神经科学基础整合课题体系的建立是中国医科大学基础医学课程整合的重要组成部分.通过10余年的整合教学,与传统的医学课程教学方法相比较,从组织实施、师资力量建设和课程效果评价等方面总结了有利于整合课程教学的经验和成果,并应用于其它传统课程教学中,旨在促进整个医学基础教育的发展.     

MACC1基因与肾癌转移的相关性及其对细胞侵袭能力的影响

目的：探讨MACC1基因与肾癌转移的相关性,及其表达降低对肾癌细胞侵袭能力的影响。方法：应用荧光定量PCR检测原发未转移肾癌和原发伴转移肾癌组织中MACC1 mRNA的表达。设计并合成MACC1基因特异性的siRNA,转染肾癌Caki-1细胞,检测转染后MACC1蛋白的表达以及Caki-1细胞的侵袭能力。结果：原发伴转移肾癌组织中的MACC1 mRNA表达较原发未转移肾癌明显增加（P〈0.05）。siRNA-MACC1能够明显抑制Caki-1细胞中MACC1蛋白的表达（P〈0.05）。MACC1蛋白表达抑制的Caki-1细胞的侵袭能力明显降低（P〈0.05）。结论：MACC1基因与肾癌的转移相关,其表达抑制能够降低Caki-1细胞的侵袭能力。     

FUBP1基因在脑胶质瘤中的表达及其对U251细胞凋亡的影响

目的：研究FUBP1基因在脑胶质瘤中的表达及其对胶质瘤U251细胞凋亡的影响。方法：Real-time PCR检测35例脑胶质瘤及相应癌旁组织中FUBP1 mRNA的表达。设计并合成FUBP1基因特异性的siRNA,转染U251细胞。转染后,western blot检测转染后FUBP1蛋白的表达,双标流式细胞法检测细胞凋亡率。结果：与癌旁组织相比,FUBP1 mRNA在脑胶质瘤组织中表达明显上调。转染后,U251细胞中的FUBP1蛋白表达明显降低,同时,凋亡率明显增加。结论：FUBP1基因在脑胶质瘤中存在表达异常,其表达降低能够促进细胞凋亡。     

5-Aza-CdR对人喉鳞癌Hep2细胞凋亡及蛋白质表达的影响

目的:探讨5-Aza-CdR对人喉鳞癌Hep2细胞凋亡及蛋白质表达的影响。方法:Hep2细胞分别经10-7mol/L 5-Aza-CdR和DMSO处理72h,应用Hoechst33258染色及流式细胞仪检测5-Aza-CdR对Hep2细胞凋亡的影响。抽提各组Hep2细胞总蛋白质,行双向电泳,采用PDQuest-7.0.1软件及MALDI-TOF质谱技术筛查5-Aza-CdR对Hep2细胞蛋白表达的影响,并通过Western blot对显著性差异蛋白质进行验证。结果:人喉鳞癌Hep2细胞在10-7mol/L 5-Aza-CdR处理72h后出现明显的细胞核致密浓染,Hep2细胞的凋亡率由对照组的(2.70±0.28)%增加到(13.96±0.41)%,具有统计学意义(P<0.05)。双向电泳筛查了包括S100A4在内的5种表达显著差异的蛋白质,Western blot进一步验证了5-Aza-CdR能明显上调喉鳞癌Hep2细胞中S100A4的表达,进而证明了双向电泳结果的可信性。结论:5-Aza-CdR介导的Hep2细胞部分蛋白质表达改变,直接或间接地参与了5-Aza-CdR诱导的Hep2细胞凋亡的发生,为5-Aza-CdR在喉鳞癌探讨性治疗中的机制研究奠定基础。     

KCC1调控ERK通路对子宫内膜癌细胞侵袭能力影响的观察

目的:探讨K-CL共转运体(KCC)1基因在调节子宫内膜癌侵袭能力的过程中与细胞外信号调节激酶(ERK)转导途径相互作用机制。方法:将pcDNA-KCC1表达载体转染子宫内膜癌HEC-1B细胞,蛋白质印迹法检测KCC1、p-ERK1/2表达的变化;Transwell侵袭小室检测细胞侵袭能力的变化;ERK抑制剂U0126处理转染后的细胞,再通过上述方法检测p-ERK1/2表达及细胞侵袭能力的变化。结果:转染pcDNA-KCC1表达载体后,转染组细胞KCC1、p-ERK1/2蛋白表达明显上调(P<0.05),侵袭至滤膜下的细胞数由26.7±2.3增加到50.3±3.1,P<0.05;应用ERK抑制剂U0126处理实验组后,p-ERK1/2蛋白表达明显下调,侵袭至滤膜下的细胞数由50.3±3.1降低到30.8±5.9,P<0.05。结论:KCC1通过参与ERK信号转导途径调节子宫内膜癌细胞的侵袭能力。     

SP100基因在鼻咽癌中的表达

 目的 探讨SP100基因在鼻咽癌组织中的表达水平及其意义。方法 选取62例鼻咽癌组织及对应的癌旁黏膜组织标本,应用RT-PCR和Western blot方法检测标本中SP100基因mRNA和蛋白的表达情况。结果 与癌旁黏膜组织相比,鼻咽癌组织中的SP100基因的mRNA和蛋白的表达存在明显下调,差异具有统计学意义（P<0.05）。结论 SP100基因的表达改变与鼻咽癌相关,是一个新的候选的肿瘤抑制基因。     

肝癌衍生生长因子与膀胱癌转移的相关性及其对细胞侵袭能力影响

目的探讨肝癌衍生生长因子(HDGF)基因与膀胱癌转移的相关性,及其稳定表达对膀胱癌细胞侵袭能力的影响。方法应用荧光定量PCR检测原发未转移膀胱癌和原发伴转移膀胱癌组织中HDGF mRNA的表达。设计并合成HDGF特异性的siRNA,转染膀胱癌T24细胞系,检测转染后细胞侵袭能力的变化。结果原发伴转移膀胱癌组织中HDGF mRNA表达较原发未转移膀胱癌中明显上调(P0.05)。RNA干扰后,HDGF蛋白明显降低,细胞侵袭能力也随之明显降低(P0.05)。结论 HDGF基因与膀胱癌的转移相关,其表达下调能够抑制T24细胞的侵袭能力。