sICAM-1和GPC-3 mRNA对肝癌诊断与转移监测的临床价值

目的:定量分析肝病患者血可溶性细胞间粘附分子-1(sICAM-1)浓度和外周血单核细胞磷脂酰肌醇蛋白多糖-3(GPC-3)mRNA,探讨对肝癌(HCC)诊断与预后的价值.方法:收集住院肝病患者外周血,分离单核细胞,制备总RNA,经逆转录合成GPC-3cDNA,以荧光定量PCR扩增;并以酶联免疫吸附法(ELISA)定量分析血ICAM-1水平.结果:肝病发展过程中血ICAM-1表达呈梯度增加,HCC患者血ICAM-1表达显著高于肝硬化(t=3.184,P=0.002)和慢性肝炎患者(t=3.962,P<0.001),与伴门脉癌栓(t=2.941,P=0.005)及肝外转移(t=3.282,P=0.002)明显相关,与患者年龄、性别、HBsAg阳性与否、AFP浓度及肿瘤大小间未见明显相关.GPC-3mRNA阳性仅见肝癌患者(70.9%);肝硬化、慢性肝炎患者及正常对照组中未检出(2=26.773,P<0.001).GPC-3mRNA阳性表达与HBsAg阳性(2=14.601,P<0.001)、肝癌TNM分期(2=17.732,P<0.001)、伴门脉癌栓及肝外转移(2=22.271,P<0.001)显著相关,与瘤体直径、数目、AFP浓度及分化程度未见明显相关;两者可互补诊断,提高诊断肝癌阳性率.结论:sICAM-1和GPC-3mRNA检测是肝癌诊断和转移监测的良好标志物,且对AFP阴性肝癌具有互补诊断价值.     

小干扰RNA抑制核因子-κB活化对HepG2细胞凋亡的影响

目的 探讨小干扰RNA(SiRNA)抑制核转录因子(NF)-κB活化对肝癌细胞凋亡的影响.方法 化学合成NF-κB siRNA和阴性对照siRNA,脂质体法转染HepG2细胞,用巢式RT-PCR和荧光定量PCR检测NF-κB mRNA表达情况;免疫组织化学法、酶联免疫吸附法、Western b10t检测NF-κB蛋白表达情况;用磷脂结合蛋白V-异硫氰酸荧光素法检测细胞凋亡,分析NF-κB表达抑制和细胞凋亡间关系.多个样本均数间的比较先行方差齐性检验,方差齐时行单因素方差分析;计数资料比较采用确切概率法分析.结果 NF-κBp65 mRNA在HepG2细胞相对表达量为1.13±0.03,在正常肝细胞L02为0.29±0.07,两者比较,t=27.02,P<0.05,差异有统计学意义.利用NF-κB siRNA干扰可下调NF-κB表达,且呈剂量、时间依赖;NF-κB siRNA转染HepG2细胞72h后,NF-κBmRNA和蛋白表达分别下降了93%和62%,抑制NF-κB表达使HepG2细胞凋亡增加85%. 结论 NF-κB在肝癌细胞中高表达,NF-κB SiRNA能特异性抑制其在肝癌细胞中活化并促进癌细胞凋亡发生.     

肝缺氧诱导因子-1α与肝癌发生、发展及治疗研究新进展

失控的增殖导致缺氧(hypoxia)是肝细胞癌(HCC)形成的特征性微环境.缺氧可促进癌细胞增殖、转移、血管新生、抑制癌细胞分化、凋亡以及对放化疗耐受.缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)是介导生理性和病理性低氧反应的关键转录因子,在转录水平上调控百余种靶基因,参与调节血管新生及糖代谢等过程,与HCC生长、浸润、转移和预后等密切相关.近年来以HIF-1α为靶点的基因疗法如RNA干扰、反义技术和自杀基因技术等,成为HCC辅助治疗的新策略.本文综述了HIF-1α转录水平异常与HCC发生、发展及靶向HIF-1α基因治疗HCC的新进展.     

各类丙型肝炎病人基因分型的研究

各类丙型肝炎病人基因分型的研究姚登福孟宪镛ＩＳｈｉｍｉｚｕＳＩｔｏ丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）为输血后及散发性非甲、非乙型肝炎的主要致病原。流行病学调查及临床研究显示ＨＣＶ与肝癌（ＨＣＣ）发生的关系密切。南通地处长江下游肝癌高发区，肝病患者及不同人群中ＨＣ...     

人外周血心肌肌钙蛋白Ⅰ基因表达水平与心肌损伤程度的关系

目的:分子生物技术的发展,使监测心肌微小损伤成为可能。探讨外周血心肌肌钙蛋白Ⅰ(cardiactroponinⅠ,cTnⅠ)-mRNA对心肌损伤诊断的临床价值。方法:以电镜观察心肌损伤时的超微结构改变;从心肌组织和外周血中制备总RNA,以随机引物和反转录酶合成cTnⅠ-cDNA,再以巢式PCR扩增和测序分析;将cTnⅠ-mRNA扩增法用于临床诊断,与心肌酶谱(CK,CK-MB,AST,LDH)及cTnⅠ定性比较,以探讨其临床价值。结果:心肌损伤组织超微结构表现为心肌线粒体肿胀、嵴断裂、严重空泡样变及细胞核异形变、染色质浓缩边聚。巢式PCR法扩增cTnⅠ-mRNA片段的灵敏度为2μg/L,测序分析证实从心肌组织及外周血中扩增基因片段与原序列完全一致。对62例慢性心脏病患者外周血cTnⅠ-mRNA的扩增分析,其阳性率明显高于酶谱或cTnⅠ定性分析(P<0.05)。结论:心肌损伤时cTnⅠ-mRNA释放进入外周血,为心肌损伤诊断的敏感基因标志物。     

医院信息系统中护士工作站的平衡实施与功能发挥

计算机、通讯等信息技术与医院管理结合产生的医院信息系统，正推动和改进医院管理，促进医院现代化建设，以达到强化管理，提高效率，改进医疗质量的宗旨。我院护士工作站子系统的实施，逐步使全院向管理规范化、标准化和智能化方向发展，收到了明显的社会效益和经济效益。     

胃粘膜幽门螺杆菌多种方法检测及其比较分析

应用聚合酶链反应(PCR)扩增幽门螺杆菌(HP)特异性的DNA片段,并与组织学、涂片法、尿素酶法同步分析和比较.结果显示HP的PCR扩增产物经琼脂凝胶电泳,均为468bp的单一区带,与原设计一致;与组织学、涂片法和尿素酶法的同步检测,发现PCR法的敏感性为94.4%,明显高于组织学60.9%、涂片法77.8%和尿素酶法86.6%.提示PCR法能快速、敏感、特异地检测临床标本中的HP,对探讨HP与上消化道疾病之间的关系、指导抗菌治疗均具有重要意义.     

综合性医院内仪器设备资源共享体制的建立与体会

为加强实验室、研究室科研仪器的管理和提高其使用率，以市场为导向，切实转变管理模式，努力探索综合性医院内大型仪器设备资源共享体制改革之路，介绍了医院的具体做法：１．充分利用院内的设备资源；２．为科技人员解决实际问题；３．制定各项规章制度，保证研究工作顺利进行；４．优化配置，开展多项研究工作。     

HCV感染,核心基因变异与肝癌关系的研究

丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染的防治是全世界的医学难题。短短数年间世界范围内已有数十个病毒株被全部或部分解析，证明ＨＣＶ属于高变异病毒，它的基因型与地理分布、临床表现、预后以及疗效间有着较密切的关系。流行病学资料及临床研究显示，ＨＣＶ感染后极易引起慢性化...