湖南省手足口病普通病例EV71阳性率与重症率的曲线回归分析

目的 探索湖南省2011年1月~2015年12月手足口病普通病例EV71阳性率与重症率之间的关联。方法 应用SPSS 18.0对2011-2014年的肠道病毒71型（enterovirus,EV71）阳性率与重症率建立直线回归模型和曲线回归模型,并用2015年的数据验证模型,应用组内相关系数（intraclass correlation co-efficient,ICC）评价观测值与预测值的一致性。结果 湖南省手足口病普通病例EV71阳性率和重症率的关联,用三次曲线回归模型的拟合优度最高（校正的R2=0.687）,二次曲线回归模型次之（校正的R2=0.594）,直线回归模型最差（校正的R2=0.420）。三次曲线回归模型对重症率的预测值与观测值之间的两因素混合效应模型单个测量绝对一致ICC值为0.497。结论 利用三次曲线回归模型,用普通病例EV71阳性率预测重症率所得预测值与实际值的一致性一般。     

2006-2010年湖南省急性弛缓性麻痹病例病原学监测结果分析

目的分析湖南省2006-2010年急性弛缓性麻痹（AFP）病例病毒学监测情况,巩固无脊髓灰质炎（脊灰）成果。方法按照WHO规定的方法,对湖南省2006-2010年所有AFP病例粪便标本均采用L20B和RD两种细胞进行肠道病毒（EV）分离鉴定,脊灰病毒阳性株送中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所国家脊灰实验室进行型内鉴别。结果湖南省2006-2010年AFP病例病原学监测指标达到国家要求。在1 291例（2 566份）AFP病例标本中,分离出脊灰病毒（PV）88株、非脊灰肠道病毒（NPEV）333株,分离率分别为3.43%、12.98%;52例PV阳性标本行型内鉴别,共检出45株疫苗变异脊灰病毒,其余均为疫苗相关脊灰病毒,未发现脊灰野病毒。PV与NPEV全年均可检出,PV分离率5、6、7月较高;全省14个地市除湘潭和张家界外,其它地市均检出脊灰病毒（PV）阳性病例;各年龄组之间PV分离率差异有统计学意义（P〈0.01）,分离率随着年龄的增长而下降;不同免疫史之间PV分离率比较差异有统计学意义（P〈0.01）,完成脊灰减毒口服活疫苗（OPV）3次以上全程免疫的AFP病例的PV分离率低于未完成全程免疫者。结论湖南省2006-2010年未发现脊灰野病毒,维持了无脊灰状态。在实现无脊灰目标后,仍应加强AFP病例的病毒学监测工作,以确保最终实现全球消灭脊灰的目标。     

2008-2010年湖南省哨点医院手足口病病原学检测结果及基因特征分析

目的针对2008-2010年湖南省哨点医院手足口病实验室检测结果及其基因特征进行分析,为湖南省手足口病的综合防治提供参考资料。方法收集湖南省哨点医院2008-2010年手足口病病例送检的咽拭子、粪便等标本,用RD、Hep-2细胞对标本进行病毒分离,应用RT-PCR及Real ti me-PCR技术检测原始样本和分离阳性毒株中的肠道病毒71型（EV71）、柯萨奇病毒A组16型（CVA16）、非EV71和CVA16的其它肠道病毒（EV）,将分离到的EV71采用RT-PCR方法进行VP1编码区基因扩增,并对扩增产物进行序列测定和分析。结果 2008-2010年湖南省哨点医院HFMD患者2 448例的各类标本中检测到EV71病毒阳性1 228份,CVA16病毒阳性169份,EV71和CVA16病毒核酸同时阳性12份,非EV71和CVA16的其它肠道病毒（以下简称为EV）阳性518份,病原谱构成以EV71型为主,其构成比为63.73%（1 228/1 927）,其次EV占26.88%（518/1 927）、CVA16占8.77%（169/1 927）、EV71＋CVA16混合感染占0.62%。三种不同型别肠道病毒在每月中均有报告,EV71为优势病原体,4-7月达到峰值,其次为EV型,CVA16型每月维持在低水平的感染。HFMD病例人群男性高于女性（1.95：1）,1~3岁儿童是重症病例数及死亡病例数最多年龄段;湖南省14个地市（州）HFMD的病原谱均以EV71型为主。对845份阳性标本进行病毒分离,共获得肠道病毒211株,其中EV71型131株,CVA16病毒19株,非EV71和CVA16的其它EV型49株,混合感染12株。13株EV71 VP1编码区全长序列之间核苷酸同源性为97.35%~100%,氨基酸同源性为98.2%~100%,基因型为C4a亚型。结论 EV71型是2008-2010年湖南省手足口病流行的主要病原,也是引起手足口重症病例和死亡病例的主要毒株类型,属于C4a亚型。     

2019-2020年湖南省手足口病流行特征和病原学特征研究

目的 分析2019-2020年湖南省手足口病的监测数据,掌握手足口病流行特征及病原变化情况,为手足口病防控策略的制定提供依据.方法 对中国疾病预防控制信息系统中2019-2020年湖南省手足口病监测资料进行描述性流行病学分析,应用实时荧光聚合酶链式反应检测手足口病临床诊断病例标本中的肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病...     

pVAX1/SjRPS4·CB、pcDNA3.0/SjRPS4·CB双价疫苗的构建及其免疫效果观察

目的 构建日本血吸虫天然分子疫苗相关靶基因的双价疫苗pVAX1/SjRPS4·CB、pcDNA3.0/sjRPS4·CB,并观察其免疫保护效果.方法 分别以pcDNA3.0/SjRPS4、pcDNA3.0/SjCB为模板,设计引物扩增SjRPS4、SjCB,重叠PCR法将SjRPS4、SjCB拼接,扩增,经双酶切后与真核质粒载体pVAX1、pcDNA3.0连接,转化DH5α细胞,筛选阳性克隆;提取双价蓖组质粒、空质粒及pVAX1/SjRPS4,经左腿股四头肌注射昆明小鼠,14d后取肌肉组织切片进行间接免疫荧光及酶免疫组织化学染色,证实双价重组质粒的表达;提取pVAX1/SjPS4·CB、pcDNA3.0/SjRPS4·CB、pcDNA3.0/SjRPS4、pcDNA3.0/SjCB及相应空载体,100 μg/只或等量PBS经左腿股四头肌注射昆明小鼠,4周后以(20±1)条尾蚴贴腹感染,6周后检测减虫率、减卵率.结果 PCR、EcoRⅠ/Xho Ⅰ双酶切及测序证实双价疫苗pVAX1/SjRPS4·CB、pcDNA3.0/SjRPS4·CB构建成功;肌肉组织间接免疫荧光及酶免疫组织化学染色证实重组质粒能够在小鼠肌肉细胞内成功表达;与PBS组相比,pVAX1/SjRPS4·CB、pcDNA3.0/SjRPS4·CB、pcDNA3.0/SjRPS4、pcDNA3.0/SjCB免疫小鼠各组间差异均有统计学意义(P<0.05),各组与相应的空质粒组相比各指标差异亦具有统计学意义(P<0.05);两种不同载体构建的舣价疫苗之间比较差异则无统计学意义(P>0.05).结论 成功构建真核双价重组质粒pVAX1/SjRPS4·CB、pcDNA3.0/SjRPS4·CB,二者免疫昆明小鼠均可以产生比单价疫苗更好的免疫保护效果.     

2016—2020年湖南省手足口病时空聚集性分析

目的 分析2016—2020年湖南省手足口病时空聚集性特点,为手足口病疫情防控提供科学依据.方法 在中国疾病预防控制信息系统收集2016—2020年湖南省手足口病数据,以县区为单位采用ArcGIS 10.2软件对手足口病发病数据进行空间自相关分析,采用SaTScan 9.7软件对手足口病发病数据进行时空聚集性分析.结果...     

血吸虫病的诊断检测技术及研究进展

血吸虫病的诊断检测技术在血吸虫病的防治中具有极其重要的作用。近年来除了病原学诊断技术的改进,免疫学诊断技术也因为其良好的敏感性、特异性和实用性,成为当前血吸虫病的常用诊断手段,而且随着分子生物学、免疫化学、免疫传感器等新技术的渗入,极大地促进了血吸虫病诊断方法和检测技术的改进和发展。     

2017—2018年湖南省急性弛缓性麻痹病例病原学监测分析

目的 分析2017—2018年湖南省脊灰实验室所用细胞系的滴度值、急性弛缓性麻痹(acute flaccid paralysis,AFP)病例病原学特征、非脊髓灰质炎肠道病毒(non-polio enterovirus,NPEV)分离率及分布情况,为维持无脊灰状态及预防其传播提供依据。 方法 依照WHO《脊髓灰质炎病毒检验手册》(2004年第四版)方法,对AFP病例粪便标本采用鼠肺细胞(mouse L cells expressing the human poliovirus receptor, L20B)和人横纹肌肉瘤细胞(rhabdomyosarcoma, RD)进行肠道病毒(enterovirus, EV)分离,L20B细胞阳性分离物转RD细胞阳性者再进行脊髓灰质炎型内鉴定实验,脊髓灰质炎阳性毒株送中国疾病预防控制中心国家脊髓灰质炎实验室进行型内鉴定。 结果 在506例(1 011份)AFP病例标本中,分离出脊髓灰质炎病毒(polioviru,PV)2株、NPEV 77株,分离率分别为0.20％、7.62％;2株I型PV阳性毒株均有2个核苷酸序列变异,未发现脊髓灰质炎野病毒和疫苗衍生脊灰病毒,0～1岁组AFP病例NPEV分离率最高。 结论 2017—2018年湖南省脊灰实验室所用细胞系对脊灰病毒的敏感性良好,未发现脊灰野病毒,继续维持了无脊灰状态。     

苍白密螺旋体Tp0751黏附蛋白的表达、纯化及免疫反应性分析

目的 表达苍白密螺旋体(梅毒螺旋体)黏附蛋白Tp0751,纯化表达产物并进行免疫反应性分析,为探索Tp0751重组蛋白在梅毒致病过程中的作用奠定基础.方法 通过生物信息学分析,去除Tp0751信号肽序列,构建原核表达体进行诱导表达;Ni亲合层析柱纯化重组蛋白,Western-印迹检测其免疫反应性.结果 成功构建了PET-28a(+)-0751原核表达载体,经表达、纯化后获得了相对分子量约为26×103的融合蛋白,其表达产物占全菌总蛋白的＞30%,并且主要可溶性形式存在;Western-印迹检测其能与梅毒患者阳性血清发生特异性反应,具有良好的抗原性.结论 重组表达的Tp0751黏附蛋白为可溶性蛋白,且具有良好的免疫反应性,为进一步研究其在Tp0751黏附蛋白在梅毒致病过程中的作用和其生物学功能奠定了基础.