临床分离大肠埃希菌耐药性分析及I型整合子研究

目的了解临床分离大肠埃希菌对常用抗菌药物的耐药状况;研究整合子在大肠埃希菌中的分布情况,探讨其与大肠埃希菌耐药性之间的相关性。方法收集广东省3所医院2010-2012年分离的大肠埃希菌,采用K B纸片扩散法进行药敏试验;聚合酶链反应（PCR）法扩增3类整合子整合酶基因和整合子可变区,测序分析整合子所携带的耐药基因盒类型。结果共收集156株大肠埃希菌,其对青霉素类、头孢菌素类、氟喹诺酮类、氨基糖苷类和磺胺类等的大多数抗菌药物的耐药率＞50%;耐药率＜10%的抗菌药物有头孢哌酮/舒巴坦（0）、亚胺培南（3.85%）、头孢替坦（4.35%）、厄他培南（7.69%）和哌拉西林/他唑巴坦（8.97%）;I类整合子的检出率为57.69%（90/156）,多重耐药菌与非多重耐药菌的整合子检出率分别为66.00%（66/100）和64.71%（22/34）,两组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）,但分别与敏感菌组（9.09%,2/22）相比,差异均有统计学意义（P＜0.01）。所检出的整合子可变区分为9种类型,大部分都含有aadA和dfrA耐药基因盒。结论大肠埃希菌整体耐药情况严重;I类整合子在临床分离大肠埃希菌中分布广泛,并与大肠埃希菌的耐药性关系密切,主要介导对氨基糖苷类、磺胺类、β 内酰胺类等多种抗菌药物的耐药性。     

分子医学实验室标准化操作规程的编写与探讨

分子医学实验室针对新形势下出现的人手不足、技术力量断层、工作任务重等实际问题,在实验教学与管理工作中引入标准化操作规程的管理理念和做法,编写了实验技术、仪器设备、生物安全、管理程序四大类的SOP文件并付诸实施,为建立规范化的实验教学与管理质量控制体系打下基础。     

高校实验教学体系之三要素及立体化管理模式探讨

教学实验室、实验技术人员团队,实验教师团队是完成实践型教学的三大基本要素。本研究从分子医学实验平台的综合型网络化管理体系建设;一专多能、点面结合的技术人员团队和实验技术系统建设;因地制宜、灵活多样的组合型教师团队建设,构建一个三者之间既各成体系又有机组合的立体化管理模式,以其形成高质高效运作的实验教学系统,同时为学生探索性实验、学生科研活动以及实验设施的开放使用等提供一个便捷实用、渠道通畅的实验空间,最终目标是使实践学教学的整体水平达到一个新的层次。     

多囊卵巢综合征与人类白细胞抗原相关性的研究

目的 探讨多囊卵巢综合征（ＰＣＯＳ）与人类白细胞抗原（ＨＬＡ）相关性。方法 采用多聚酶链反应和寡核酸探针杂交技术（ＰＣＲ－ＳＳＯ）对３０例汉族ＰＣＯＳ患者和１０６例汉族无亲缘关系健康个体的ＨＬＡ－ＤＱＡ基因进行研究。结果 ＰＣＯＳ组ＨＬＡ－ＤＱＡ１．２基因频率显著低于对照组,比数比（ＯＲ）值提示该基因为ＰＣＯＳ的抵抗（不易感）基因;ＰＣＯＳ组ＨＬＡ－ＤＱＡ１．１及３基因频率分布高于对照组,ＨＬＡ－     

人类端粒酶活性重组及其重组特异性

目的 对Ｈｅｌａ细胞端粒酶进行活性重组并探讨其重组特异性。方法 以ＲＴ－ＰＣＲ法从纯化的人端粒酶复合体中扩增人类端粒酶ＲＮＡ（ｈＴＲ）基因片段，将其克隆至含有ＳＰ６启动子的ｐＧＥＭ３ｆ＾＋质粒中，构建ｈＴＲ的体外转录体系以获得体外合成的ｈＴＲ。与端粒酶蛋白组分进行活性重组。四膜虫端粒酶ＲＮＡ及１６ｒＲＮＡ作为重组反应对照组，以探测其重组特异性。结果 经ＲＴ－ＰＣＲ扩增出４５０ｂｐ片段；体外转录重组     

分子生物学技术在器官移植研究中的应用

分子生物学技术在器官移植领域中的应用已越来越广泛和深入。本文综述近年来国内外该领域的研究和应用现状 ,以图表的形式 ,形象化地介绍了常用分子生物学技术在器官移植研究中的实用过程和应用进展     

基因工程技术DNA多态性分析及应用

自１９８８年以来，本课题组应用基因工程技术对ＤＮＡ多态性进行分析，取得良好效果。这一技术避开了基因产物，直接研究遗传物质本身──ＤＮＡ的多态性，具有准确、分辨力高、不受基因表达过程影响因素干扰等许多优越性。在医学遗传学某些遗传病的诊断、基因连锁分析、疾病相关性分析、人类学、自身免疫性疾病、人类免疫调控、亲子鉴定和法医学个体识别等方面均具有广阔的应用前景。这些技术的实际应用已取得了明显的社会效益。     

端粒酶锤头状核酶抑制肺癌细胞端粒酶活性及细胞增殖的实验研究

目的:探讨端粒酶特异性核酶对A549肺癌细胞端粒酶活性、增殖和凋亡的影响。方法:构建人端粒酶锤头状核酶真核表达质粒,稳定转染人A549肺癌细胞株。RT-PCR法检测核酶的表达以及hTERT mRNA、hTR的含量,TRAP法测定细胞端粒酶活性,MTT法、流式细胞仪等测定细胞增殖及凋亡。结果:稳定转染核酶重组体的细胞克隆,均可以检测到核酶的表达,端粒酶活性被抑制,clonehTERT1～6和clonehTR(1、3、5)的平均端粒酶活性分别是空白对照组的(27±18)%和(36±13)%,P值分别为0.000和0.013;clonehTERT1～6hTERT mRNA及clonehTR1～6hTR含量下降,分别是空白对照组的(30±19)%和(49±17)%,P值分别为0.000和0.001;clonehTERT1、clonehTR3生长较空白对照组及阴性对照组减缓,凋亡率增加;而clonehTERT1又较clonehTR3生长慢,凋亡率高(凋亡率分别为21.5%和16.1%)。结论:端粒酶特异性核酶能明显抑制端粒酶活性和细胞增殖,促进细胞凋亡;端粒酶hTERT mR-NA可能是比端粒酶RNA更为理想的端粒酶抑制剂的靶点。     

开放性实验教学与学生科研创新能力的培养

“以实验为中心安排教学”是近年来美国高校正在开展的一项极有影响力的实验教学改革计划（简称EBE计划），其教学重点不在知识的掌握而在能力的培养。为了更好地强化学生的实验操作和科研创新能力，在全面查阅EBE计划相关文献的基础上，充分结合自身的实际状况并加以改进，创建了一个以技能训练为基础、以研究性实验为核心、以综合能力培养为目标的开放性实验教学模式。在完成分子医学基本实验课程的基础上，以学生实验小组的形式开展灵活多样的研究性实验和学生科研活动。它不仅能最大限度地拓展仪器使用空间为教学服务，更重要的是能体现先进的现代化教学思想，在实验教改上具有重要的推广意义。     

苦瓜对实验性大鼠肝纤维化的干预作用及可能机制

目的: 探讨苦瓜(BM)对四氯化碳(CCl₄)诱导大鼠肝纤维化的干预作用及相关机制。方法: 随机将32只雄性健康Wistar大鼠分为4组:对照组(C组);模型组(CCl₄,M组);BM低剂量组(BM 100g/kg饲料+CCl₄,BM-L组)、BM高剂量组(BM 200g/kg饲料+CCl₄,BM-H组)。饲养中除C组外的各组大鼠均皮下注射50%CCl₄-橄榄油溶液2 mL/kg,2次/周,共8周,诱导肝纤维化动物模型。8周后处死大鼠,留取大鼠肝脏和血清。计算肝体指数;测定血清丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性;测定肝匀浆总蛋白(TP)和白蛋白(Alb)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、羟脯氨酸(HYP)含量和单胺氧化酶(MAO)活性;胶原纤维染色观察大鼠肝组织变性与胶原沉积病理改变。结果: 与M组比较,摄入BM后的各剂量组大鼠肝体指数显著降低(P<0.01);血清MDA含量及肝匀浆HYP含量和MAO活性均明显降低(P<0.01),而血清SOD活性、肝组织TP和Alb含量、GSH-Px活性明显增强(P<0.01)。与正常大鼠相比,模型大鼠肝脏有明显胶原沉积与肝纤维化,伴有不同程度的肝细胞炎性损伤坏死;BM组明显减轻模型大鼠肝组织损伤坏死与胶原沉积等病理变化,以高剂量组更明显。结论: BM具有抗CCl₄诱导大鼠肝纤维化作用,其机制可能与其抗脂质过氧化、降低肝HYP含量及MAO活性的作用有关。