分子医学实验室仪器设备管理的实践与探索

仪器设备管理是实验室工作的重要内容。分子医学实验室自组建以来，建立健全了仪器设备管理制度．在开放与培训、仪器共享与信息化管理方面进行了探索与实践，提高了仪器设备的使用效益，使实验管理与实验教学工作走上了良性循环、可持续发展的道路。     

RT-PCR法检测恶性肿瘤细胞端粒酶RNA组分的研究

自近年来 ,Ｍｏｒｉｎ等首次在癌细胞株中检测到端粒酶活性并进而研究统计出有 85%以上的恶性肿瘤细胞中端粒酶活性为阳性而正常细胞和良性肿瘤中为阴性以后 ,端粒酶及其与恶性肿瘤的关系成为人们广泛关注的一个研究热点。本研究采用ＲＴ ＰＣＲ方法从恶性肿瘤细胞端粒酶粗提物中检测端粒酶ＲＮＡ组分 ,反转录人端粒酶ＲＮＡ组分获得成功 ;并进一步采用此法对ＡＴＲＡ诱导的癌细胞株进行ＲＮＡ组分的检测 ,观察端粒酶ＲＮＡ组分在恶性细胞诱导分化过程中的变化情况 ,对进一步探讨人端粒酶各组分在恶性肿瘤发生发展中的关系有重要意义。将Ｈ…     

免疫学与生物化学融合性实验教学的探索

《分子医学技能》课程涵盖了免疫学、生物化学及分子生物学多项实验技术,是一门实用性极强的基础医学实验学科。为了使免疫学与生物化学实验教学更好地融合在一起,利用学生业余科研探索出免疫学和生物化学的综合性实验项目,使学生在系统学习和掌握基本技术的同时,能够综合地分析实验结果,及时联系医学应用,既提高了学生的学习兴趣,又培养学生的动手能力、应用能力和独立工作能力的综合性创新能力。     

过表达P2x7受体引发小胶质细胞的炎症反应

目的研究嘌呤受体P2x7在小胶质细胞炎症反应中的作用。方法通过分子克隆的方法构建pCDNA3.1-P2x7重组质粒,构建成功后经测序确认质粒序列无误,通过Lipo2000转染小胶质细胞株BV-2细胞,采用PCR方法测定BV-2细胞内P2x7的表达,Westernblot法测定P2x7和Cox-2的蛋白表达。结果细胞经重组质粒转染成功后,pCDNA3.1-P2x7组P2x7和Cox-2蛋白表达水平分别为(4.21±0.13)%和(2.60±0.05)%,高于pCDNA3.1组的(2.61±0.05)%和(1.62±0.04)%,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论通过过表达P2x7受体,能引起小胶质细胞的激活,提示可进一步引发炎症反应。     

2006年深圳市急性肠胃炎的流行病学和病毒学调查

目的研究2006年深圳市急性肠胃炎发病的主要病因。方法收集深圳急性肠胃炎粪便样本200份（包含122份散发样本和78份暴发样本）,采用RT—PCR的方法进行急性肠胃炎相关病毒检测。结果44％（88／200）的样本为诺如病毒阳性,9％（18／200）为轮状病毒A阳性,2％（4／200）为星状病毒阳性,2％（4／200）为肠道腺病毒阳性,还有8％（16／200）的样本为混合感染。其中散发样本中检出腺病毒、轮状病毒、星状病毒和诺如病毒GI、诺如病毒GII5种病毒,而诺如病毒GII是3次暴发样本中的唯一病原。对22例NoVGII阳性样本测序后的系统发育分析表明NoVGII．4variants2006bcluster是造成2006年深圳市肠胃炎暴发的主要诱因．其次为NoVGII．12和GII．4Hunter簇。结论NoVGII．4是2006年流行于深圳的主要病毒株．     

端粒酶活性及其hTERT基因在增生性组织中的表达

目的:探讨端粒酶在增生性组织中的表达状况。方法:采用Kim的TRAP法和RT-PCR技术检测增生性肉芽组织、子宫内膜组织以及部分生长旺盛的癌旁组织的端粒酶活性及其催化亚基hTERT基因的表达。结果:以Hela细胞对照作为阳性对照,3类组织可部分检测到低水平的端粒酶活性及hTERT基因的表达。结论:端粒酶在生长旺盛的增生性组织中呈低水平表达,与细胞的生长状态有关。     

RNA干扰人端粒酶hTR基因对HeLa细胞增殖的影响

目的:探讨RNA干扰抑制人端粒酶RNA组分human telomerase RNA component,hTR)的表达时宫颈癌细胞(HeLa细胞)增殖的影响.方法:hTR基因的RNA干扰表达重组体用脂质体介导方法稳定转染HeLa细胞.RTPCR法检测hTR的mRNA表达水平,TRAP-PCR法检测端粒酶活性,MTT法检测细胞增殖.结果:RT-PCR结果表明,稳定转染RNA干扰表达重组体的细胞株,其hTR基因的mRNA抑制率较无转染对照组下降了(59.7±3.3)%,较转染空载体组下降了(56.3±4.4)%;实验组细胞端粒酶活性下降,生长速度明显减慢.结论:利用RNA干扰技术抑制hTR基因在HeLa细胞的表达能抑制该细胞端粒酶活性和增殖活性.