小儿ECHO24型病毒性肺炎二例

小儿ＥＣＨＯ２４型病毒性肺炎二例包满珍，谢若男，袁广卿［例１］男，３５天。因咳嗽，气喘４天，烦躁１天入院。体检：Ｔ３６．５℃，Ｐ１８０次，Ｒ７０次。神清，鼻翼扇动，唇周微绀，咽充血，颈软，吸入性三凹征（十）。双肺哮鸣音及细湿罗音，腹软，肝助下５ｃｍ，...     

亚胺培南耐药铜绿假单胞菌的金属β-内酰胺酶检测

目的:了解金属β-内酰胺酶在广州地区铜绿假单胞菌中的流行状况及其流行亚型,完善广州地区金属β-内酰胺酶的分子流行病学资料.方法:采用双纸片协同法和双纸片增效法对164株亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌筛选金属β-内酰胺酶表型阳性的菌株,采用PCR检测5类金属β-内酰胺酶的编码基因(IMP家族、VIM家族、GIM-1、SPM-1和SIM-1),利用生物信息学的方法对检测到的金属β-内酰胺酶亚型进行比对分析并制作分子进化树.结果:164株亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌中筛选出22株金属β-内酰胺酶表型阳性的菌株,IMP阳性15株(9.1%),其中11株为IMP-9亚型,另外4株携带一个新的亚型,命名为IMP.25,VIMI阳性5株(3.0%),均为VIM-2亚型,未检测到GIM-1、SPM-1和SIM-1型金属β-内酰胺酶.结论:广州地区铜绿假单胞菌产金属β-内酰胺酶的基因型已经出现多型化的特征,同时存在IMP型和VIM型金属β-内酰胺酶的流行,本次研究发现了一个新的金属β-内酰胺酶亚型(IMP-25),为IMP家族金属p.内酰胺酶的多样性及其分子流行病学资料提供了新的信息.     

生物安全三级实验室甲醛熏蒸消毒灭菌效果评价

<正>生物安全三级实验室是按照我国《病原微生物实验室生物安全管理条例》[1]和《实验室生物安全通用要求》(GB19489-2008)[2]等有关病原微生物实验室生物安全法规和标准,以及WHO《实验室生物安全手册》(第三版)[3]中的三级生物安全     

不同级别小鼠来源的骨髓细胞对制备优势DC2的影响

目的探索不同级别小鼠来源的骨髓细胞对体外制备优势DC2细胞的影响。方法取SPF级和健康普通级C57BL/6小鼠股、胫骨骨髓细胞及脾细胞,设细胞因子诱导的实验组、低浓度GM-CSF对照组、无外源细胞因子对照组及脾细胞组。骨髓细胞采用GM-CSF,IL-4,Flt3L和SCF的不同细胞因子浓度和组合体外培养诱导。脾细胞培养2d去除大部分淋巴细胞,第3天采用流式细胞术4色荧光标记法分析细胞表型,骨髓细胞诱导的各组同样于第3天采用流式细胞术分析细胞表型,比较不同级别小鼠骨髓细胞所诱导的DC2细胞的表型和比例。结果SPF来源的小鼠骨髓细胞诱导的各组第3d在CD11c+的DC细胞群中CD8α+DC2所占比例及不成熟DC2的比例均高于普通级小鼠,显示普通鼠来源的骨髓细胞更倾向于产生成熟的DC,不易诱导产生高比例的不成熟的DC2。对两种动物脾细胞DC2的分析结果表明,普通鼠脾脏中CD8α-MHCⅡ+的成熟DC1比例为75.58%,远远超过SPF鼠的30.60%。结论小鼠的微生物级别可影响耐受性DC的诱导效果,采用SPF级小鼠来源的骨髓细胞体外制备优势DC2细胞效果优于普通级鼠,原因可能与普通鼠接触微生物较多,免疫系统更易于产...     

分子医学实验教学体系数字化资源平台的建设与应用

以分子医学实验教学体系为主体创建分子医学技能学习型网络课程,进行课程网页、网络教学课件、实验技能录像、在线自测题库、网络教学资源库、实验室仪器设备网络管理系统等的建设,打造学科数字化实验教学资源平台。并将教学信息和参考资源有机地融入到教师和学生的教与学的整个过程中,形成全方位、立体化的新型实验教学体系。     

肾癌G250抗原基因真核表达载体的构建和序列测定

目的构建肾癌G250抗原基因编码区序列的直核表达载体并进行序列测定。方法从肾癌组织中提取总RNA，采用RT-PCR技术扩增肾癌G250抗原的基因编码区序列，将PCR片段定向克隆至真核表达载体pcDNA3．0，并进行序列测定。结果肾癌组织RT-PCR扩增后，均产生特异性条带，位置在1000bp和1600bp之间。与预定相符。pcDNA3．0-G250分别用Hind Ⅲ、Xho Ⅰ双酶切后产生2条带。均与预定位置相符；抗原基因编码区序列与Genbank登录号BC014950文献报道的序列同源性为100％，目的基因与载体正确连接。结论成功克隆了肾癌G250抗原的基因编码区序列，并构建了其真核表达载体pcDNA3．0-G250，为核素标记的G250单克隆抗体在诊断和治疗的心用及G250基因修饰的树突状细胞疫苗的肾癌生物治疗提供了依据。     

汕头市病毒性心肌炎的病毒病因研究

汕头市病毒性心肌炎的病毒病因研究谢若男，叶坤照，许永绥，袁广卿（汕头大学医学院附二院，广东５１５０３１）病毒性心肌炎可由多种病毒引起，但以肠道病毒（小ＰＮＡ科）最具亲心性。尤以柯萨奇Ｂ组病毒（ＣｏｘＢ）引起的心肌炎最为常见。我们于１９９０年４月至１９...     

抗-D抗体Fab段基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

目的：于大肠杆菌表达抗-D抗体Fab段基因，为真核载体表达完整的人抗-D抗体奠定基础。 方法： 将已克隆测序的Fab段基因亚克隆到pComb3噬粒载体，用PCR和限制性内切酶酶切鉴定后于大肠杆菌进行表达，表达产物用SDS-PAGE和ELISA等方法分析。 结果： SDS-PAGE电泳表明重组克隆表达了1条约48 kD的蛋白条带, ELISA结果显示，所表达的抗体和Rh+的人红细胞呈阳性反应，和Rh-红细胞反应为阴性，阴性对照和Rh+及Rh-红细胞反应均为阴性。 结论： 于大肠杆菌表达了具有抗原结合特性的人抗-D抗体Fab段抗体分子。     

分子医学实验室仪器设备管理的实践与探索

仪器设备管理是实验室工作的重要内容.分子医学实验室自组建以来,建立健全了仪器设备管理制度,在开放与培训、仪器共享与信息化管理方面进行了探索与实践,提高了仪器设备的使用效益,使实验管理与实验教学工作走上了良性循环、可持续发展的道路.     

铜绿假单胞菌中Ⅰ类整合子及携带的耐药基因研究

目的 了解整合子在广州地区铜绿假单胞菌中的分布状况及其主要类型,研究Ⅰ类整合子的结构特征并探讨其与细菌多重耐药之间的相关性.方法 采用PCR检测3类整合子整合酶的编码基因,并扩增整合子的可变区,运用DNA测序技术分析整合子可变区的耐药基因及其排列顺序,利用生物信息学的方法对检测到的可变区基因序列进行比对分析.结果 在20株产金属β-内酰胺酶铜绿假单胞菌中,15株检测到Ⅰ类整合子,未检测到Ⅱ类和Ⅲ类整合子,其中一株铜绿假单胞菌整合子全长序列含有Ⅰ类整合子整合酶、Aac A4氨基糖甙乙酰转移酶、IMP-25金属β-内酰胺酶、OXA-30 β-内酰胺酶和Cat B3氯霉素乙酰转移酶的编码基因及其相应的基因重组位点,GenBank登录号为EU588392,其中IMP-25为一个新的金属β-内酰胺酶亚型.结论 广州地区铜绿假单胞菌中存在的整合子类型是Ⅰ类整合子,并且该整合子可变区携带多种耐药基因盒,其中一个是金属β-内酰胺酶新亚型IMP-25,在分子水平上阐述了I类整合子参与铜绿假单胞菌对抗生素的耐药性和多重耐药性.