细菌在雷达下运动:细菌感染与结肠癌的联系

幽门螺杆菌感染与胃癌患病概率增加之间的关联引发了人们关于结肠微生物群与结直肠癌之间可能有关联的想法。输卵管灌气法导致的结肠上皮细胞被产肠毒素脆弱拟杆菌侵袭可能会增加癌变前细胞分化的风险。然而,幽门螺杆菌、脆弱拟杆菌等可调整正常宿主对感染的应答。因此,Keenan等推测,产肠毒素脆弱拟杆菌的侵袭可能是结肠癌发生因素中未被重视     

TGF-β调控的miRNA在肾间质纤维化中研究

<正>微核糖核酸(microRNA)是短的非编码的内源性RNA,结合到其靶mRNAs,并组装到相应的RNA诱导的沉默复合物(RISC)中。miRNA的生物合成包括多个步骤。首先,miRNA在细胞核通过RNA聚合酶Ⅱ或RNA聚合酶Ⅲ转录为具有发夹径环结构的初级miRNA(PRI-MIR)。初级miRNA(PRIMIR)被RNaseⅢ型核酸内切酶Drosha及其辅酶DGCR8剪切     

釉基质蛋白对人牙龈上皮细胞增殖的影响

目的:研究釉基质蛋白(enamelmatrixproteins,EMPs)对体外培养的人牙龈上皮细胞增殖活性的影响。方法:乙酸提取法获取EMPs,取龈切术中切除的牙龈组织,采用酶消化法培养牙龈上皮细胞。将第1代牙龈上皮细胞按照22500个/孔接种,分为4组:对照组(不加EMPs)及EMPs分别为50、100、200μg/ml的实验组。采用MTT法检测各组细胞数量,对每个时间点的各组实验数据进行方差分析。结果:人牙龈上皮细胞能在EMPs覆盖的平皿上生长。统计学分析表明,不同浓度的EMPs在早期对牙龈上皮细胞的增殖无显著影响;从第3天开始,当培养液中EMPs浓度为200μg/ml时,牙龈上皮细胞增殖显著受抑。结论:EMPs影响牙龈上皮细胞的增殖,并存在剂量和时间依赖性。     

正常大鼠颌下腺上皮细胞极性培养

目的为了探索简便、有效的涎腺上皮细胞的体外培养方法。方法采用自制鼠尾胶原胶为底物．在培养液中加入一些促进上皮细胞生长分化的刺激物，对出生一天的Wistar大鼠颌下腺上皮细胞进行原代培养。通过相差显微微镜、光镜及透射电镜对上皮细胞的生长及分化进行观察和研究。结果培养的大鼠颌下腺上皮细胞呈多层生长且为极性分化，保留了腺泡导管分泌单位的三种上皮成份。结论本研究所采用的方法是一种简便、可行、有效的涎腺上皮细胞的体外培养方法，其中自制胶原胶是本研究培养成功的关键。     

口腔黏膜上皮细胞体外癌变模型的建立

目的诱导永生化口腔上皮细胞系（HIOEC）细胞恶性转化，建立口腔黏膜上皮细胞体外癌变模型。方法通过化学致癌剂苯并芘[B（a）P]体外诱导HIOEC细胞，逐步筛选到鳞状细胞癌细胞系HIOEC-B（a）P。通过微分干涉显微镜和HE染色观察细胞形态学改变；用软琼脂集落形成及裸小鼠异体皮下成瘤的实验鉴定HIOEC-B（a）P细胞的恶性表型。结果①HIOEC细胞在B（a）P诱导培养后可以在正常生理钙离子浓度、含胎牛血清培养液中生长；②细胞在诱导过程中形态多变，最后稳定为多角形铺路石样上皮细胞；③第93代HIOEC-B（a）P细胞开始具备软琼脂集落形成能力；④HIOEC—B（a）P第55代细胞在裸小鼠皮下首次形成角化团块，第69代细胞形成分化较好的典型鳞状细胞癌，第74代、第96代细胞均形成与临床病理相似的Ⅰ～Ⅱ级鳞状细胞癌。结论生物因素合并化学致癌因素B（a）P可以诱导永生化口腔黏膜上皮细胞恶性转化，为进一步研究口腔黏膜上皮细胞多因素、多步骤癌变机制提供实验模型。     

细胞外基质磷酸糖蛋白在牙齿组织中的表达

目的 细胞外基质磷酸糖蛋白(matrix extracellular phosphoglycoprotein,MEPE)是新近在骨和牙齿组织中发现的蛋白.检测MEPE在牙齿组织中的表达以及随着组织分化MEPE表达的变化.方法 通过免疫组化染色对MEPE蛋白在人牙胚中的表达进行初步定位.分别分离培养人的牙髓细胞和成釉器上皮细胞,应用半定量PCR技术探讨MEPE在这两种细胞中的时序表达变化.结果 MEPE在成釉细胞、牙髓和成牙本质细胞中均有表达.MEPE的表达随着牙髓细胞的分化而逐渐下调.随着成釉器上皮细胞培养代次的增加,MEPE表达逐渐下降.结论 MEPE的下调提示MEPE可能在牙齿硬组织的形成过程中起到调控作用.     

HPV16 E6/E7对永生化口腔上皮细胞p53、p21表达的影响

目的：为了探讨人乳头状瘤病毒(HPV)转化口腔上皮细胞的作用机制，研究HPV16 E6、E7对永生化口腔上皮细胞细胞周期调节因子p53、p21表达的影响。方法：免疫细胞化学法检测HPV16 E6、E7诱导的永生化口腔上皮细胞HIOEC中野生型和突变型p53的表达；Westem印迹检测HIOEC HPV16 E6、E7、p53、p21蛋白表达，并以正常口腔上皮细胞和转染空白载体的口腔上皮细胞为对照。结果：HIOEC细胞表达HPV16 E6、E7蛋白．野生型p53和p21表达水平高于正常口腔上皮细胞和转染空白载体的口腔上皮细胞。结论：p53的失活可能不是HPV16 E6、E7诱导口腔上皮细胞永生化的主要原因。     

维甲酸对口腔黏膜上皮细胞增殖的影响

目的探讨不同浓度维甲酸对体外培养的口腔黏膜上皮增殖的影响。方法将第二代人口腔黏膜上皮细胞以4×104个/cm2接种于玻片上,在含钙1.2 mmol/L的无血清角朊细胞培养基中培养,将其按培养基中的维甲酸浓度分为0、10-8、10-7、10-6、2×10-6mmol/L共5组。对各组细胞进行硝酸银染色,观察核仁区相关嗜银蛋白(AgNOR s)的着色情况,并对细胞核AgNOR s面积进行图像分析,以评价维甲酸对口腔上皮细胞增殖能力的影响。结果高钙培养基中维甲酸浓度为10-7~10-6mmol/L时,体外培养的上皮细胞内AgNOR s面积与维甲酸浓度0、10-8mmol/L 2个实验组有显著差异(P<0.01)。结论维甲酸可有效地拮抗因钙离子诱导上皮细胞分化所致增殖抑制。     

腺样囊性癌中雪旺氏细胞标记物S100蛋白表达的超微结构观察

目的:从超微结构水平了解雪旺氏细胞标记物 S100蛋白在腺样囊性癌中的表达,进而分析腺样囊性癌中哪种细胞成份发生了雪旺氏细胞分化。方法:采用免疫电镜方法研究 S100蛋白,肌动蛋白(muscle actin,MA)在腺样囊性癌中的表达。结果:S100阳性细胞与 MA 阳性细胞具有相同的分布和超微结构。这种超微结构符合肌上皮细胞的超微结构特点。结论:腺样囊性癌中突变的肌上皮细胞可能发生了雪旺氏细胞分化。     

大鼠舌背上皮细胞体外培养及其生物学特性观察

目的:探讨舌背上皮细胞体外培养的可行性,并观察其生长特性。方法:断颈处死出生后1d的SD大鼠,70%乙醇浸泡3～5min,切取舌体及下颌骨。以DMEM/F12作为基础培养液,原代培养舌背黏膜上皮。当细胞铺满整个培养瓶底70%时,进行细胞传代。采用广谱角蛋白细胞免疫化学染色法及透射电镜观察法对上皮细胞进行鉴定。结果:接种时,原代细胞形状、大小不等,呈多样性,表现为多角状扁平细胞、体积较大的球形细胞和体积较小的球形细胞。大多数细胞在培养24h后贴壁;培养3d后,细胞增殖形成许多小而不规则的细胞克隆或集落,开始进入指数增殖阶段,形成细胞团块。随着时间推移,细胞团块周围结构疏松,间隙增大,细胞团块不断增大,融合、连接成片,排列成铺路石状,可传3～4代。结论:以DMEM/F12为基础培养液,可成功地培养出舌背上皮细胞。