Gene expression profile differences in gastric cancer, pericancerous epithelium and normal gastric mucosa by gene chip

AIM: To study the difference of gene expression in gastric cancer (T), pericancerous epithelium (P) and normal tissue of gastric mucosa (C), and to screen an associated novel gene in early gastric carcinogenesis by oligonucleotide microarray. METHODS: U133A (Affymetrix, Santa Clara, CA) gene chip was used to detect the gene expression profile difference in T, P and C, respectively. Bioinformatics was used to analyze the detected results. RESULTS: When gastric cancer was compared with normal gastric mucosa, 766 genes were found, with a difference of more than four times in expression levels. Of the 766 genes, 530 were up-regulated (Signal Log Ratio (SLR) >2), and 236 were down-regulated (SLR<-2). When pericancerous epithelium was compared with normal gastric mucosa, 64 genes were found, with a difference of more than four times in expression levels. Of the 64 genes, 50 were up-regulated (SLR>2), and 14 were down-regulated (SLR<-2). Compared with normal gastric mucosa, a total of 143 genes with a difference in expression levels (more than four times, either in cancer or in pericancerous epithelium) were found in gastric cancer (T) and pericancerous epithelium (P). Of the 143 genes, 108 were up-regulated (SLR>2), and 35 were down-regulated (SLR<-2). CONCLUSION: To apply a gene chip could find 143 genes associated with the genes of gastric cancer in pericancerous epithelium, although there were no pathological changes in the tissue slices. More interesting, six genes of pericancerous epithelium were up-regulated in comparison with genes of gastric cancer and three genes were down-regulated in comparison with genes of gastric cancer. It is suggested that these genes may be related to the carcinogenesis and development of early gastric cancer.     

洋金花总碱对TGF-β1诱导的人肺腺癌细胞A549细胞EMT的影响

目的 探讨洋金花总碱对人肺腺癌细胞株A549在体外经转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1, TGF-β1）诱导后发生上皮细胞间质化（epithelial-mesenchymal transition, EMT）的作用。 方法 将体外培养的A549 细胞随机分为5 组：空白对照组、TGF-β1组及低、中、高浓度药物组,分别作用24、48、72 h时,观察各组A549细胞形态变化,通过蛋白免疫印迹（Western blot）及实时荧光定量PCR（Real-time PCR）检测各组A549细胞人细胞角蛋白19（CK-19）及α－平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达。 结果 TGF-β1组的细胞形态逐渐由鹅卵石状向梭形改变;低、中、高浓度药物组形态与TGF-β1组相似; 3个浓度药物组细胞形态间比较,差异无统计学意义（ P >0.05）。Western blot结果显示：与空白对照组比较,TGF-β1组CK-19表达下调,α-SMA 表达上调（ P <0.01）;与TGF-β1组比较,低、中、高浓度药物组CK-19表达上调（ P <0.01）,α-SMA 表达有所抑制 （ P <0.01）;3个浓度药物组间比较,72 h时的高浓度药物组CK-19表达上调（ P <0.01）,α-SMA 表达抑制 （ P <0.01）。Real-time PCR结果显示：与TGF-β1组比较,3个浓度药物组细胞CK-19 mRNA表达增多;α-SMA mRNA表达减少（ P <0.01）。 结论 洋金花总碱对TGF-β1诱导的肺腺癌细胞A549 EMT形态改变无明显影响,能一定程度上逆转A549细胞EMT过程中特征性标记物CK-19及α-SMA的表达,使上皮标志物CK-19表达增多,间质细胞标志物α-SMA表达减少,且在作用72 h时的高浓度药物组最为明显,并呈浓度依赖性和时间依赖性。     

Hoechst33342/PI双荧光活染法检测氟对体外培养大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响

目的研究氟对体外培养的大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响。方法取新生Wistar大鼠肾皮质,制备细胞悬液,传代培养。给予不同浓度的氟化钠(40、80、160μmol/L)处理培养细胞48h后,用Hoechst33342/PI双荧光活染法检测细胞凋亡情况。结果倒置显微镜下发现培养细胞出现细胞碎片明显增多。Hoechst33342/PI双荧光活染法染色检测发现坏死细胞增多。紫外光激发后,40μmol/L NaF处理组出现凋亡细胞,80μmol/L NaF处理组凋亡细胞增多,160μmol/L NaF处理组凋亡细胞明显增多。绿色光激发后,发现80μmol/L NaF处理组出现染色质凝集的晚期凋亡细胞和染色质不凝集的死亡细胞,160μmol/L NaF处理组晚期凋亡细胞较以上各组明显增多。低、中、高氟浓度组凋亡率分别为15.0%、32.4%和62.2%,即随氟浓度的提高,凋亡细胞百分比增加。结论不同浓度的氟均可诱导大鼠肾小管上皮细胞凋亡,随着氟化钠浓度的增加,凋亡细胞增多。     

不同抗真菌药对绝经妇女念珠菌性外阴阴道炎的临床观察

<正>绝经妇女由于机体雌激素水平显著降低,会导致阴道上皮细胞糖原含量降低,阴道防御能力下降,因此极易感染念珠菌而导致念珠菌性外阴阴道炎(vulvovaginal candidiasis,VVC)[1]。治疗上主要应用氟康唑等吡咯类广谱抗真菌药[2],但临床发现有较多的绝经妇女虽经正规氟康唑治疗,但病情仍迁延不愈,并且反复发作,因此临床提出联合用药来治疗绝经妇女VVC[3]。但目前治疗VVC的药物种类较多,而选择何种抗真菌药物治疗尚有争议,因此本研究分析     

乌梅丸拆方对UC大鼠结肠上皮细胞Notch信号通路的影响

目的:观察乌梅丸拆方对溃疡性结肠炎大鼠结肠上皮细胞Notch信号通路的影响,揭示方中治疗溃疡性结肠炎的主要治法和药物。方法:以三硝基甲苯磺酸/乙醇灌肠建立大鼠溃疡性结肠炎模型。将80只大鼠随机分成8组:空白组(生理盐水10 m L·kg-1),模型组(生理盐水10 m L·kg-1),乌梅丸全方组(53.2 g·kg-1),寒热并用组(36.0 g·kg-1),温热药物组(21.32 g·kg-1),寒凉药物组(14.68 g·kg-1),补益药物组(6.68 g·kg-1),收敛药物组(10.68 g·kg-1),造模8 h后各组大鼠按剂量灌胃给药,给药10 d。取结肠组织做病理学检查并采用实时荧光定量核酸扩增检测系统(Q-PCR)法检测结肠上皮细胞Notch-1,Hes-1,Math-1 mRNA的表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠结肠上皮细胞Notch-1,Hes-1 mRNA表达显著增强,Math-1 mRNA表达降低(P0.05);与模型组比较,乌梅丸及各拆方给药后,乌梅丸组,寒热并用组大鼠结肠上皮细胞Notch-1,Hes-1 mRNA表达明显降低,Math-1 mRNA表达显著增高(P0.05)。结论:乌梅丸方中对Notch信号通路有调节作用的主要是寒热并用组药物,寒热并用法是该方治疗溃疡性结肠炎的主要治法。     

实验性变应性鼻炎豚鼠鼻黏膜中TGF-β1表达及意义

目的探讨转化生长因子β1（TGF-β1）在变应性鼻炎豚鼠鼻黏膜中的表达和意义。方法建立豚鼠变应性鼻炎模型,利用免疫荧光法检测TGF-β1,并于激光共聚焦显微镜下观察其在鼻黏膜内分布及表达情况。结果对照组豚鼠鼻黏膜内,TGF-β1几乎没有表达;变应性鼻炎组豚鼠鼻黏膜内TGF-β1有明显表达,主要分布在黏膜上皮细胞及固有层内浸润的炎细胞胞浆和细胞外基质。结论TGF-β1可能在变应性鼻炎组织重塑过程中起重要作用。     

Juvenile polyposis syndrome

Juvenile polyposis syndrome is a rare autosomal dominant syndrome characterized by multiple distinct juvenile polyps in the gastrointestinal tract and an increased risk of colorectal cancer.The cumulative life-time risk of colorectal cancer is 39% and the relative risk is 34.Juvenile polyps have a distinctive histology characterized by an abundance of edematous lamina propria with inflammatory cells and cystically dilated glands lined by cuboidal to columnar epithelium with reactive changes.Clinically,juven...     

神经上皮细胞转化基因1对细胞辐射敏感性的影响及其机制探讨

目的 探讨神经上皮细胞转化基因1(Net1)对细胞辐射敏感性的影响及相关的分子作用机制.方法 运用实时荧光定量PCR检测辐射后细胞中Net1基因表达水平的变化;采用RNAi干扰技术抑制细胞中Net1的表达,用克隆形成率分析细胞的辐射敏感性;利用免疫共沉淀技术发现Net1的结合蛋白.结果 电离辐射损伤后,细胞中的Net1 mRNA水平显著上升(t=-10.52,P＜0.05);与对照组相比,siRNA沉默细胞中的Net1表达后明显增加了细胞的辐射敏感性(t=15.31、11.65,P＜0.05);无论在正常状态下还是在细胞受到辐照后,Net1都能与非同源末端连接修复蛋白Ku70、Ku80和DNA-PKcs结合.结论 Net1对细胞的辐射防护作用可能是通过与非同源末端连接修复蛋白相互作用来调控辐射损伤修复实现的.     

肿瘤标志物联合检测在肺癌诊断中价值

目的 探讨联合检测血清癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)、糖类抗原(carbohydrate antigen,CA)19-9、CA125、神经元特异性烯醇化酶(neuron specific enolase,NSE)、细胞角蛋白19片段(cytokeratin 19 fragments,CYFRA21-1)、鳞状上皮细胞癌相关抗原(squamous cell carcinoma antigen,SCC)对肺癌的诊断价值.方法 肺腺癌患者102例(腺癌组)、肺鳞癌患者60例(鳞癌组)、肺小细胞癌患者36例(小细胞癌组)和95例体检健康者(对照组),检测4组血清CEA、CA19-9、CA125、NSE、CYFRA21-1、SCC水平,统计4组6项指标的阳性率,计算6项指标单独及联合检测诊断肺癌的灵敏性和特异性.结果 腺癌组血清CEA、CA19-9、CA125、NSE、CYFRA21 1和SCC阳性率分别为67.6％、28.4％、52.0％、58.8％、51.0％、14.7％,鳞癌组分别为33.3％、11.7％、41.7％、43.3％、65.0％、40.0％,小细胞癌组分别为44.4％、16.7％、13.9％、75.0％、36.1％、2.8％,对照组分别为1.1％、0、0、5.3％、2.1％、2.1％,除SCC阳性率在小细胞肺癌组与对照组比较差异无统计意义(P＞0.05)外,腺癌组、鳞癌组、小细胞癌组6项指标阳性率均高于对照组(P＜0.05),腺癌组CEA、CA125阳性率高于鳞癌组和小细胞癌组(P＜0.05),小细胞癌组NSE阳性率高于腺癌组和鳞癌组(P＜0.05),鳞癌组SCC阳性率高于腺癌和小细胞癌组(P＜0.05);血清CEA、CA19-9、CA125、NSE、CYFRA21-1和SCC单项指标诊断肺癌的敏感性分别为52.5％、21.0％、41.5％、56.5％、52.0％、20.0％,均低于6项指标联合检测(91.5％)(P＜0.05).结论 血清CEA、CA19-9、CA125、NSE、CYFRA21-1、SCC6在肺癌诊断及分型诊断中均有一定价值,联合检测6项肿瘤标志物可提高肺癌诊断的敏感性.     

iQ200与显微镜测尿中小圆上皮细胞对比分析及参考区间的建立

目的 通过对iQ200尿沉渣分析仪与显微镜检测尿中小圆上皮细胞结果对比分析,并建立其正常参考区间,为临床诊断提供更为准确可靠的实验数据和科学的参考区间.方法 随机收集本院肾内科和泌尿外科住院及门诊患者共119例,于清晨留取中段晨尿,分别用iQ200尿沉渣分析仪与显微镜检测尿中小圆上皮细胞,并对检测结果进行对比分析;同时随机收集健康体检人群1027例中段晨尿,用显微镜检测尿中小圆上皮细胞,建立健康人群尿中小圆上皮细胞的正常参考区间.结果 以显微镜检测为金标准,尿中白细胞正常情况下,iQ200尿沉渣仪检测尿中小圆上皮细胞略高于显微镜法,差异无统计学意义(t=1.08,P＞0.05);当尿中白细胞增高(WBC＞2倍WBC正常区间上限)情况下,iQ200检测结果高于显微镜法,差异有统计学意义(t=7.21,P＜0.01).本地区健康人群中段晨尿中小圆上皮细胞生物参考区间,年龄与性别之间差异无统计学意义(t=1.26,P＞0.05),女性结果略高于男性.结论 尿中白细胞增高情况下,iQ200尿沉渣分析仪检测尿中小圆上皮细胞与显微镜检测结果之间有较大差异,对白细胞检查结果异常者需用显微镜进行尿中小圆上皮细胞检查,以提高报告的准确性;建立生物参考区间将为临床诊断、治疗提供更有价值的诊断依据.