糖肾平对糖尿病肾病KKAy小鼠肾脏保护作用及对RhoA/ROCK信号通路影响的研究

目的：探讨糖肾平对糖尿病肾病（DiabeticKidneyDisease,DKD）KKAy小鼠肾保护作用及其对RhoA/ROCK信号通路的影响。方法：雌性10周龄SPF级KKAy小鼠60只,KK鼠料诱导10周建立DKD模型,随机分为模型组、厄贝沙坦组、糖肾平低（0.525g?kg-1）、中（1.05g?kg-1）、高（2.1g?kg-1）剂量组,10只雌性C57BL/6J小鼠为正常组。各治疗组灌胃给药,正常组、模型组灌胃等体积去离子水,每4周称体质量并测24h尿蛋白定量。第26周小鼠麻醉后摘眼球取血,称肾质量、测空腹血糖（FastingBloodGlucose,FBG）、血尿素氮（BloodUreaNitrogen,BUN）、血肌酐（Serumcreatinine,Scr）和甘油三酯（Triglyceride,TG）含量;HE、Mallory和PAS染色观察肾组织病理;免疫组化、原位杂交测肾组织转化生长因子-β1（Transforminggrowthfactor-β1,TGF-β1)、Ras同源基因家族成员A（RashomologgenefamilymemberA,RhoA）、Rho相关卷曲蛋白激酶（Rho-associatedcoiledcoil-containingproteinkinase1,ROCK1）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SmoothMuscleActin,α-SMA）、E-钙黏素（ECadherin,E-Cad）mRNA及蛋白表达。结果：与模型组相比,各治疗组体质量、肾质量/体质量、尿蛋白降低,糖肾平中、高剂量组有显著性差异（P＜0.01）;肾病理损害明显减轻,FBG、BUN、Scr、TG含量降低（P＜0.01）,ECadherinmRNA及蛋白表达增加,TGF-β1、RhoA、ROCK1和α-SMAmRNA和蛋白表达减少,糖肾平中、高剂量组差异显著（P＜0.01）。结论：糖肾平对DKDKKAy小鼠肾的保护作用及抑制肾小管上皮细胞转分化的作用,可能与调节RhoA/ROCK信号通路有关。     

宫颈细胞学ASC-US高危HPV阳性患者宫颈病变的结果分析

目的 探讨宫颈细胞学为非典型鳞状上皮细胞意义不明确(ASC-US)合并高危型人乳头瘤病毒(hr-HPV)阳性患者,HPV亚型分布及宫颈病变的情况。方法 回顾性分析2020年6~11月来笔者医院就诊的176例提示细胞学ASC-US,hr-HPV阳性,且行阴道镜下宫颈活检组织病理的患者资料。利用SPSS 26.0统计学软件进行统计分析hr-HPV 基因型与宫颈高级别鳞状上皮内病变(HSIL)及宫颈鳞癌检出率之间的关系。结果 176例ASC-US患者中,89例LSIL,30例HSIL,6例SCC,HSIL+检出率为20.45%;hr-HPV亚型检出率位于前6位的是HPV16、52、58、53、59、18,并且HPV16亚型在各年龄段感染率最高,其次为52型、58型;HSIL+患者主要以16/18单一型感染为主(χ²=28.283,P<0.01),混合型感染hr-HPV的HSIL+检出率以含16/18型的多重感染为主,分别为30%和20%。结论 细胞学ASC-US患者,HPV16、52、58型在各年龄段感染率较高;感染HPV16/18亚型时,HSIL+检出率更高。同时,也需要关注其他高危亚型感染,防止HSIL+患者漏诊。     

白细胞介素－4通过上调蛋白质精氨酸甲基转移酶1的表达水平引起对氧磷酶2的精氨酸甲基化修饰

目的 验证质谱筛选的结果,确定对氧磷酶2(PON2)是否为蛋白质精氨酸甲基转移酶1(PRMT1)的底物蛋白。方法 用白细胞介素-4(IL-4)刺激A549细胞后,用免疫沉淀法捕获发生精氨酸非对称性二甲基化修饰的蛋白,用梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳分析捕获的蛋白,通过银染显示差异性条带,质谱分析差异性条带中的蛋白种类。用免疫沉淀检验PON2的甲基化修饰状态。检测PON2和PRMT1对IL-4表达的浓度依赖性和时间依赖性。用免疫共沉淀检测PON2和PRMT1的相互作用,并在MS203抑制Ⅰ型PRMT后检测PON2的甲基化修饰水平的变化。诱导小鼠哮喘模型,检测PON2表达的组织细胞类型,以及肺组织中PON2和PRMT1的表达水平。结果 (1)质谱分析显示在IL-4处理的A549细胞中检出311个差异显示的蛋白,PON2为其中之一。(2)免疫沉淀显示,IL-4可促进A549细胞中PON2发生精氨酸非对称性二甲基化修饰,但IL-4刺激对PON2的表达水平无影响。(3)PON2与PRMT1有相互作用,IL-4可促进PON2与PRMT1结合,抑制Ⅰ型PRMT活性可以削弱IL-4对PON2发生精氨酸非对称性...     

细菌在雷达下运动:细菌感染与结肠癌的联系

幽门螺杆菌感染与胃癌患病概率增加之间的关联引发了人们关于结肠微生物群与结直肠癌之间可能有关联的想法。输卵管灌气法导致的结肠上皮细胞被产肠毒素脆弱拟杆菌侵袭可能会增加癌变前细胞分化的风险。然而,幽门螺杆菌、脆弱拟杆菌等可调整正常宿主对感染的应答。因此,Keenan等推测,产肠毒素脆弱拟杆菌的侵袭可能是结肠癌发生因素中未被重视     

TGF-β调控的miRNA在肾间质纤维化中研究

<正>微核糖核酸(microRNA)是短的非编码的内源性RNA,结合到其靶mRNAs,并组装到相应的RNA诱导的沉默复合物(RISC)中。miRNA的生物合成包括多个步骤。首先,miRNA在细胞核通过RNA聚合酶Ⅱ或RNA聚合酶Ⅲ转录为具有发夹径环结构的初级miRNA(PRI-MIR)。初级miRNA(PRIMIR)被RNaseⅢ型核酸内切酶Drosha及其辅酶DGCR8剪切     

淋巴管在肿瘤转移中的作用

恶性肿瘤的局部及远处转移是导致患者死亡的根本原因,淋巴管形成以及结构改变的作用与淋巴转移途径密不可分.本文主要针对淋巴管在肿瘤转移过程中发挥的作用进行讨论,并且主要从近几年国际上关于淋巴管上皮细胞分子水平上的机制研究进展作一综述.     

绿激光在泌尿外科中的应用

随着绿激光技术的提高及高功率绿激光系统的推出,绿激光在泌尿外科的应用越来越广泛,其在良性前列腺增生(benign prostatic hyperplasia,BPH)、非肌层浸润性膀胱肿瘤(non muscle-invasive bladder cancer,NMIBC)中的治疗效果已得到了广泛认可,对泌尿系其他一些疾病的治疗也具有独特优势。本文就绿激光在泌尿外科的临床应用作一综述。     

胸腺重建的研究进展

作为T 细胞发育的主要器官,胸腺在产生强大的适应性免疫应答及应对来自病原体和肿瘤的威胁时发挥主要作用。随着对胸腺作用的深入了解,人们逐渐意识到胸腺对急性和慢性损伤均很敏感。胸腺在许多有害因素的作用下会迅速衰退,同时也会随着年龄的增长而衰退。胸腺恢复和重建能使其功能恢复至一定水平。胸腺上皮祖细胞过继免疫、输注IL-2 及血管生长因子、调整c鄄Met 信号通路等均可促进胸腺恢复及T 细胞再生。     

p38MAPK基因对PM2.5染毒HK-2细胞部分癌基因和凋亡相关基因表达的影响

目的：探讨p38MAPK基因对PM_2.5染毒人肾上皮细胞（HK-2）部分癌基因和凋亡相关基因表达的影响。方法：根据GenBank提供的p38MAPK mRNA序列,设计合成干扰序列,将重组慢病毒载体转染HK-2细胞,构建p38MAPK基因沉默细胞株。分别采用实时荧光定量PCR （qPCR）和Western blot法检测p38MAPK mRNA和蛋白的表达水平鉴定沉默效果。用50 μg/mL的PM_2.5混悬液分别染毒正常HK-2细胞和p38MAPK基因沉默细胞24 h,利用荧光定量PCR和Western blot检测癌基因c-myc,c-fos、p53和凋亡相关基因Caspase-8、Caspase-9、Bcl-2的mRNA和蛋白的相对表达水平。结果：qPCR和Western blot检测结果显示,与正常HK-2细胞比较,p38MAPK基因沉默细胞中p38MAPK mRNA的表达下降了58.50%,p38MAPK蛋白表达水平下降了51.33%（P<0.01）。PM_2.5混悬液对HK-2细胞和p38MAPK基因沉默HK-2细胞染毒后,qPCR检测结果显示,与正常HK-2细胞未染毒组比较,正常HK-2细胞PM_2.5染毒组中c-myc、c-fos、Caspase-8和Casepase-9基因表达分别升高39.89%、15.12%、19.47%和15.45%,p53和Bcl-2基因表达分别下降21.54%和31.77%,差异均具有统计学意义（P<0.05）;与正常HK-2细胞PM_2.5染毒组比较,p38MAPK基因沉默HK-2细胞PM_2.5染毒组中c-myc、c-fos、p53、Caspase-8和Caspase-9 mRNA表达分别下降了84.55%、63.55%、34.49%、37.19%和54.97%,差异均具有统计学意义（P<0.05）。Western blot检测结果显示,与正常HK-2细胞未染毒组比较,正常HK-2细胞PM_2.5染毒组中的c-myc和Caspase-8蛋白表达增加,Bcl-2蛋白表达减少;与正常HK-2细胞PM_2.5染毒组比较,p38MAPK基因沉默HK-2细胞PM_2.5染毒组中的c-myc、Caspase-8和Bcl-2蛋白表达减少（均为P<0.05）。结论：成功构建了p38MAPK基因沉默细胞株,PM_2.5可引起HK-2细胞癌基因和凋亡相关基因表达水平升高,p38MAPK基因可能参与PM_2.5对HK-2细胞的毒性作用过程。     

Hoechst33342/PI双荧光活染法检测氟对体外培养大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响

目的研究氟对体外培养的大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响。方法取新生Wistar大鼠肾皮质,制备细胞悬液,传代培养。给予不同浓度的氟化钠(40、80、160μmol/L)处理培养细胞48h后,用Hoechst33342/PI双荧光活染法检测细胞凋亡情况。结果倒置显微镜下发现培养细胞出现细胞碎片明显增多。Hoechst33342/PI双荧光活染法染色检测发现坏死细胞增多。紫外光激发后,40μmol/L NaF处理组出现凋亡细胞,80μmol/L NaF处理组凋亡细胞增多,160μmol/L NaF处理组凋亡细胞明显增多。绿色光激发后,发现80μmol/L NaF处理组出现染色质凝集的晚期凋亡细胞和染色质不凝集的死亡细胞,160μmol/L NaF处理组晚期凋亡细胞较以上各组明显增多。低、中、高氟浓度组凋亡率分别为15.0%、32.4%和62.2%,即随氟浓度的提高,凋亡细胞百分比增加。结论不同浓度的氟均可诱导大鼠肾小管上皮细胞凋亡,随着氟化钠浓度的增加,凋亡细胞增多。