抗细胞膜DNA抗体检测方法的建立及对系统性红斑狼疮诊断价值的临床应用研究

目的 应用间接免疫荧光法(IIF)检测抗细胞膜DNA(cmDNA)抗体,探讨抗cmDNA抗体对系统性红斑狼疮(SLE)的诊断价值.比较以人B淋巴细胞株Raji、人早幼粒白血病细胞株HL60为底物,抗cmDNA抗体在SLE中的检测效果.方法 选取306例SLE患者,192例非SLE疾病对照组,包括脊柱关节病(SPA) 52例,类风湿关节炎(RA) 70例,原发干燥综合征(pSS) 30例,其他结缔组织病(CTD)40例.50名健康志愿者作为对照组.采用IIF法观察培养的人B淋巴细胞株Raji、人早幼粒白血病细胞株HL60的细胞膜的荧光图形;用IIF法检测抗核抗体、抗双链DNA(dsDNA)抗体;联合应用免疫双扩散法和蛋白印迹法检测抗Sm抗体,酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定抗核小体抗体(AnuA).配对资料比较用McNemarX2检验,相关性分析采用Spearman相关及Logistic回归分析.结果以Raji及HL60 2种细胞株为底物检测SLE患者抗cmDNA抗体,敏感性分别为72.5％、76.1％,特异性分别为91.7％、86.8％,差异均无统计学意义(P＞0.05).抗cmDNA抗体的敏感性明显高于抗Sm抗体及抗dsDNA抗体,差异有统计学意义(P＜0.01);特异性与抗dsDNA抗体相似(P＞0.05),日低于抗Sm抗体及AnuA(P＜0.01).抗cmDNA抗体分别与抗dsDNA抗体、抗Sm抗体及AnuA联合检测在SLE诊断中的敏感性均明显高于上述自身抗体单独检测,差异有统计学意义(P＜0.05).抗cmDNA抗体与SLE患者的黏膜溃疡之间有相关性(OR=2.343,P=0.029).抗cmDNA抗体与红细胞沉降率(ESR)有相关性(OR=1.031,P=0.012).抗cmDNA抗体与SLE疾病活动指数(SLEDAI)评分无相关性(r=0.070,P=0.600).本文研究还证实Raji细胞株较HL60细胞株更易复苏、荧光图形亮度更强,表达效果更好.结论 抗cmDNA抗体对SLE诊断的敏感性高,特异性强,可能成为SLE诊断的相对特异性抗体之一.抗cmDNA抗体与抗dsDNA抗体、抗Sm抗体及AnuA联合检测可提高对SLE诊断的敏感性.选择Raji细胞株为底物检测抗cmDNA抗体较HL60细胞株更有优势.     

全俄“21世纪骨骼—肌肉疾病的医学—社会问题学术会议”散记

飞机离开北京刚好 8个小时 ,来到心仪已久的莫斯科。俄罗斯风湿病研究所矫形外科博士阿列克谢教授已在出口处等候 1小时之久。我们承中华医学会风湿病学分会委派 ,应俄罗斯风湿病学会的邀请 ,前来参加全俄“面向 2 1世纪骨骼 肌肉疾病的医学 社会问题学术会议”。会议邀请了ＷＨＯ专员Ｂｒｕｃｅ博士作关于“骨关节炎 10年 ,2 0 0 1～ 2 0 10年”演讲 (内容大抵为张乃峥教授发表于《中华风湿病学杂志》2 0 0 0年第 5期专论之介绍 )。大会交流内容包括风湿病流行病学、急慢性疼痛、风湿病的内外科治疗和实验室检查以及基础研究等。鉴于我们…     

Th17细胞和调节性T细胞在系统性红斑狼疮患者中的研究

目的 研究系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血Th17细胞、调节性T细胞及联系两者的细胞因子白细胞介素(IL)-6的变化及其与病情活动的相关性,探讨Th17细胞、调节性T细胞在SLE发病机制中的作用.方法 收集103例SLE患者及28名健康者,SLE活动性的判断采用SLE疾病活动指数(SLEDAI)评分方法,其中非活动组(SLEDAI≤9分)患者37例,活动组(SLEDAI＞9分)患者66例.用四色分选流式细胞仪检测外周血Th17细胞、调节性T细胞百分数,用流式细胞仪微球捕获芯片技术(CBA)检测血清IL-6浓度,并分析其与病情活动的相关性.统计学处理采用t检验、秩和检验和Spearman相关分析.结果 ①SLE患者组Th17细胞[(1.2±1.1)%]、IL-6[(35±92)pg/ml]显著高于健康对照组[(0.6±0.4)%、(6±3)pg/ml],而调节性T细胞[(1.6±1.2)%]显著低于健康对照组[(2.6±1.8)%].②SLE活动组Th17细胞[(1.6±1.7)%]显著高于SLE非活动组[(1.0±0.7)%]与健康对照组(P均＜0.05),SLE活动组调节性T细胞[(1.5±1.3)%]显著低于SLE非活动组[(2.1±2.0)%]与健康对照组(P均＜0.05),SLE活动组Th17/调节性T细胞(0.68±0.34)显著高于SLE非活动组(0.24±0.20)与健康对照组(0.13±0.09,P均＜0.05),SLE活动组IL-6[(41±22) pg/ml]显著高于SLE非活动组[(32±28) pg/ml]与健康对照组(P均＜0.05);SLE非活动组与健康对照组之间Th17细胞、调节性T细胞、Th17/调节性T细胞、IL-6差异均无统计学意义(P＞0.05).③Th17细胞百分数与SLEDAI呈正相关,调节性T细胞百分数与SLEDAI呈负相关,Th17/调节性T细胞与SLEDAI呈正相关,IL-6浓度与SLEDAI评分之间呈正相关,Th17细胞与调节性T细胞呈负相关.结论 SLE患者外周血Th17细胞、调节性T细胞及IL-6浓度较健康对照组显著增高,并与疾病活动性密切相关,说明Th17细胞、调节性T细胞可能在SLE的发生、发展中起重要作用.

Abstract：

Objective To study the changes of Th17 cell, regulatory T cell (Treg) and interleukin (IL)-6 in the peripheral blood of patients with systemic lupus erythematosus (SLE) and their relationship with disease activity. Methods Percentage of Th17 and Treg in the peripheral blood of 103 patients with SLE and 28 healthy volunteers were detected by flow cytometry. The concentration of IL-6 in SLE patients and healthy volunteers was detected by cytometric bead array (CBA). The disease activity of SLE was measured by SLEDAI. SLE patients were divided into two groups: stable SLE (SLEDAI≤ 9, n=37) and active SLE (SLEDAI＞9, n= 66). The change of Th17, Treg, IL -6 and their relationship with disease activity were analyzed. Nonparamentric tests, t -test and spearman correlation were used for statistical analysis. Results The percentage of Th17 cells and the concentration of IL-6 in the peripheral blood in patients with SLE was higher than that in normal controls [respectively for (1.2±1.1)%, (35±92) pg/ml and (0.6±0.4)%, (6±3) pg/ml, P＜0.05]. However, the percentage of Treg in patients with SLE was lower than that in normal controls [respectively for (1.6±1.2)%,(2.6±1.8)%, P＜0.05]. The percentage of Th17, Th17/Treg IL-6 level in active SLE patients was higher than those in inactive SLE and those in normal controls (P＜0.05). However, the percentage of Treg in active SLE was lower than that in stable SLE patients and that in normal controls (P＜ 0.05). The percentage of Th17, Th17/Treg and concentration of IL-6 was positively correlated to disease activity(P＜0.05). But the percentage of Treg had negative correlation with the percentage of Th17 and disease activity (P＜0.05). Conclusion Th17, Treg and serum IL-6 in SLE patients are abnormal and they maybe contribute to the pathogenesis of SLE.     

强直性脊柱炎伴多发动脉血栓形成一例并文献复习

<正>强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)是临床上常见的自身免疫病之一,AS合并血栓国内外报道不多,且多为个案报道,多为单部位的静脉或动脉血栓,现将我们在临床上遇到的1例极为少见的AS合并多发动脉血栓报告如下,并复习国内外相关文献,以期提高对AS合并动脉血栓的认识,并探讨其发病机制,旨在有效治疗改善预后。     

甲氨蝶呤联合环磷酰胺对大鼠骨髓和外周血淋巴细胞细胞周期和周期蛋白D1作用的研究

目的 探讨甲氨蝶呤(MTX)、环磷酰胺(CTX)联合给药对骨髓和外周血淋巴细胞(PBL)030001 太原,山西医科大学第二医院风湿免疫科细胞周期及细胞周期蛋白(cyclin)的交互作用.方法 健康Wistar大鼠随机分为4个实验组:健康对照组、MTX组、CTX组和联合组(MTX+CTX).在给药前、给药后3、9、18、27周后分别采血,流式细胞术(FCM)检测PBL的细胞周期及cvclin D1.在给药后上述时点检测骨髓淋巴细胞的细胞周期及cyclin D1.结果 ①MTX组,PBL的S期细胞比例明显低于其他各组(P<0.05).骨髓淋巴细胞G0/G1期细胞比例有增高趋势,而S期细胞比例有下降趋势.CTX组对细胞各期比例的影响差异无统计学意义.联合组,PBL和骨髓淋巴细胞G0/G1期细胞比例下降,而S期细胞比例升高(P<0.05).不同解剖时点间比较差异无统计学意义.②对PBL和骨髓淋巴细胞的cyclin D1表达的影响,不同用药组间、不同解剖时点间比较差异无统计学意义.结论 ①MTX、CTX联合用药对正常大鼠PBL和骨髓细胞周期的影响存在拈抗作用,最终阻止了细胞增殖周期的进程.② MTX、CTX联合给药对PBL和骨髓淋巴细胞周期的影响并非通过cychnD1途径来实现.     

自身抗体阳性的未分化关节炎向类风湿关节炎转化的预测价值

目的 探讨类风湿因子(RF)、抗角蛋白抗体(AKA)、抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体、抗核周因子(APF)4种自身抗体对未分化关节炎(UA)转化为类风湿关节炎(RA)的临床预测价值,并分析其临床相关因素.方法 对271例UA患者随访1年,采用免疫比浊法检测RF,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗CCP抗体,间接免疫荧光法(IIF)检测APF与AKA,魏氏法测定红细胞沉降率(ESR),记录患者的晨僵时间、关节肿胀数、关节压痛数、不同关节受累及DAS28评分.结果 4种抗体均阳性的UA患者转化为RA的阳性率为99%;任2种及2种以上抗体阳件的UA患者转化为RA的敏感性83.0%,特异性65.9%;RF/抗CCP抗体阳性的UA患者转化为RA的敏感性77.8%,特异性80.5%;抗体均阴性和任1、2、3种抗体阳性及4种抗体全阳性患者的多关节肿胀及多个小关节受累的比率分别为48%、57%、59%、70%、70%和71%、71%、72%、76%、82%;抗体阴性的UA患者中肘关节受累所占比例最大,为72%;多关节肿胀及多个小关节受累在UA转化为RA与无多关节肿胀及多个小关节受累的转化率最大.结论 4种抗体联合检测可提高RA早期诊断的特异性,阳性抗体越多.UA越容易发展为RA;RF/抗CCP抗体阳性的UA患者转化为RA的敏感性和特异性均较高.多关节肿胀和多个小关节受累对评估RA病情有重大意义.     

不同时间序列COVID-19基因表达与基因调控网络构建

目的 探讨新型冠状病毒肺炎(COVID-19)疾病进展相关的潜在调控因素。方法 从GEO数据库中获得COVID-19的24个全血转录组样本。使用R包“DSEeq2”识别差异表达的mRNA和LncRNA。利用R包“MaSigPro”和短时间序列表达软件(STEM)识别mRNA和lncRNA的时间表达模式。共表达分析用于发现mRNA-LncRNA的共表达模式。利用TRRUST数据库获取转录因子(TFs)。miRcode、TargetScan、miRTarBase和miRDB构建ceRNA调控网络。利用R包“CIBERSORT”表征免疫细胞浸润情况。结果 与健康对照组相比,COVID-19患者在3个伪时间内有3 639个差异的mRNA和304个差异的LncRNA。主要功能富集在细胞分裂进展、细胞对干扰素-γ、干扰素-α的反应。CIBERSOR分析显示,CD₄⁺、CD₈⁺和浆细胞在COVID-19发病轨迹中发挥重要作用。随着疾病的进展,识别了1 750个具有显著差异表达的mRNA和31个lncRNA。在ce...     

2535例类风湿关节炎血清学四种自身抗体长期临床应用研究

选择抗核周因子(APF)、抗角蛋白抗体(AKA)、抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体,同时联合检测类风湿因子(RF),对2535例类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,BA)患者进行长达10年的临床研究,进一步说明其临床应用价值.     

来氟米特与甲氨蝶呤治疗银屑病关节炎皮肤病变的临床研究

目的 评价来氟米特(LEF)、甲氨蝶呤(MTX)以及小剂量MTX和LEF联合治疗(MTX+LEF)对银屑病关节炎(PsA)皮肤病变的疗效与安全性.方法 2个中心的开放性临床对照研究.选确诊的PsA患者,接受MTX、LEF、MTX+LEF中的任何一种治疗方案.治疗24周.以银屑病皮损面积和严重性指数(PASI)提高50%、75%(PASI 50、PASI 75)为银屑病皮损疗效指标,对皮肤病变进行评估;并分析皮肤病生命质量指数(DLQI)、健康评估问卷(HAQ)的变化.计量资料的比较采用单因素方差分析、重复测量方差分析、Wilcoxon符号秩和检验,计数资料的比较采用X~2检验.结果 治疗24周时MTX、LEF、MTX+LEF组达到PASI 50改善的比例分别为92%、50%、94%;达到PASI 75的比例分别为75%、31%、83%.研究终点时达到PASI 50和PASI 75改善的比例在LEF组显著低于MTX和MTX+LEF组(P<0.05). 24周后3组HAQ得分均显著低于基线水平,联合治疗组HAQ的改善程度显著优于MTX组.MTX组和联合治疗组PASI和DLQI得分显著低于基线水平(P<0.05). MTX、LEF、MTX+LEF组与药物相关的不良反应发生率分别为39%、39%、35%,无严重不良事件发生.结论 3种治疗方法 对PsA的皮肤病变均具有良好的疗效和安全性,小剂量MTX和LEF联合治疗PsA的皮肤病变比单用LEF具有更好的疗效.     

以发热为首发表现的皮肌炎患者临床特征分析

目的探讨以发热为首发表现的皮肌炎(DM)患者的临床特点。方法将71例DM患者按首发症状有无发热进行分组,起病急缓进行分层,对其临床资料分别进行分析。结果①71例DM患者,发热首发组24例,急性起病(皮疹和肌炎的发生时间≤6月)16例(67%),慢性发病(皮疹和肌炎的发生>9月)8例(33%);非发热首发组47例,急性起病26例(55%),慢性发病21例(45%);②首发表现:24例以发热起病的DM患者,首发症状仅有发热7例(29%),发热伴皮疹13例(54%),发热伴肌无力2例(8%),发热、皮疹和肌无力同时出现2例(8.3%);③皮肤表现:非特征性皮疹在2组急性发病患者中进行比较,16例发热首发组非特征性皮疹占12例(75%),26例非发热首发组非特征性皮疹3例(12%),2组比较差异有统计学意义(P<0.01);④肌炎表现:在急性和慢性起病患者中,肌力Ⅰ～Ⅲ级和肌酸激酶升高的发生率,发热首发组均低于非发热首发组。其中急性起病患者,肌酸激酶升高,发热首发组与非发热首发组相比差异有统计学意义(P<0.05);发热首发组急性起病患者肌电图肌源性损害达87%;⑤系统损害:在急性起病患者中,发热首发组16例,发生系统损害13例(81%),其中11例(69%)为严重的系统损害;非发热首发组26例,系统损害9例(35%),其中3例(12%)严重系统损害,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论以发热起病的DM患者起病急,病情危重而临床特点不典型,易延误治疗,一旦确诊后,需高度关注,密切随访。