分离、培养及纯化嗅鞘细胞的简便方法

目的：建立一种免胰酶消化的剪切分散法提取嗅鞘细胞（olfactory ensheathing cells,OECs）并优化其纯化培养方法。方法：从成年SD大鼠解剖分离嗅球,显微镜下剥离软脑膜、剔除中央白质,将灰质成分置于含10%胎牛血清的DMEM/F12全培养基,眼科剪剪切至组织成糜状,吸管吹打15-20次, 混悬液免胰酶消化直接接种培养,每三天半量换液。原代培养至细胞大部分融合后,依次以低浓度胰酶（0.05%）有限消化法、30min短时差速贴壁法、抗有丝分裂法三步顺序纯化细胞,每步纯化结果作免疫荧光染色鉴定。结果: 原代培养中嗅鞘细胞快速贴壁成为优势细胞、生长旺盛,三步顺序纯化过程细胞纯度逐步提高,最终纯度可达95%以上并长时间维持。结论:剪切分散法提取OECs及其三步顺序法纯化培养经济实用、易重复,细胞培养周期短,能收获大量可控纯度的嗅鞘细胞供进一步移植实验及基础研究。     

脊柱手术后硬脊膜外血肿诊治方法

硬脊膜外血肿(spinal epidural hematoma,SEH)是脊柱手术后较为少见的并发症,若错过最佳治疗时机,可留下灾难性的神经功能障碍.     

针刺结合运动训练干预脑梗死大鼠海马CA3区微管相关蛋白及突触素表达及学习记忆功能变化

实验观察针刺百会(GV20)、曲鬓(GB 7)和前顶穴(GV21)联合运动训练干预和件下大脑中动脉闭塞大鼠模型大鼠海马CA3区微管相关蛋白2和突触素蛋白的表达,并和单独运动训练干预的大鼠对比。Y型迷宫实验和免疫组织化学染色显示,建模后5周,针刺联合运动训练组穿越Y型迷宫错误次数均少于模型组和运动训练组,针刺联合运动训练组的微管相关蛋白2和突触素表达明显增高,各组海马CA3区的微管相关蛋白2,突触素的表达和穿越Y型迷宫错误次数均呈明显的负相关性。说明针刺联合运动训练可以改善脑梗死大鼠学习和记忆功能,其机制与海马CA3区的树突及突触可塑性有关。     

条件培养基、Forskolin与bFGF对嗅鞘细胞增殖效应的研究

目的研究对比多种不同增殖剂及其联合剂扩增原代嗅鞘细胞的效应。方法将纯化的嗅鞘细胞按照随机化原则分为六组分别行增殖剂干预：①空白对照组;②有血清条件培养基组;③Forskolin组;④bFGF组;⑤Forskolin＋bFGF组;⑥有血清条件培养基＋Forskolin＋bFGF干预组。每组干预3d后应用免疫染色和BrdU掺入法全面评估各增殖剂及其联合试剂对嗅鞘细胞生长增殖的影响效果。结果三种增殖剂较空白对照组都可促进嗅鞘细胞活性（P〈0.05）,且其联合试剂均可明显促进嗅鞘细胞增殖（P〈0.001）。结论三种增殖剂对嗅鞘细胞均有增殖效应,且其联合作用可以大幅提升嗅鞘细胞的数量,其叠加效果明显。     

后路经椎弓根半椎体切除减压、钛网和椎弓根内固定治疗胸腰段爆裂性骨折合并脊髓损伤

目的探讨后路经椎弓根半椎体切除、内固定治疗胸腰段爆裂性骨折伴脊髓损伤的疗效。方法 25例严重胸腰段爆裂性骨折伴脊髓损伤患者采用后路经椎弓根半椎体切除减压、钛网和短节段椎弓根内固定治疗。评估治疗前后ASIA下肢运动功能评分(AMS)。结果术后随访12～23个月,骨折均达到复位并临床愈合,未发生内置物断裂和螺钉松动现象,无明显矫正丢失。术后末次随访AMS评分显著高于术前(79.2分vs.36.8分)(P<0.05)。结论后路经椎弓根半椎体切除减压、钛网和短节段椎弓根内固定治疗胸腰段爆裂性骨折伴脊髓损伤,具有创伤小、椎管减压彻底和复位固定良好等优点。     

组织工程支架材料在脊髓损伤修复中的应用

背景：脊髓损伤最初往往会导致细胞和组织的不断丢失,组织工程支架可以模拟细胞外基质的生理状态,从而有利于细胞的黏附、迁移、扩增和分化。 目的：总结近年来组织工程支架材料联合细胞和/或细胞因子修复脊髓损伤的新进展。 方法：应用计算机检索PubMed、Ovid Medline及CBM数据库中2000-10/2010-10 与组织工程支架材料修复脊髓损伤相关的文章。  结果与结论：组织工程材料治疗脊髓损伤需要3 因素：种子细胞、组织工程支架、细胞因子。组织工程支架对于损伤脊髓断端起到桥接作用,而种植于材料的种子细胞和/或细胞因子可以促进神经轴突的生长和迁移。可用于组织工程支架的材料可分为天然材料和人工合成材料,包括胶原、壳聚糖、琼脂糖/藻酸盐、聚乳酸、纤连蛋白、聚羟基乙酸/聚乳酸、聚β羟丁酸等,动物实验已经取得一些成果,显示组织工程支架材料联合细胞移植修复效果更好,但临床上目前尚无开展组织工程支架材料修复脊髓损伤的研究。     

脊髓型颈椎病患者颈椎动态MRI检查价值与安全性分析

目的 探究脊髓型颈椎病（CSM）患者颈椎动态MRI（DMRI）检查的价值与安全性。方法 2019年1月—2021年9月，87例CSM患者于苏州大学附属第二医院行颈椎DMRI检查。在矢状面前屈、后伸和中立位MRI T2加权像上观察是否存在脊髓隐匿性压迫。记录患者在DMRI检查前后的症状及体征、疼痛视觉模拟量表（VAS）评分。以DMRI检查后原有症状或体征加重或出现新的症状与体征考虑为短期内脊髓损伤加重。结果 87例患者中17例（19.5%）存在脊髓隐匿性压迫，其中2例在前屈位MRI检查中发现，15例在后伸位MRI检查中发现。DMRI检查后73例患者无明显不适，出现颈肩部不适5例，轻度头晕4例，呼吸不畅、轻度胸闷3例，恶心2例，DMRI检查后VAS评分无下降。85例患者无脊髓神经损伤加重，2例脊髓钳夹伴MRI T2加权像高信号改变患者检查后症状、体征加重。结论 颈椎DMRI是一种相对安全的补充检查，19.5%（17/87）的CSM患者在屈、伸位MRI检查中可发现脊髓隐匿压迫，脊髓钳夹损伤伴MRI T2加权像高信号改变的CSM患者应慎行DMRI检查。