抗CD20scFv-Fc-CD28/ζ基因修饰T细胞靶向杀伤Raji细胞的研究

目的 研究重组抗cD20scFv-Fc-CD28/ζ基因修饰T淋巴细胞在杀伤Raji细胞时T细胞活化情况和诱导Raji细胞凋亡的变化,进一步探讨特异基因修饰T细胞杀伤淋巴瘤细胞的机制.方法 将重组质粒转染至PA317细胞中,用转染成功的PA317培养液感染外周血T淋巴细胞后,用800μg/ml的G418筛选1周后杀伤Raji细胞,分别在不同时间点用流式细胞仪检测Raji细胞Bcl-2的阳性率,用ELISA检测培养上清液中的IL-10、IFN-γ.结果 Raji细胞Bcl-2的阳性率在24 h内就明显下降,72 h内由98.43%下降到38.45%,下降幅度明显高于对照组和空白组.72 h检测IL-10发现实验组为100.3 pg/ml,明显低于对照组(210.88 pg/ml)和空白组(286.71 pg/ml),同时IFN-γ的分泌量(1487.23 pg/ml)也显著高于对照组.结论 抗CD20介导的T细胞靶向杀伤Raji细胞不需要CD28的协同刺激.CD28和CD3ζ协同刺激可增强T细胞抑制Raji细胞TL-10表达使其降低Bcl-2的表达从而加速靶细胞的裂解.CD28/ζ在没有外源协同刺激分子B7/CD28时能允分激活T细胞,促进其分泌IFN-γ,增强了抗CD20修饰T细胞靶向杀伤Raji细胞的能力.     

增强型绿色荧光蛋白RNAi表达载体的构建和鉴定

目的构建靶向增强型绿色荧光蛋白基因（EGFP）的RNA干扰质粒载体。方法设计并合成针对EGFP编码区的模板寡核苷酸单链,克隆入pSilencerTM 3.1-H1 neo载体中,对重组质粒进行酶切鉴定和DNA序列测定。结果重组质粒经限制性内切酶酶切得到66 bp和4.3 kb条带;重组阳性克隆测序结果与实验设计的模板寡核苷酸序列相符。结论成功构建靶向EGFP的RNA干扰表达载体,为RNA干扰技术在实验室的进一步开展奠定基础。     

心脑通胶囊对犬急性心肌缺血的影响

目的观察心脑通胶囊对实验性犬急性心肌缺血的影响,为进一步临床研究提供理论依据.方法心脑通胶囊经消化道给药后,采用心外膜标测和定量组织学硝基四氮唑蓝染色法,测定心肌梗塞范围及损伤程度.结果心脑通可明显减轻由心外膜电图所标测的心肌缺血程度(∑-ST)及心肌缺血范围(N-ST)明显减小通过N-ST染色所显示的梗塞区.结论心脑能对犬急性心肌缺血有明显的改善作用.     

“1+1”临床药师药学咨询服务模式在治疗药物监测中的应用

目的:通过对上海长海医院日常治疗药物监测中"1+1"临床药师咨询工作记录进行回顾性分析,总结经验,以提高治疗药物监测服务的质量。方法:以2011年治疗药物监测咨询记录共150份为统计对象,分别按咨询方式、咨询者身份、咨询项目及咨询内容进行分类汇总分析。列举一些特殊案例,提出合理性建议。结果:药学咨询方式以窗口咨询居多,有120例,占80%;咨询者中患者及其家属有135例,占90%;在8个常规监测项目中,针对环孢素和他克莫司的咨询有123例,占82%;咨询的内容均为治疗药物监测的专业性问题,涉及出院教育、相互作用、依从性和不良反应等。结论:深入开展治疗药物监测咨询工作,对促进特殊患者合理用药有非常重要的意义,有利于提高临床对临床药师的认可度,以及进一步树立临床药师的公众形象。     

澳大利亚气候温和的城市中热浪对精神疾病的影响

研究人员在南澳大利亚州首府阿德莱德收集1993—2006年的健康状况数据,研究热浪对精神、行为、认知方面障碍的医院门诊量和死亡率的影响。研究人员采用Poisson回归来解决数据过度分散问题,控制季节与长期趋势,应用hockey stick回归进行阈值分析。气温在26.7℃(阈值)以上时,环境温度和医院精神、行为方面障碍的门诊量成正相关。与非热浪时期相比,热浪     

心率变异性与长期暴露于二氧化氮的关系

瑞士科学家对长期暴露于NO_2与年龄≥50岁人群(1 408人,其中女性725人,男性683人)心率变异性的关系进行了队列研究,他们记录调查对象24h心电图变化,了解其健康状况并测量血压、身高和体重,运用多种模型对调查对象居住区年NO_2暴露状况进行估测。研究人员采用多元线性回归模型研究NO_2暴露与心率变异性的关系。对于女性,年均NO_2浓度每增加10μg/m~3,24 h全部正常RR间期的标准差下降3%(95%CI:-4～-1),夜间低频功率下降6%(95%CI:-11～-1),夜间高频与低频功率之比下降     

脑源性神经营养因子PLGA纳米粒的处方工艺研究

目的制备脑源性神经营养因子聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)纳米粒,使用星点设计-效应面法对处方工艺进行优化筛选。方法以生物降解型聚乳酸-羟基乙酸共聚物为载体材料,采用复乳化溶剂挥干法制备脑源性神经营养因子PL-GA纳米粒。观察纳米粒的形态、大小和粒径分布。以PLGA的用量及形成复乳时PVA含量为考察因素,体外释放为评价指标,用线性方程和二次及三次多项式描述体外释放和两个影响因素之间的数学关系,根据最佳数学模型描绘效应面,选择最佳处方,并进行预测分析。结果各指标的三项式拟合方程均优于多元线形回归方程,建立的数学模型的预测值与实际值符合较好。结论用星点设计-效应面法优化处方工艺预测性良好。     

抗氧化微量营养素对1型糖尿病大鼠Th2型细胞因子IL-4、IL-10表达的影响

目的:研究抗氧化微量营养素(antioxidantmicronutrients,AM)对1型糖尿病大鼠Th2型细胞因子IL4、IL10基因表达的影响,以探索改善胰岛功能,防止糖尿病发生与发展的营养学因素。方法:应用链脲佐菌素(STZ)小剂量、多次注射法诱导大鼠1型糖尿病模型。AMSe、VE、V、Cr通过饮食方法补充。外周血、脾脏淋巴细胞IL4、IL10基因表达检测应用流式细胞术。血糖及自由基代谢通过生化分析法完成。结果:补充AM组大鼠外周血及脾组织IL4、IL10阳性淋巴细胞百分比明显高于模型对照组(P<0.05,P<0.01),其中Se+VE+V+Cr组升高更明显;糖尿病模型组IL4、IL10表达处于最低水平。补充AM各组较模型组明显增加了胰岛素分泌储备(P<0.05)。与模型组相比,AM补充各组血糖水平显著降低,GSHPx活力水平升高,MDA含量明显下降(P<0.05)。结论:AM最适剂量与组合不仅可以调节糖尿病大鼠胰岛素代谢、减轻氧化侵袭,而且通过上调IL4、IL10等Th2型细胞因子表达减轻胰岛损害。     

增生性瘢痕治疗药物的研究

通过对药理作用机制的综述,提出了今后应该运用高通量筛选法、基因芯片技术、反义技术等药理学中的新发法、新技术来进一步明确增生性瘢痕药物作用的靶点,特别是从天然产物中寻找药理作用明确的活性单体是药学工作者今后开发研制增生性瘢痕治疗药物的重要任务;通过对药物剂型研究现状的综述,提出了可以设计一些控、缓释制剂以及以新型的高分子材料为基质的制剂,特别提出把巴布剂应用于增生性瘢痕的治疗的思路;通过对临床应用局限性的综述,提出了不同单味中药中的活性单体所组成的复方新剂型的药物是增生性瘢痕治疗药物发展新方向的观点。