肠道病毒71型对Vero细胞线粒体的损伤作用及机制

目的探讨肠道病毒71型（EV71）对Vero细胞的损伤作用及机制,为分析EV71的致病机制提供新思路。方法将临床分
离的一株EV71接种于Vero细胞,观察细胞的形态改变,用免疫荧光方法检测EV71抗原在Vero细胞中的表达,用透射电镜观察
Vero细胞超微结构的改变,用Image-Pro Plus 6.0图像分析软件测试分析病毒颗粒直径和面积密度以及空泡化线粒体的比例和
面积密度。结果EV71感染后Vero细胞形态发生改变,由梭形变为圆形或死亡,免疫荧光检测显示EV71抗原定位于胞质,超
微结构观察可见胞质中有大量呈团块状分布、晶格状排列的高电子密度病毒颗粒,颗粒平均直径为16.3 nm,平均面积密度为
38.3%;线粒体肿胀、变性并空泡化、崩解,空泡化线粒体数量约占90.9%,平均面积密度为89.2%;部分线粒体内可见EV71病毒
颗粒。结论EV71感染Vero细胞后在其胞质中增殖,并可侵入线粒体,导致线粒体直接损伤并致细胞死亡;线粒体是EV71在
Vero细胞内的作用靶标。
     

YY1 在胰岛素瘤中的表达及意义

目的探讨YY1在良、恶性胰岛素瘤组织中的表达情况及意义。方法收集2000~2014年南方医院19例胰腺神经内分泌 肿瘤组织蜡块,利用免疫组化法检测19例标本中YY1的蛋白表达水平。结果YY1在良恶性胰岛素瘤中组织中都有表达,恶性 胰岛素瘤组织中YY1表达强度高于良性胰岛素瘤组织（P=0.042）,YY1表达强度与胰岛素瘤的良恶性质存在正相关关系（P= 0.037）,YY1表达强度高的胰岛素瘤更具恶性潜能。结论YY1的高表达强度与胰岛素瘤发生发展有一定关系,YY1有望成为 检测胰岛素瘤恶性转化的新肿瘤标志物。     

一种快速简易的细胞凹点搜寻算法

在研究细胞形状时,凹点是一个非常有意义的参数.本研究设计了一种简易的细胞凹点搜寻算法,该算法主要计算一次凸闭包,将凸闭包与原图相减后得出凹区,根据凹区与原图中心点的最短欧式距离来判断原图上的凹点.本算法将细胞轮廓上的凹点搜寻转换为凹区轮廓上的凸点搜寻,搜寻范围大大减少,实验结果证明算法可靠,运算速度快.     

肺癌及其转移癌甲状腺转录因子-1 mRNA表达的定量测试及分析

目的 观察甲状腺转录因子-1(TTF-1)mRNA在正常成人肺泡Ⅱ型上皮细胞、人胚胎肺泡上皮细胞、肺癌原发灶及淋巴结转移灶癌细胞中的表达,从mRNA水平探讨其在肺癌发生、发展及转移中的意义.方法 应用组织芯片和原位杂交技术检测1320点阵石蜡组织芯片中TTF-1 mRNA的表达.用Leica Q500MC图像分析系统定量测试TTF-1 mRNA表达强度.结果 胚胎肺TTF-1 mRNA的表达强度小于正常成人肺(P=0.000);肺腺癌、鳞癌、小细胞癌和大细胞癌TTF-1mRNA的表达强度均小于胚胎肺和正常成人肺(P=0.000);肺腺癌和小细胞癌TTF-1mRNA的表达强度均大于肺鳞癌和大细胞癌(P=0.000);肺腺癌与小细胞癌TTF-1 mRNA的表达强度基本相同(P=0.068);肺鳞癌TTF-1 mRNA的表达强度大于大细胞癌(P=0.018);肺腺癌、鳞癌和大细胞癌淋巴结转移灶TTF-1 mRNA的表达强度均大于其原发灶(P=0.003,P=0.000,P=0.019);肺小细胞癌淋巴结转移灶TTF-1 mRNA的表达强度大于其原发灶(P=0.078);有淋巴结转移组TTF-1 mRNA的表达强度大于无淋巴结转移组(P=0.026);TNM分期Ⅱ-Ⅳ期TTF-1 mRNA的表达强度大于TNM Ⅰ期(P=0.010);肺癌TTF-1 mRNA的表达强度与患者性别、肿瘤大体类型和分化程度无关.结论 TTF-1 mRNA的表达强度在正常成人肺泡Ⅱ型上皮细胞、胚胎肺泡上皮细胞和肺癌细胞中具有差异性并依次减少;肺癌TTF-1 mRNA的表达具有癌组织类型差异性,腺癌和小细胞癌相对较高,鳞癌和大细胞癌极少;TTF-1 mRNA高表达的肺癌易发生转移,TTF-1 mRNA高表达的肺腺癌、鳞癌和大细胞癌为具有明显转移能力的肺癌细胞的重要标志之一.     

《病理学》优质在线开放课程的建设与实践

一流课程“双万计划”建设对高校人才培养提出了新的要求,随着“互联网+”教育教学模式在全国高等医学院校的迅速开展,为加强学生自主学习能力、培养高素质复合型人才提供了更大的空间和可能,而迅速转换教学模式及培养方案则成为了全国高等教育教学工作者面临的共同挑战。病理学是医学之本,是基础医学与临床医学之间的桥梁课程,同时又是一门实践性非常强的学科,在医学教学中占有重要地位。结合新时期的要求,同时在新的教育背景和多元化的教学模式推动下,病理学的教学改革更是刻不容缓。广东省在线开放课程《疾病的奥秘——病理学》结合多元化的教学模式、一体化的教学手段及系统的评价体系,注重学生综合能力的培养,将自主学习、翻转课堂、理论与实践教学多方位有机结合,实现了病理学教学的新突破,并且在特殊时期,在推动高校医学素质教育及人文教育中表现出了卓越的成效。     

LASS2在鼻咽癌中的表达及其意义

目的:探讨LASS2在鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)的发生与发展中的作用.方法:收集2011年6月至2014年12月佛山市顺德区中医院治疗并随访的Ⅰ~Ⅳ期鼻咽癌病例127例,其中鼻咽癌Ⅰ期12例(A组),鼻咽癌Ⅱ期26例(B组),鼻咽癌Ⅲ期52例(C组),鼻咽癌Ⅳ期37例(D组),以及慢性鼻咽炎病例49例(E组).采用免疫组织化学方法检测LASS2蛋白在鼻咽活检组织中的表达.并收集鼻咽癌各组的相关临床资料,分析LASS2表达与各临床因素之间的相关性.结果:LASS2在鼻咽癌病例中的表达率(A,B,C,D组表达的百分率分别是75%,73.1%,78.8%及81.1%)低于慢性鼻咽炎病例中的表达率(E组表达的百分率为100%),其差别具有统计学意义(P=0.008).LASS2的表达与肿瘤的复发存在负相关性(P=0.001),但LASS2阳性病例与LASS2阴性病例的无瘤生存期的差别无统计学意义(P>0.05).结论:LASS2是一种抑癌基因,其蛋白产物表达于非肿瘤性的鼻咽组织中.鼻咽癌发生过程中可能发生了蛋白的丢失,从而促进鼻咽癌的发病.LASS2蛋白的丢失与鼻咽癌复发也存在相关性,LASS2可能成为预测鼻咽癌复发的有临床意义的生物学指标.     

微波解冻法对冷冻组织细胞角蛋白免疫组化检测影响的实验研究

目的：揭示微波解冻对冻结组织免疫组化染色效果的影响,为用微波解冻冷冻组织进行免疫组化染色提供实验依据。方法：将清洁级大耳白家兔分为常规对照组、自然解冻组、温水解冻组、微波解冻组。用空气将家兔栓塞致死后取其肝、肺、肾组织,包埋并制成切片,进行广谱细胞角蛋白免疫组化染色并观察染色结果。结果：微波解冻对肝、肾、肺冻结组织中细胞角蛋白抗原的影响不明显,均能正常显色。结论：冻结组织微波解冻对细胞角蛋白的免疫组化检查未见明显不良影响,提示温和的微波解冻对组织中细胞角蛋白抗原影响不明显。     

苏木素复染对免疫组化显色强度定量分析的影响

目的探讨苏木素复染是否影响免疫组化显色反应强度,为免疫组化定量分析的质量控制提供科学依据。方法用免疫组织化学方法检测GLC-82肺腺癌细胞株细胞蜡块中Ki67、Tiam1的表达,检测分为复染组和非复染组;在Nikon显微镜下通过Canon数码像机和Zoom Browser Ex采图软件随机截取样品显色反应细胞图像,用Imagepro Plus图像分析软件,分别测试苏木素复染与不复染时GLC-82细胞Tiam1、Ki67蛋白表达的阳性单位(PU值),每组各测试100个细胞。结果苏木素复染后GLC-82细胞Tiam1的PU值为(36.76±5.12),大于未复染Tiam1的PU值(26.64±5.09,t=9.906,P=0.000),相对偏差为38%。苏木素复染后GLC-82细胞Ki67的PU值为(21.74±4.59),大于未复染Ki67的PU值(14.37±4.65,t=7.985,P=0.000),相对偏差为51%。结论经苏木素复染,Tiam1、Ki67的PU值均明显增大,且核表达抗原Ki67的相对偏差明显大于浆表达抗原Tiam1的相对偏差。因此,对免疫组化结果定量分析时,为保证测试结果的可靠性,不应进行苏木素复染。     

电镜样本半薄切片HE染色前的处理

在进行电镜样本的超薄切片前,为了克服超薄切片的盲目性和电镜视野的局限性对目的视野观察的影响,电镜工作者普遍采用半薄切片技术制作0．5－Zmp的半薄切片,对其进行染色后在光学显微镜下观察和选择超薄切片的部位。但是半薄切片是由树脂包埋过的,直接对其染色往往有一定的困难。目前普遍采用的甲苯胺兰染色使视野呈现单一的蓝色,可辨性不强,我们根据自己的工作经验,介绍一种半薄切片的HE染色方法。至半薄切片的制备与固定进行半薄切片可直接在超薄切片机上或在专门设计的半薄切片机上切片,通常用玻璃子刀可以较容易切出Zmp厚的切…     

产毒性大肠杆菌毒力表达环境调控 的机理研究

目的 探讨产毒性大肠杆菌（ETEC）毒力受环境因素调控的机理。方法 采用ELISA及DNA－RNA杂交法观察在不同培养条件下,ETEC毒力因子及毒力基因mRNA的表达;并且比较加入或不加入DNA解旋酶抑制剂novobiocin和coumermycinA1对ETEC毒力因子及其基因mRNA表达的影响。结果 ETEC肠毒素（LT和ST）及定居因子（CFA）表达均与mRNA毒力因子及其基因mRNA呈剂量反应关系;novobiocin和coumermycinA1对ETEC生长的影响也受细菌培养环境的影响;在正常培养条件下,novobiocin或coumermycinA1对ETEC的生长有轻微抑制作用,毒力的表达也相对较低,但在培养环境改变时,如：在novobiocin 20μg/ml或coumermycinA1 2μg/ml的作用下,LT、ST和CFA的表达均明显增加,mRNA的表达也明显增高。结论 环境刺激可能通过影响ETEC染色体DNA毒力调控基因的超螺旋结构而调控ETEC毒力的表达。