裸小鼠高成瘤性人白血病细胞系的建立及其生物学特性观察

为研究人白血病细胞在胸腺缺陷裸小鼠的成瘤性，采用体内和体外传代相结合的方法建立了裸小鼠高成瘤性的ＨＬ６０－ｎ和Ｋ５６２－ｎ细胞系。ＨＬ６０－ｎ和Ｋ５６２－ｎ细胞接种裸小鼠的肿瘤发生数均为８／８，较ＨＬ６０和Ｋ５６２细胞明显增高。实验还证明ＨＬ６０－ｎ和Ｋ５６２－ｎ细胞在软琼脂培养的集落形成率及大集落（＞２００个细胞）的比例均较ＨＬ６０和Ｋ５６２细胞显著增高，提示白血病细胞在裸小鼠体内的成瘤性增强与体外培养的集落形成能力增高有关。     

异种输血--猕猴受输猪红细胞的初步研究

本研究的目的是改造猪红细胞（pRBC）表面抗原，使之与灵长类动物相容，以探讨异种输血的可能性。结合使用α半乳糖苷酶（AGL）酶解和甲氧基聚乙二醇（mPEG）修饰改造猪红细胞表面异种抗原，并输注给猕猴，观察pRBC在猕猴体内活存时间及安全性；使用免疫抑制剂（蛇毒因子CVF和地塞米松）延长pRBC在猕猴体内的存活时间；建立失血性贫血猕猴模型，观察输注pRBC治疗失血性贫血猕猴的可能性。结果表明：AGL酶解能够去除猪红细胞表面主要异种抗原（α—Gal抗原），减弱其与猕猴血清的凝集反应，酶解技术与mPEG修饰技术结合可以使猪红细胞与猕猴血清更为相容。异种输血试验表明，双修饰的pRBC在猕猴体内存活时间为12小时，使用免疫抑制剂后，可延长至40小时；pRBC在猕猴体内8小时的存活率为38％，在输注pRBC的8小时内，失血猕猴的血红蛋白和红细胞压积可维持在失血前的正常水平。结论：改造后的pRBC可安全地输注给猕猴，改善失血猕猴的贫血症状．提示用猪红细胞进行异种输血是可能的。     

自体焦痂与异种脱细胞真皮微粒皮肤移植术治疗皮肤烧伤疗效比较

目的比较自体焦痂与异种脱细胞真皮微粒皮肤移植术治疗皮肤烧伤的疗效。方法选择2014年1月至2015年1月新乡市第二人民医院收治的皮肤烧伤患者24例,随机分为对照组和观察组,每组12例,对照组患者接受异种脱细胞真皮微粒皮肤移植术,观察组患者行自体焦痂微粒皮肤移植术,观察2组患者覆盖物外观变化、微粒皮肤存活情况及术后愈合情况。结果观察组和对照组患者残留创面分别为(21.3±4.3)%和(34.8±3.4)%,观察组患者残留创面显著小于对照组(t=8.531,P<0.05)。观察组和对照组患者创面愈合时间分别为(66.3±13.1)d和(53.7±15.3)d,观察组患者创面愈合时间显著长于对照组(t=2.199,P<0.05);观察组和对照组患者创面愈合率分别为(89.7±23.2)%和(70.3±21.4)%,观察组患者创面愈合率显著高于对照组(t=2.158,P<0.05)。观察组和对照组患者满意度评分分别为23.1±5.7和17.8±5.5,观察组患者满意度评分显著高于对照组(t=2.274,P<0.05)。结论自体焦痂微粒皮肤移植术治疗皮肤烧伤创面愈合率较高,外观较好,其疗效优于异种脱细胞真皮微粒皮肤移植术。     

异种脱蛋白骨修复长骨大段骨缺损实验研究

目的研究改良法制备的异种脱蛋白骨（deproteinated bone,DPB）作为组织工程支架材料修复大动物长骨大段缺损24周后新生骨的生物力学变化。方法山羊18只,采用完全随机设计法分为正常骨对照组、自体骨组和实验组,每组6只,在自体骨组和实验组每只山羊右侧胫骨中下段造成胫骨总长度20％骨膜和骨缺损,正常骨对照组不截骨,其余2组分别在缺损处植入自体骨、DPB＋自体MSCs＋rhBMP2,采用半环槽外固定,术后24周取手术侧胫骨进行生物力学检测。结果术后24周,正常骨对照组、自体骨组和实验组新骨生物力学相比无统计学差异（P〉0．05）。结论改良法制备的异种DPB复合物作为组织工程支架材料修复大动物长骨大段缺损形成的新骨,其生物力学与正常骨对照组、自体骨组相当,可作为骨移植材料试应用于临床。     

023 供体骨髓输注在肾脏移植耐受中的疗效和机制

同种移植免疫耐受的诱导和维持是控制移植后排斥反应,提高移植物存活的关键.动物实验及临床资料表明骨髓输注具有诱导免疫耐受的作用,其机制包括诱导T细胞无能,克隆清除,提供可溶性HLA抗原、抑制细胞及否决细胞,调节细胞表面分子及细胞因子,促进嵌合体的形成.因此,供体骨髓输注在诱导移植免疫耐受中具有相当的应用前景.     

补体靶向治疗研究进展

越来越多的证据表明 ,炎性疾病的发生、发展同补体的活化有关。因此 ,如何干扰和抑制补体活化产生的有害作用 ,成为药理学研究的焦点之一。利用内源性可溶性补体抑制剂来阻断级联反应中的关键蛋白、或中和补体激活产生的过敏毒素C5a及干扰CR3介导的中性粒细胞同血管内皮细胞的粘附等 ,在各种动物模型中均获得了成功 ,并将一些有前途的研究成果应用于临床实验。此外 ,人膜结合补体调节蛋白(mCRP)转基因动物的应用 ,对异种移植超急性排斥反应的防治起到了极大的推动作用。同时 ,随着人们对肿瘤细胞逃避机体免疫防御机制研究的不断深入及各种药物干扰因素的应用 ,补体介导的肿瘤细胞毒作用得到明显增强     

应用脉冲场电泳技术研究中国人4q35与10q26亚端粒区EcoRⅠ片段的结构多态性

目的研究中国人4q35与10q26同源性EcoR片段的结构多态性,探讨该区域的可塑性、易位和体细胞嵌合现象及其与D4Z4重复单位缺失的关系。方法研究对象包括110名无血缘关系的健康成年人。低熔点胶包埋法抽提基因组DNA。同一样品分别进行EcoR酶切和EcoR/Bln双酶切,脉冲场电泳分离,p13E-11探针Southern杂交,曲线拟合法计算分析EcoR片段的长度,SPSS11.0统计软件分析数据。结果77.3%(85/110)的个体为标准构型,4q35EcoR片段的长度均值为(87.9±3.3)kb,中位数为78.5kb;10q26同源性片段的长度均值为(90.1±4.1)kb,中位数为73.0kb;经t检验,两者差异无显著性(P>0.05)。19.1%(21/110)的个体检测到易位构型,其中4q→10q易位和10q→4q易位分别为9.1%(10/110)和10.0%(11/110),经卡方检验,两种易位形式的频率基本相等(χ2=0.053,P>0.05)。3.6%(4/110)的个体检测到体细胞嵌合片段。此外,14.5%(16/110)的个体检测到小于35kb的10q26EcoR短片段。结论正常中国人4q35和10q26EcoR片段具有多态性和动态性变化特征,两者具有高度同源性。4q35-10q26易位是导致4q35区不稳定和D4Z4缺失的重要因素,体细胞嵌合现象的出现提示4q与10q区D4Z4的互换重组可能发生于有丝分裂过程中。     

人与猪胆总管的弹性模量及其在异种肝移植中的意义

目的：探讨人与猪胆总管弹性模量的关系，为猪到人异种肝移植提供理论依据。方法：获得5例成年人尸体和50例3～12月龄湖北白猪的胆总管，在软组织生物力学试验机上测定胆总管的压力-直径关系，计算出增量弹性模量（Einc）、压力．应变弹性模量（邱）和容积弹性模量（西）。横断取材，冰冻切片，HE法染色，用计算机图像分析系统测量其管径和壁厚。结果：人与各月龄组猪胆总管的Einc（F=502．08，P=0．00）、Ep（F=137．42，P=0．00）和Ev（F=134．59，P=0．00）差异有统计学意义；7～10月龄猪胆总管的弹性模量与成人的相近（P〉0．05），而3～6月龄及11、12月龄猪的弹性模量比成人的大（P〈0．01）。结论：7～10月龄猪胆总管的生物力学特性与成人的比较接近，故在猪到人异种肝移植时，选用7～10月龄猪的肝脏作为供体材料，也许能提高移植肝的存活率。     

人白血病K562细胞系在裸小鼠体内成瘤性的观察

用K56 2 细胞裸小鼠体内移植模型进行试验治疗研究 ,分别用K56 2 传代细胞直接接种和K56 2 瘤块移植法 ,将人白血病K56 2 传代细胞系 1× 10 7个细胞接种于裸小鼠皮下 ,其成瘤率为 32 % (8/2 5 ) ,38d肿瘤体积达 790 .8± 5 6 5 .7mm3。瘤块移植法未获可测量的瘤体。表明K56 2 细胞裸小鼠体内移植 (或细胞直接接种 )模型难以用作试验治疗研究。     

修饰CⅡTA基因抑制异种器官移植中供体猪SLA的表达

目的 构建可抑制猪MHC（SLA）Ⅱ类分子表达的MHCⅡ类分子反式激活因子（CⅡTA）突变体，抑制人CD4^ T细胞对猪细胞株的免疫应答，为异种器官的应用研究奠定基础。方法 用PCR，人工合成寡核苷酸，限制性内切酶等技术构建不含起始密码子的pcDNA3mCⅡTA2，含起始密码子的pcDNA3mCⅡTA3突变体。用脂质体转染法将上述2种突变体及pcDNA3空载体转入猪细胞株PIEC细胞和L23细胞。用流式细胞术和RT-PCR法观察它们对PIEC/L23细胞SLA-DR/DQ分子的诱导性和组成性表达的影响。通过混合淋巴细胞反应观察人CD4^ T细胞对转入突变体及空载体后的猪细胞的免疫应答强度的变化。结果 在细胞和分子水平证实pcDNA3空载体无此作用。SLAⅡ类分子受抑制的猪细胞已基本丧失了对人CD4^ T细胞的刺激能力。结论 转染能抑制SLAⅡ类分子表达的突变体使PIEC细胞丧失了对人CD4^ T细胞的刺激能力，为异种器官的修饰提供了新的思路。